功能蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法-文庫(kù)吧資料
2025-05-20 14:09本頁(yè)面
【正文】 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)、抗原 抗體以及 DNA蛋白質(zhì)之間作用的研究，為功能基因組學(xué)的研究提供了一種新的方法。 ? T7噬菌體展示文庫(kù)可以展示相當(dāng)部分表達(dá)的蛋白質(zhì)，甚至可以保持蛋白的一定構(gòu)象。 這一技術(shù)有效地實(shí)現(xiàn)了基因型和表型的體外轉(zhuǎn)換，即在二者之間架起了聯(lián)結(jié)的橋梁，使得研究者完全可以在分子克隆的基礎(chǔ)上，有效地實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)構(gòu)象的體外控制，從而可以在體外獲得具有良好生物學(xué)活性的表達(dá)產(chǎn)物。 噬菌體展示技術(shù) 自 1985年 Smith G P等創(chuàng)建噬菌體展示技術(shù)，其原理是：以經(jīng)過(guò)改建的噬菌體為載體，把外源基因插入噬菌體外殼蛋白基因 PⅢ 區(qū)或 PⅧ 區(qū)，從而使表達(dá)的外源肽或蛋白質(zhì)展示在噬菌體的表面，并使表達(dá)產(chǎn)物保持良好的空間構(gòu)象。在液相系統(tǒng)中，為了區(qū)分不同的探針，在球形基質(zhì)的制造過(guò)程當(dāng)中，摻入了兩種不同的紅色分類(lèi)熒光，根據(jù)這兩種紅色分類(lèi)熒光的比例不同 (色彩編號(hào) )，區(qū)分不同的探針。 液相蛋白質(zhì)芯片 是一種新型的、高度靈活的多元蛋白質(zhì)研究平臺(tái)，可以適用于蛋白質(zhì)組研究、臨床研究和藥物研究中的各種蛋白質(zhì)分析。 靶蛋白質(zhì)的獲得： ； ； (如細(xì)菌、酵母等 )在芯片上原位表 達(dá)蛋白質(zhì)（ living芯片） 。 抗體芯片檢測(cè)的結(jié)果不是蛋白質(zhì)的絕對(duì)含量而是目的蛋白質(zhì)在兩個(gè)樣品之間的相對(duì)峰度。微型化、集成化、高通量化是抗體芯片重要特點(diǎn)。 檢測(cè)結(jié)果經(jīng)過(guò)軟件分析處理后 ， 可繪制出質(zhì)譜圖 ， 顯示相關(guān)蛋白質(zhì)的分子量 、 含量等信息 。 蛋白質(zhì)芯片是核心部分 ， 芯片上固定的介質(zhì)可以是陰離子 、 陽(yáng)離子 、 疏水性 、 親水性 、 金屬等 ，根據(jù)蛋白質(zhì)的化學(xué)特性而有選擇性地捕獲特異的蛋白質(zhì) 。 蛋白質(zhì)芯片分類(lèi) 根據(jù) 固定介質(zhì) 的不同 ,可以分為兩大類(lèi) : 化學(xué)型蛋白質(zhì)芯片（ SELDITOFMS蛋白質(zhì)芯片） 生物型蛋白質(zhì)芯片（如抗體、受體、配體等）； 根據(jù) 片基材料 的不同可以分為： 膜芯片、玻璃芯片和液相芯片等。熒光標(biāo)記 是芯片息采集中使用最多也是最成功的報(bào)告標(biāo)志。 ? 蛋白質(zhì)芯片技術(shù) ? 噬菌體展示技術(shù) ?
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