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2025-05-09 18:39本頁面
【正文】 附加的白花甜菜染色體上，因此 M14品系是克隆無融合生殖基因的極為難得的材料。 五、 mRNA差別顯示在甜菜無融合生殖基因克隆研究中的應用 植物界中，無融合生殖廣泛存在。銅在營養(yǎng)學中的作用缺銅 6周的大鼠肝臟 mRNA 正常大鼠肝臟 mRNA10個 cDNA片段的差異表達量是對照的 新的未知基因五、 mRNA差別顯示在甜菜無融合生殖基因克隆研究中的應用n 被子植物無融合生殖使其子代繼承了母本所有的遺傳特性，并形成遺傳上穩(wěn)定的，可由種子繁殖的無性系。 根據 這 一特點研制出了一種 線性 質 粒，其 5’ 端各 帶 一個不配 對 的脫氧胸腺 嘧啶核苷（ T）， 采用 該質 ?？蓪?PCR產 物以 TA連 接的方式直接 進 行克隆，即 TA克隆。 去除痕量 DNA逆轉錄成第一鏈 cDNA差異顯示 PCR研究樣 對照樣PAGE電泳回收 差異條帶二次 PCR反 Northern克 隆測 序Blast分析篩選 cDNA文庫 RACE基因全長基因功能驗證提取總 RNA差異條帶標記探針實驗程序陽性片段（ 三） DDRT技術路線 端錨定引物和 20種 5 39。端的不同位置上。 端隨機引物n 5 39。 AG TTT CG TTT GG TTT TG TTT AA TTT TT 5’3’ TT 5’ 3’ TT 5’3’ TT 5’ 3’ TT 5’3’ TT 5’3’ TT 5’3’ AA 3’3’ AA 3’5’ AA 3’5’ AA 3’5’ AA 3’5’ AA 3’5’ AA 3’5’ AA 3’5’ AA 3’5’ AA 3’5’ AA 3’5’ AA 3’5’ 端錨定引物：GUCACGU5’ n PCR擴增n 5’ GUCACA???????GGU N M AAA T11MN 3 39。二、 DDRT技術的原理 （二 ） 基本原理n 3 39。二、 DDRT技術的原理（一 ） 錨定 PCRn 錨定 PCR（ anchored PCR） 是 PCR技術的一種改進，一般的 PCR實驗中需要知道目的基因兩端的序列，而錨定 PCR技術不需要。一、 mRNA差別顯示技術概述n 高等真核生物的基因： 看家基因 /持家基因（ housekeeping gene） 以其組成型表達模式維持細胞的基本代謝活動 發(fā)育調控基因 /奢侈基因（ developmental regulated gene/luxury gene） 以其時空特異性表達模式完成個體的正常生長、發(fā)育與分化n 在任一細胞表達的基因約占總數的 15%， 15000種不同的mRNA一、 mRNA差別顯示技術概述n 基因的差別表達（ differential expression)n 生物的發(fā)育與分化、細胞的周期變化、生物體對外界環(huán)境壓力的反應、個體的衰老與死亡n 哪些基因在何生長發(fā)育階段以及在何種生理狀態(tài)下表達，決定了整個生命過程。第七章 目的基因的分離技術第一節(jié)n mRNA差異顯示技術 （ mRNA differential display reverse transcripion PCR， DDRT—PCR ）第二節(jié)n 抑制消減雜交技術
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