植物蛋白質(zhì)組學(xué)ppt課件-文庫(kù)吧資料
2025-01-20 22:30本頁(yè)面
【正文】 。如： MALDITOFMS ESIQMS ESIIFMS Topdown蛋白質(zhì)組學(xué)：可以直接分析完整的蛋白質(zhì)樣品，不需要經(jīng)過(guò) 2DE的前處理。 FTMS：鑒定氨基酸的序列和分析蛋白質(zhì)修飾。 偶聯(lián)反應(yīng) 環(huán)化斷裂反應(yīng) 轉(zhuǎn)化反應(yīng) 質(zhì)譜 質(zhì)譜儀 離心源 質(zhì)量分析器 離子檢測(cè)器 基質(zhì)輔助激光解吸電離（ MALDI） 電噴霧電離（ ESI） 飛行時(shí)間（ TOF） 四級(jí)桿（ Q） 離子阱（ IT） 常用的質(zhì)譜儀有： MALDITOFMS ESIQMS ESIITMS 傅里葉變換離子回旋共振么質(zhì)樸（ FTMS） 進(jìn)樣系統(tǒng) 離子源 質(zhì)量分析器 檢測(cè)器 質(zhì)譜分析原理 Typical result from MALDITOF Peptide fingerprinting (PMF) with MALDITOF tryptic digestion Gel Protein Database ? 1 2 3 pare: ?? is identical to ?? mass spectrometry stored data or theoretical? peptides 各種質(zhì)譜儀的適用范圍： MALDITOFMS：分析鑒定一些相對(duì)比較簡(jiǎn)單的多肽混合物和進(jìn)行高通量蛋白質(zhì)組的研究。它可以被各種技術(shù)層析出來(lái)，然后鑒定。 第二步：環(huán)化斷裂反應(yīng)， PCT肽在無(wú)水強(qiáng)酸介質(zhì)如三氟乙酸中，最靠近 PTC基的肽鍵將發(fā)生斷裂，同時(shí) PTC氨基酸殘基環(huán)化成ATZ衍生物。 五 . 多塊膠垂直二維 SDSPAGE系統(tǒng) 優(yōu)點(diǎn)：提高二維電泳效率和實(shí)驗(yàn)重復(fù)性 六 . 2DE工作站 優(yōu)點(diǎn)： 提高以 2DE為基礎(chǔ)的蛋白質(zhì)組研究的自動(dòng)化程度和工作效率 氨基酸序列測(cè)定 氨基酸測(cè)序主要使用的是 N端測(cè)序 Edman化學(xué)降解法。 選用不同 pH范圍的膠條，通過(guò)重疊幾次窄范圍的 IPG凝膠電泳結(jié)果，可以提高在某一區(qū)段尤其是蛋白質(zhì)集中區(qū)段內(nèi)的分辨率 pH范圍 3— 10 4— 7 — 上樣量 40ug 80ug 120ug 四 . 雙向熒光差異凝膠電泳 原理：雙向熒光差異凝膠系統(tǒng)（ DIGE）在傳統(tǒng)雙向電泳技術(shù)的基礎(chǔ)上，結(jié)合了多重?zé)晒夥治龅姆椒?，在同一塊膠上共同分離多個(gè)分別由不同熒光標(biāo)記的樣品，分析它們之間的差異性。 優(yōu)點(diǎn)：降低蛋白質(zhì)樣品的復(fù)雜性，提高分辨率，了解蛋白質(zhì)的定位。這 3 個(gè)分離份依次分離，使我們能觀察到其它方法觀察不到的蛋白。下面的流程圖將幫您確定哪種試劑盒對(duì)
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