【正文】 可以排除。 在接種三糖鐵瓊脂的同時，再接種蛋白陳水(供做靛基質(zhì)試驗)、尿素瓊脂()、氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基和賴氨酸脫竣酶試驗培養(yǎng)基及對照培養(yǎng)基各1管，于36177。在三糖鐵瓊脂內(nèi)，腸桿菌科常見屬種的反應(yīng)結(jié)果見表2。1℃分別培養(yǎng)18～24h(DHL)或40～48h(BS)，觀察各個平板上生長的菌落，沙門氏菌Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ和沙門氏菌Ⅲ在各個平板上的菌落特征見表1。兩種增菌液可同時劃線接種在同一個平板上。1℃培養(yǎng)18～24h。1℃培養(yǎng)4h(干蛋品培養(yǎng)18～24h)，移取10mL，轉(zhuǎn)種于100mL氯化鎂孔雀綠增菌液（MM）或四硫酸鈉煌綠（TTB）增菌液內(nèi)，于42℃培養(yǎng)18～24h。1℃ 1824h挑取可疑菌落TSI（斜面、底層、產(chǎn)氣、H2S），蛋白胨水（），尿素（），KCN, 賴氨酸非如左述的各種反應(yīng)結(jié)果H2S 　靛基質(zhì)尿素　KCN　賴氨酸+/H2S +　靛基質(zhì)+尿素　KCN　賴氨酸+H2S +　靛基質(zhì)尿素　KCN　賴氨酸+ONPG甘露醇、山梨醇非沙門氏菌沙門氏菌血清學(xué)試驗沙門氏菌血清學(xué)試驗非沙門氏菌報告5 操作步驟 前增菌取檢樣25g，加入225mL緩沖蛋白胨水于均質(zhì)杯內(nèi)。1℃ 1824hDHLBS36177。4 檢驗程序檢樣25g+225mlBP胨水沙門氏菌檢驗程序如下： 　　　 36177。2 設(shè)備和材料吸管（1ml、10ml）、恒溫培養(yǎng)箱（36177。注：本文參照SN016992《出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗方法》（六）沙門氏菌檢驗1 主題內(nèi)容與適用范圍本文規(guī)定了食品中沙門氏菌的檢驗方法。 大腸桿菌與非大腸桿菌生化鑒別如下靛基質(zhì)MRVP枸掾酸鹽鑒定（型別）+++典型大腸桿菌非典型大腸桿菌+++++典型中間型非典型中間型+++++典型產(chǎn)氣腸桿菌非典型產(chǎn)氣腸桿菌如出現(xiàn)上表以外的生化反應(yīng)類型，表明培養(yǎng)物可能不純，應(yīng)重新劃線分離，必要時做重復(fù)試驗。 革蘭氏染色：取18h營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物作革蘭氏染色。1℃的培養(yǎng)48177。1℃的培養(yǎng)96h記錄有無生長。如培養(yǎng)物變紅色，為甲基紅試驗陽性，若變黃色則為陰性反應(yīng)。以無菌操作移取培養(yǎng)物1ml至13mm*100mm試管中，加5％，40％，振搖試管后靜置2h，如出現(xiàn)伊紅色，為VP試驗陽性。1℃的培養(yǎng)48177。2h后，上層出現(xiàn)紅色為靛基質(zhì)陽性反應(yīng)。 色氨酸肉湯：在36177。1℃的培養(yǎng)1824h。 如有典型菌落，則從每個平板上至少挑取2個典型菌落；如無典型菌落，則從每個平板上至少挑取2個可疑菌落。2h。7 大腸桿菌測定 （EMB）平板，36177。產(chǎn)氣管為糞大腸菌群試驗陽性；不產(chǎn)氣管為糞大腸菌群試驗陰性。℃℃不產(chǎn)氣的產(chǎn)氣腸桿菌或其他大腸菌群細(xì)菌作陽性和陰性對照。2h。 177。6 糞大腸菌群測定 用接種環(huán)將所有48177。 記錄所有BGLB肉湯管的產(chǎn)氣管數(shù)。1℃的培養(yǎng)48177。 大腸菌群的證實試驗 將所有產(chǎn)氣管用直徑為3mm的接種環(huán)移種到煌綠乳糖膽鹽（BGLB）肉湯管中。 觀察試管的產(chǎn)氣情況：檢查倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生，記錄在24h和48h內(nèi)產(chǎn)氣的LST肉湯管數(shù)。1℃的培養(yǎng)48177。每個稀釋度接種三管月桂基硫酸鹽胰蛋白月示（LST）肉湯，每管接種1ml。迅速振搖，將樣品混勻，制成1：100的樣品勻液。如樣品均質(zhì)時間超過2min，應(yīng)在均質(zhì)杯外加冰水冷卻。如有包裝，則用75％乙醇在包裝開口處擦拭后取樣。1℃、177。本文適用于航空食品的檢驗。5 結(jié)果報告報告每克（毫升）樣品中平板菌落數(shù)或估計的平板菌落數(shù)。記錄時，只有在換算到每克（毫升）樣品中平板菌落數(shù)時，才能定下兩位有效數(shù)字，第三位數(shù)字采用四舍五入的方法記錄。否則，應(yīng)找出原因，加以校正。如不能立即計數(shù)，應(yīng)將平板存放于04℃，但不得超過24h。 菌落計數(shù)和記錄 培養(yǎng)后，立即計數(shù)每個平板上的菌落數(shù)。2h。 培養(yǎng)待瓊脂凝固后將平皿翻轉(zhuǎn)，立即放進36177。同時將平板計數(shù)瓊脂傾入加有1ml稀釋劑的另一滅菌平皿作空白對照。立即將平皿內(nèi)的樣品液和瓊脂培養(yǎng)基充分混合。每個稀釋度的樣品液用兩個平皿。 平板接種 對于每個樣品，選用合適的三個連續(xù)稀釋度的樣品液進行平板計數(shù)。