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正文內(nèi)容

hplc色譜條件的優(yōu)化與色譜(參考版)

2025-01-19 12:23本頁(yè)面
  

【正文】 pH 引入次級(jí)化學(xué)平衡(電離、絡(luò)合、 離子對(duì)等)改變?nèi)苜|(zhì)的濃度或存在形式,用 以提高選擇性。 柱后應(yīng)配冷卻單元,使洗脫液溫度快速 降到一固定值(如 35℃ ),以避免檢測(cè)信號(hào) 的波動(dòng)。 這種溫度使選擇性改變的特性在混合物 的分離中非常有用,因?yàn)樗恍韬?jiǎn)單地改變 柱溫,而無(wú)需改變其他色譜條件。dp 式中 2λ為與填充均勻性有關(guān)的因數(shù) dp為填料的粒徑 b)小的 dp有利于傳質(zhì) c)減小填料粒徑可顯著提高柱效 由上表可見,減小 dp可顯著提高柱效 → 縮短 恒壓 色譜柱 → 增加流速 ↓ ↓ 縮短洗脫時(shí)間 三、影響分離效果的其他因素 溫度 柱溫提高到 40℃ 以上,謂之 HTLC( 40℃ — 200℃ ) ● 溫度上升 → 流動(dòng)相粘度下降 → 流速增加 ( ≤8ml/min) → 容量因子 K下降 → 保留時(shí) 間縮短 ● 粘度降低 → 柱壓下降 → 可采用細(xì)粒徑填料 (< 3um)或長(zhǎng)色譜柱 → 提高柱效 ● 提高靈敏度 色譜峰高與柱溫呈指數(shù)函數(shù)關(guān)系,即峰高的對(duì)數(shù)與柱溫呈線性關(guān)系 峰高隨柱溫
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