hplc色譜條件的優(yōu)化與色譜-文庫吧資料
2025-01-22 12:23本頁面
【正文】 呈指數(shù)增加時，靈敏度也呈 指數(shù)增加，數(shù)據(jù)表明，柱溫從 30℃ 上升至 90℃ ，定量限約可降低 10倍。F 式中 h=1/N 理論塔板高度 F=流動相流速 Cm， Cs=溶質(zhì)在流動相和固定相中的濃度 B=縱向擴(kuò)散的貢獻(xiàn)因子（縱向濃度梯度） A=渦流擴(kuò)散的貢獻(xiàn)因子（色譜柱的不均勻性） 溶質(zhì)在液體中的擴(kuò)散系數(shù)比氣體中小 4— 5個數(shù) 量級，所以在 HPLC中在通常的流速條件下 B項的貢獻(xiàn)可忽略 不計。F=AF1/3+B/F+Cm N 理論塔板數(shù) a） N=16（ tR/W） 2或 （ tR/Wh/2） 2 b） N對分離度的影響 Rsα N c）提高柱效的方法 ● 增加柱長 ● 改進(jìn)柱填料（純度、物理性狀） ● 提高填裝質(zhì)量 α 分離因子 a） α = K2/K1 = t＇ R2 / t＇ R1 b） α 對分離度的影響 Rs α （ α 1） /α 影響敏感， α 的微小變化可顯著改變 Rs c）改變 α 的方法 在保持流動相極性基本不變的前提下， 適當(dāng)改變流動相的組成、組分的比例或添加 調(diào)節(jié)劑。 混合溶劑的溶劑強度按體積比取加權(quán)平 均值。 c）改變 K的方法 改變流動相的溶劑強度（常以溶劑的溶解 度參數(shù)或極性參數(shù)表示）。研究柱效與各種影響因
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