菌種的傳代與保藏ppt課件-文庫(kù)吧資料
2025-05-09 05:19本頁(yè)面
【正文】 ，可進(jìn)行平板分離單菌落。 ? 取滅菌鑷子，在火焰旁，將炸裂的管口打開(kāi)，放入滅菌雙碟內(nèi)，另取 1支滅菌滴管，在火焰旁吸取營(yíng)養(yǎng)肉湯少許，加至菌種管底部，將凍干菌攪動(dòng)促使溶解，隨即吸出管內(nèi)菌液，分別接種至營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面及普通肉湯內(nèi)，并將滴管及菌種管投入消毒液內(nèi)，將已接種的營(yíng)養(yǎng)肉湯及營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面置 35~37℃ 培養(yǎng) 22~24 h。 ?先用砂輪將凍干菌種安瓶頸部挫出刻痕 ,再將凍干菌種管外壁用碘酒擦洗消毒、稍干，用 75% 乙醇棉擦凈，放在滅菌雙碟內(nèi)，待干。 ? 菌種的復(fù)蘇與保存在專用無(wú)菌室或超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行 。 ⑥ 制備無(wú)菌液體石蠟時(shí) ， 每管裝量不能太多 ， 否則分裝到菌種培養(yǎng)基中易造成污染 。 ⑤ 液體石蠟在菌種管中高出培養(yǎng)基的高度要嚴(yán)格控制 ， 如太多 ， 會(huì)影響菌種交換氣體 ， 使保藏效果不好；如太少 ， 斜面容易干燥 ， 將縮短保藏期 。 ③ 使用菌種時(shí) ， 先將菌種管傾斜使液體石蠟流至一 邊 ， 再用接種針挑取培養(yǎng)物接種到新鮮斜面上培 養(yǎng) ， 待長(zhǎng)出新培養(yǎng)物后 ， 再移種一次到新斜面上 即可使用 。 （ 4） 注意事項(xiàng)： ① 保藏時(shí) ， 用新鮮培養(yǎng)物接種 ， 應(yīng)檢查純度和特征 后 ， 方可進(jìn)行保 藏 。 ? 適用范圍：適用于保藏部分霉菌 ， 酵母菌和放線菌 ， 對(duì)細(xì)菌保藏效果較差 。 ? 取化學(xué)純的液體石蠟裝在試管中 ， 每管10~15ml， 加棉塞 ， 瓶口包上紙 ， 121℃ 高壓滅菌 30min， 取出置 37℃ 溫箱或 110~ 170 ℃ 烤箱中 1 ~ 2 h 或干燥器內(nèi)除去液體石蠟中的水分 。 液體石蠟保存法： 本法是用石蠟將培養(yǎng)物與空氣隔絕，以降低菌種的生理生化水平，并可防止水分蒸發(fā)，從而延長(zhǎng)菌種的保藏期。 ? 保藏菌種的培養(yǎng)基應(yīng)無(wú)糖 ， 其他菌類含糖小于 2 %為宜 ， 以免產(chǎn)酸過(guò)多 ， 影響菌種存活 。 ? 必須定期檢查保藏菌種冰箱的溫度 、 濕度以及菌種管的棉塞是否松動(dòng)或生霉 ， 如有異常應(yīng)及時(shí)處理 。 （ 4） 注意事項(xiàng)： ? 保藏的菌種應(yīng)是生命活力旺盛的新鮮培養(yǎng)物 ， 至少應(yīng)是第三代的培養(yǎng)物 。 大腸桿菌斜面 金黃色葡萄球菌斜面 生孢梭菌 白色念珠菌 需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基 真菌培養(yǎng)基 各類菌種保藏條件及時(shí)間 菌 種 培 養(yǎng) 基 保存溫度 傳 種 時(shí) 間
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