菌種的傳代與保藏ppt課件-文庫吧資料
2025-03-28 05:51本頁面
【正文】 ， 酵母菌和放線菌 ， 對細(xì)菌保藏效果較差 。 ? 取化學(xué)純的液體石蠟裝在試管中 ， 每管10~15ml， 加塞 ， 瓶口包上紙 ， 121℃ 高壓滅菌 30min， 取出置 37℃ 溫箱或 110~ 170 ℃ 烤箱中 1 ~ 2 h 或干燥器內(nèi)除去液體石蠟中的水分 。 液體石蠟保存法： 本法是用液體石蠟將培養(yǎng)物與空氣隔絕，以降低菌種的生理生化水平，并可防止水分蒸發(fā)，從而延長菌種的保藏期。 ? 保藏溫度和時間都不是絕對的 ， 個別菌種不宜低溫保存 。 ? ? 每次移植后 ， 應(yīng)與原菌種的編號 、 名稱逐一核對 ， 確證培養(yǎng)基特征和純度無誤后再繼續(xù)保藏 。 ? 生孢梭菌可用庖肉培養(yǎng)基或硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基 （ 前者效果更佳 ） 。 缺點(diǎn)是 —— 保藏期較短；傳代次數(shù)多易發(fā)生變異及污染。由此可以減少菌液制備工作量和反復(fù)操作黑曲霉的風(fēng)險(xiǎn)。 大腸桿菌斜面 藤黃微球菌斜面 生孢梭菌 白色念珠菌 需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 黑曲霉改良馬丁瓊脂斜面不同培養(yǎng)時間的生長形態(tài) 黑曲霉改良馬丁瓊脂斜面典型斜面正面為黑褐色厚絨狀，色澤均一，不應(yīng)有雜色；斜面?zhèn)让鏌o色，接近菌層培養(yǎng)基略帶黃色。若用半固體高層培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)，一般可保藏半年 至 一年，有的甚至更長時間。放在 4℃ 左右的冰箱中保藏。 保藏期滿應(yīng)及時進(jìn)行移種 。 在實(shí)際工作中 ， 往往多種條件同時使用 ,以提高保藏效果 。 ? 低溫、干燥、真空是用于菌種保藏的重要手段。 ? 大腸埃希菌 [CMCC (B) 44102] ? 乙型副傷寒沙門桿菌 [CMCC (B) 50094] ? 銅綠假單胞菌 [CMCC (B)10104] ? 金黃色葡萄球菌 [CMCC (B)26003] ? 生孢梭菌 [CMCC(B)64941] ? 枯草芽孢桿菌 [CMCC(B)63501] ? 短小芽孢桿菌 [CMCC(B)63202] ? 白色念珠菌 [CMCC(F)98001] ? 黑曲霉 [CMCC(F)98003] 三、常用菌種保藏方法 (一 ) 菌種保藏的原理 ? 根據(jù)微生物的菌種生理、生化特性，在人工創(chuàng)造的條件下盡量降低微生物細(xì)胞的代謝強(qiáng)度，使細(xì)胞基本處于休眠狀態(tài)，生長繁殖受到抑制但又不至于死亡，以減低菌種的變異率。 許多國家都已建立了專門的菌種保藏機(jī)構(gòu)，如美國標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏所（ ATCC）、英國的國立標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏所（ NCTC）、還有全球性的世界菌種保藏聯(lián)合會（ WFCC）。 菌種是從事微生物學(xué)及生命科學(xué)研究的基本材料，在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，診斷制品的制備，菌苗的生產(chǎn)、微生物致病性研究，藥物的抑菌試驗(yàn)及藥品微生物檢驗(yàn)等都有一套完整的菌種 .微生物具有生命活力， 在傳代過程中易發(fā)生變異甚至死亡，因此菌種保藏是一項(xiàng)重要的基礎(chǔ)工作，是微生物學(xué)基礎(chǔ)工作的一項(xiàng)重要內(nèi)容，也是藥品微生物工作中的一項(xiàng)常用技術(shù)。 一、菌種保藏的意義 如藥品中的控制菌檢查使用的陽性對照菌須防止因多次傳代而使陽性對照菌的典型生物學(xué)特征發(fā)生變化及菌株的死亡，保證達(dá)到菌種長期正確的形態(tài)； 如藥品微生物學(xué)檢驗(yàn)過程中，檢出的可疑致病菌須妥善保藏，以達(dá)到進(jìn)一步鑒定的目的，保證用藥安全。 二、菌種代號的意義 ? 國內(nèi)藥品微生物檢驗(yàn)所用的菌種代號是 ? CMCC（ F） 或 CMCC（ B） ? CMCC —— 中國醫(yī)學(xué)菌種保藏中心 ? B (Bacteria)代表細(xì)菌 ， F (Fungi)代表真菌 。低溫、干燥、缺氧、缺
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