從容器中吸取樣品勻液和以后的稀釋操作中，吸管尖不要碰著瓶口。迅速振搖，將樣品混勻，制成1：100的樣品勻液。如樣品均質(zhì)時間超過2min，應(yīng)在均質(zhì)杯外加冰水冷卻。如有包裝，則用75％乙醇在包裝開口處擦拭后取樣。2 設(shè)備和材料超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱（36177。（四）食品平板菌落計數(shù)1 主題內(nèi)容與適用范圍本文規(guī)定了食品平板菌落計數(shù)的方法。 實驗設(shè)備應(yīng)定期進行計量檢測，確保儀器的準(zhǔn)確性。7 設(shè)備使用原則 實驗設(shè)備的使用由實驗員嚴(yán)格按照操作說明書進行，其他人員不得隨意操作?？芍蒙僭S玻璃珠于三角瓶內(nèi)，防止暴沸。 無菌水的制備： （稀釋水）裝入試管中。 塞硅膠塞：裝好培養(yǎng)基的試管應(yīng)塞上硅膠塞，松緊合適，緊貼管壁，不留縫隙，約1/2塞入內(nèi)，這樣即可過濾空氣，避免雜菌侵入，又可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)。 器材三角瓶、試管、燒杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、鋁箔紙、角匙、杜氏小管、硅膠塞、電爐 培養(yǎng)基的種類營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基、乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基、伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(附加抗菌素)、平板計數(shù)瓊脂、月桂基硫酸鹽胰蛋白凍肉湯、煌綠乳糖膽鹽肉湯、EC肉湯、高鹽察氏瓊脂、三糖鐵瓊脂等 方法步驟 培養(yǎng)基的制備： 稱量：根據(jù)培養(yǎng)基的配方，稱取適量藥品于搪瓷杯中； 溶解：用量筒量取所需水量，置電爐上加熱，一邊攪拌，至完全溶解，加熱至沸騰，拔掉電源，待冷卻； 分裝：根據(jù)不同需要，立即趁熱分裝入三角瓶或試管中，分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜，分裝試管一般為管長的1/5（需根據(jù)試管的大小而定）。培養(yǎng)基制成后的物理狀態(tài)可分為液體、固體、半固體三種類型。用過的移液管、倒管先用自來水洗去表面的殘液，再放在洗衣粉水中浸泡一小時以上，再用自來水沖洗至管內(nèi)壁無殘渣，最后用蒸餾水換洗次，晾干后入恒溫干燥箱中烘干。用過的載玻片及蓋玻片，應(yīng)用紙擦去油垢，再放在5%的洗衣粉水中煮30分鐘后立即用自來水沖洗，然后放在稀的洗液中浸泡2小時，再用自來水沖洗至中性。洗好后的器皿應(yīng)倒置晾干或置于干燥箱中干燥至無水滴。 洗滌劑的種類：水、洗衣粉、檸檬洗滌劑、肥皂 洗滌方法 含有瓊脂培養(yǎng)基的玻璃器皿的洗滌方法：事先應(yīng)將器皿中的瓊脂刮去，然后用清水洗滌，并用試管刷刷其瓶壁，以除去粘污在壁上的灰塵和油垢。 難洗滌的器皿不要與易洗滌的器皿放在一起，以免增加洗滌的麻煩。 強酸、強堿及其它氧化物和有揮發(fā)性的有毒物品，都不能倒在洗滌槽內(nèi)，以免污染環(huán)境水質(zhì)，必須倒在廢水缸中。 一般新的玻璃器皿用2%的鹽酸液浸泡數(shù)小時，后用水沖洗干凈。5 玻璃器皿的清洗要求 目的 為了保證微生物實驗順利進行，保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，不影響實驗進度，必須把器皿徹底清洗干凈。 打碎的培養(yǎng)物，立即用5%煤酚皂液或石炭酸噴灑和浸泡被污染部位，浸泡半小時后再擦拭干凈。 涂片染色沖洗片的液體，一般可直接沖入下水道，染色的玻片放入5%煤酚皂液中浸泡24h后，煮沸洗滌。 經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物，必須經(jīng)121℃，30min高壓滅菌。4 有毒有菌污物處理要求微生物實驗室所用實驗器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理，一律不得帶出實驗室。 凡屬合格物品，應(yīng)標(biāo)有滅菌日期及有效期限。 取出的物品掉落在地或誤放不潔之處，或沾有水液，均視為受到污染，不可作為無菌物品使用。 取出的物品，如為包裝有明顯的水浸者，不可作為無菌物品使用。 滅菌溫度與時間 壓力蒸氣滅菌鍋滅菌溫度與時間見下表：物 品滅菌時間，min115℃121℃不含糖等耐熱培養(yǎng)基15含糖類等耐熱培養(yǎng)基15～20染菌培養(yǎng)物30器械器皿30 滅菌處理：滅菌后物品，按正常情況已屬無菌，從滅菌器中取出應(yīng)仔細(xì)檢查，以免再度污染。 關(guān)閉排氣閥，使蒸氣壓上升到規(guī)定要求，并維持規(guī)定時間（按滅菌物品性質(zhì)與有關(guān)情況而定）。 手提式壓力鍋將頂蓋上的排氣管插入消毒桶內(nèi)壁的方管中（無軟管或軟管銹蝕破裂的滅菌器不得使用）。 對有自動電子程序控制裝置的滅菌器，使用前應(yīng)檢查規(guī)定的程序，是否符合于進行滅菌處理的要求。 設(shè)備檢查 檢查