菌種分離篩選ppt課件-文庫吧資料
2025-05-10 12:07本頁面
【正文】 落用經(jīng)火焰灼燒滅菌的鉤形針或無菌牙簽挑取 ， 點接到瓊脂平板上進(jìn)行影印培養(yǎng) ， 以進(jìn)一步篩選和分離 。 ? 通過高倍放大進(jìn)行鏡檢 ， 可了解氣生和營養(yǎng)孢子形成情況 。 ? 水中放線菌的分離： 為使所要分離的放線菌的數(shù)量種類增多，一般將水樣離心或濾紙過濾，取 離心沉積或濾紙表面沉積 進(jìn)行系列稀釋和涂布。 ? 植物體上放線菌的分離：無菌取植物組織， 干燥 以減少細(xì)菌數(shù)量，剪碎植物材料后植入平板表層后培養(yǎng)。 ? 分離瓊脂平板制備好后 ， 一般皆應(yīng)在 37℃ 培養(yǎng)箱中存放 3天 。 ? 在放線菌分離瓊脂中通常都加入抗真菌劑 制霉菌素或放線菌酮 ， 以抑制真菌的繁殖 。 用剛果紅染色法鑒定篩選降解纖維素的菌株 羧甲基纖維素鈉作培養(yǎng)物 抗生素篩選 檢定菌培養(yǎng)，加上發(fā)酵液 五、放線菌的分離培養(yǎng)基的組成原則 ? 大多數(shù)放線菌的分離培養(yǎng)是在貧脊或復(fù)雜底物的瓊脂平板上進(jìn)行的 。 生長圈法：利用某些具有特殊營養(yǎng)要求的微生物作為工具菌，要 分離 的微生物能在一般培養(yǎng)條件下生長而合成該營養(yǎng)物而使工具菌能生長，形成生長圈。如可溶性淀粉、碳酸鈣等。常用平皿反應(yīng)法： ? 紙片培養(yǎng)顯色法：浸有指示劑濾紙。 二、 分離 ? 目的微生物不純，需 分離 純化。 瓊脂平板在使用前應(yīng)置于 37℃ 培養(yǎng)箱中孵育 l、2天。 加入培養(yǎng)基中的天然提取物 ， 部分培養(yǎng)基中則應(yīng)含有多種碳 、 氮源 ， 如幾丁質(zhì) 、 纖維素或果膠 。這是因為一旦采樣結(jié)束，試樣中的微生物群體就脫離了原來的生態(tài)環(huán)境，其內(nèi)部生態(tài)環(huán)境就會發(fā)生變化，微生物群體之間就會出現(xiàn)消長 (二 )生態(tài)學(xué)參數(shù)及培養(yǎng)基 的組成原則 加入培養(yǎng)基中的天然提取物種類和用量 、 環(huán)境生物物理學(xué)參數(shù)以及用于平板涂布分離樣本的溶劑都會影響實驗中所要分離的細(xì)菌的數(shù)量和種類 。 ? 樣本采集時所需的工具通常有無菌刮鏟 、 土樣采集器 、 鑷子 、 解剖刀 、 手套 、 無菌小塑料袋和塑料瓶等 。 三、將生態(tài)學(xué)方法用于培養(yǎng)分離的一般思路要點 ? 1． 羅列出所要分離的微生物類群； ? 2． 根據(jù)所采集樣本的各種生態(tài)參數(shù) ， 描述所要分離的微生物之生態(tài)系統(tǒng)或棲息地： ? 3． 將若干樣本分成若干類型 ， 如植物和植物各部 ， 土壤 (類型和土層 )、 巖石 、 水 、 昆蟲和發(fā)酵食品等； ? 4． 羅列出所要考察和測量的環(huán)境參數(shù) ， 如 pH、鹽分 、 水分 、 氧化還原電勢及溫度等； 5．列出生物系統(tǒng)中有用的自然底物，如森林土壤中的幾丁質(zhì)、葡萄表皮的果膠； 6．根據(jù)上述 15項中所獲得的數(shù)據(jù)，設(shè)計分離方法，即選擇適宜的稀釋液、底物、試樣、天然浸出汁和培養(yǎng)條件； 7．用標(biāo)準(zhǔn)方法作對照來評價生態(tài)學(xué)分離方法； 8．根據(jù)待檢材料的生態(tài)參數(shù)需要，修改已知的方法； 9．運用特定的富集方法，富集那些可能具有篩選意義的微生物類群。 ? 因此 ， 建立一更為科學(xué)的和針對性不強(qiáng)的分離方法是必要的 。 ? 到目前為止 ， 還沒有一種分離培養(yǎng)方法能揭示一個試樣中所包含的所有微生物總數(shù)和種類 。 據(jù)有的國家規(guī)定 ，微生物中除啤酒酵母 、 脆壁酵母 、 黑曲霉 、 米曲霉和枯草桿菌作為食用無須作毒性試驗外 ，其他微生物作為食用 ， 均需通過兩年以上的毒性試驗
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