輕工業(yè)微生物實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書-文庫吧資料
2025-04-13 04:04本頁面
【正文】 枯草芽孢桿菌的多數(shù)種都能產(chǎn)生大量的淀粉酶、蛋白酶，因此比較容易分離得到。酵母細(xì)胞出芽率的測定計算次數(shù)總酵母細(xì)胞數(shù)芽體數(shù)出芽率（%）第一次第二次第三次 三次測定結(jié)果平均值：出芽率_______%五、思考題：試述計數(shù)板的計數(shù)原理。（3）計算公式：酵母出芽率=（芽體數(shù)247。：（1） 同上步驟數(shù)出酵母的出芽數(shù)并填在上面表格中（一般需平行計數(shù)三次）。100）x400x10x1000x稀釋倍數(shù) (6) 清洗 計數(shù)板使用完畢后，用蒸餾水沖洗，絕不能用硬物洗刷，洗后待其自行晾干或用濾紙吸干，最后用擦鏡紙揩干凈。（5）計算公式：25x16: 細(xì)胞數(shù)/ml=(80小格細(xì)胞總數(shù)247。② 轉(zhuǎn)換高倍鏡 轉(zhuǎn)至高倍物鏡后，適當(dāng)調(diào)節(jié)光亮度，使菌體和計數(shù)室線條清晰，然后將計數(shù)室一角的小格移至視野中。① 找計數(shù)室 先用低倍物鏡尋找到大方格網(wǎng)位置。（3）加樣：先將蓋玻片置于計數(shù)室上，用吸管吸取一滴稀釋好的菌液滴于蓋玻片邊緣，讓菌液自行滲入，多余的菌液用濾紙吸去，稍待片刻，待酵母細(xì)胞全部沉降到計數(shù)室底部在進(jìn)行計數(shù)。1/400mm2 XBK25計數(shù)板蓋玻片中央平臺：(1).檢查血球計數(shù)板是否有雜質(zhì)和菌體，若有用脫脂棉蘸取95%酒精輕輕擦洗計數(shù)板的計數(shù)室，用蒸餾水沖洗計數(shù)板，用濾紙吸干其上水分，勿用火烤，最后用擦鏡紙揩干凈。無論 是哪一種血球計數(shù)板，都有一共同特點(diǎn)，即計數(shù)室的小格數(shù)相同，均為400個。常用血球計數(shù)板有兩種規(guī)格。本實(shí)驗(yàn)利用血球計數(shù)板對酵母直接計數(shù)，計數(shù)的同時統(tǒng)計出出芽率。三、實(shí)驗(yàn)方法與步驟： 1. 血球計數(shù)板的構(gòu)造:測定微生物生長量的方法很多，對酵母來說有兩大類：總菌計數(shù)和活菌計數(shù)，分別稱為直接和間接法。學(xué)習(xí)并掌握利用血球計數(shù)板對酵母菌細(xì)胞數(shù)進(jìn)行測量和酵母出芽率的測定。酵母菌細(xì)胞體積=（ ）um3。酵母細(xì)胞長=目鏡側(cè)微尺（ ）格=（ ）微米。 五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果在低倍鏡下：目鏡測微尺（ ）格＝鏡臺測微尺（ ?。└瘢跨R測微尺每小格＝（ ）um。 （3）在同一標(biāo)本上測量5~10個酵母細(xì)胞，取其平均植。公式如下： 橢圓形V＝4лab2/3（a,b為長短軸的半徑） 圓球形V＝4лr3/3（r為半徑）酵母菌大小的測定 （1）取下鏡臺測微尺，換上酵母菌水浸片。 在測量時應(yīng)注意將被測量的標(biāo)本移到視野中心，因?yàn)樵谶@個位置上鏡像最清晰．像差也最小，為減少誤差．在測量同一物體時，要重復(fù)3次以上，再取其平均值．還需注意視野中的亮度應(yīng)均勻一致，以免影響測量值的準(zhǔn)確性。按下式計算目鏡測微尺每格的長度等于多少um 目鏡測微尺每格的長度（um）＝鏡臺測微尺的格數(shù)目鏡測微尺的格數(shù)X10012345圖l—5 目鏡測微尺的標(biāo)定上，目鏡測微尺；下，鏡臺測微尺例如，圖1－5中，在低倍鏡下所標(biāo)定的目鏡測微尺的全長（50格），等于鏡臺測微尺70格，則目鏡測微尺每小格代表的長度則為：目鏡測微尺每格的長度（um）＝7050X10＝14 取下鏡臺測微尺，換上要測量的玻片標(biāo)本，用目鏡測微尺測量細(xì)胞長度的格數(shù)，乘以每格的um數(shù)，即為細(xì)胞的實(shí)際長度。 小心移動鏡臺測微尺和目鏡測微尺（如目鏡測微尺刻度模糊，可轉(zhuǎn)動目鏡上透鏡進(jìn)行調(diào)焦），使兩尺左邊的“0”點(diǎn)直線重合，然后由左向右找出兩尺另一次重復(fù)的直線（圖1－5）。 將鏡臺測微尺有刻度的一面朝上放在載物臺上夾好，使測微尺刻度位于視野中央。3．擦鏡紙、濾紙條、鑷子、無菌吸管、酒精棉球。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)會測微尺的使用和計算方法。它裝在一個特別的目鏡中．右邊由一個能旋轉(zhuǎn)的小輪控制著，輪上有刻度，分成100格，該輪每旋轉(zhuǎn)一圈，目鏡內(nèi)能移動的指示線就從標(biāo)尺一端向另一端移動－格。方格的大小和數(shù)目各有不同，有236和
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