藥品檢驗(yàn)用菌種的傳代和保藏-文庫吧資料
2025-06-01 18:20本頁面
【正文】 過期菌種應(yīng)及時(shí)清理、登記，并經(jīng) 121 ℃ 、30分鐘高壓消毒滅菌。 b：每一子菌種都應(yīng)以適當(dāng)標(biāo)簽、標(biāo)記來表示名稱、標(biāo)準(zhǔn)號、接種日期和傳代日期。 ? 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有文件管理標(biāo)準(zhǔn)菌種（從原始菌種到工作用菌種）。 ? 細(xì)菌一個月傳代一次，枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉可三個月傳代一次。 ? 接種后，將斜面置規(guī)定溫度、時(shí)間培養(yǎng)。 ? 接種操作：左手拿住菌種管，將管口靠近火焰旁，右手拿接種棒，將白金耳燒紅約 30秒，桿部通過火焰滅菌。 ? 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入緩沖間，換鞋、穿無菌衣、戴口罩，用 1： 1000新潔爾滅溶液消毒雙手，并將培養(yǎng)基及菌種移入陽性菌接種室。 36 實(shí)驗(yàn)室菌種傳代操作步驟 ? 接種前用 1： 1000新潔爾滅擦拭工作臺面，然后開紫外燈消毒 30分鐘。 保存菌種傳代或凍干均應(yīng)填寫專用記錄，菌種管上應(yīng)有標(biāo)簽，表明菌種編號、代次、批號、日期。 菌種傳代次數(shù)規(guī)定： 2022版藥典規(guī)定不超過 5代。 ? 保藏的濕度通常在 50％～ 70％為宜。 ? 絲狀真菌于 4～ 6℃ 保藏，每 4個月移植一次。 ? 放線菌于 4～ 6℃ 保藏，每 3個月移植一次。 ? 對細(xì)菌、酵母菌、絲狀真菌等都有一定的效果，有些菌種最長可達(dá) 17年 。 22 土壤保藏法 ? 用土壤替代沙管保藏法中的河沙，其余操作與沙管保藏法相同 ? 適合保藏 土壤細(xì)菌、放線菌和絲狀真菌，時(shí)間為 2～ 6年。甘油冷凍管最好在 30 ℃ 貯存。 ? 該法對酵母菌的保藏最為有效，對大多數(shù)細(xì)菌保藏效果一般。 液體石蠟液面以高出培養(yǎng)基上端 ～1cm為宜 4～ 6 ℃ 冰箱保藏 19 液體石蠟保藏法 ? 確保保藏環(huán)境的干燥，避免長霉。 ? 生孢梭菌用硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、乙型溶血性鏈球菌及肺炎球菌用血肉湯（瓊脂）培養(yǎng)基 18 液體石蠟保藏法 一般步驟為：準(zhǔn)備液體石蠟并滅菌去水備用。 b:用半固體高層培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)，可保藏半年至一年。 15 定期移植保藏法 需定期檢查 移植進(jìn)行時(shí)，應(yīng)仔細(xì)核對 集菌培養(yǎng)完成后，應(yīng)比較培養(yǎng)特征 應(yīng)注意觀察各代之間的變化 16 瓊脂斜面低溫保藏法 菌種的典型菌落接種至斜面，規(guī)定的溫度和時(shí)間培養(yǎng)，充分生長，硅膠塞換成無菌橡膠塞。 擔(dān)子菌于 4～ 6℃ 保藏，每 3個月移植一次。 酵母菌于 4～ 6℃ 保藏，每 4～ 6個月移植一次。 14 定期移植保藏法 細(xì)菌置 4～ 6℃ 保藏，芽孢桿菌每 3～ 6個月移植一次，其他細(xì)菌每月移植一次。 13 定期移植保藏法 一般步驟為： 將菌種接種在所要求的培養(yǎng)基上，置最適溫度下集菌培養(yǎng)。如果是細(xì)菌，將重新形成的菌落各作穿刺培養(yǎng)，其培養(yǎng)特征應(yīng)當(dāng)是一致的。 11 影響集菌培養(yǎng)效果的若干因素 ? 溫度 ? 滲透壓 ? 氧氣 ? 光 ? pH值和氧化還原電位 ? 培養(yǎng)基 ? 抗生素 12 驗(yàn)證純培養(yǎng)的主要依據(jù) 用顯微鏡觀察時(shí)，全部的生物個體是相似的，如果是細(xì)菌，對革蘭氏染色反應(yīng)應(yīng)當(dāng)是一致的。 10 移植（又稱接種）的兩種
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