核酸分析技術(shù)ok(1)-文庫(kù)吧資料
2025-05-20 01:01本頁(yè)面
【正文】 途：制備高純度的 DNA片段。 2 非變性聚丙烯酰胺凝膠 用于雙鏈 DNA片段的分離和純化。 變性的 DNA在這些凝膠中的遷移率幾乎與其堿基組成及序列完全無關(guān)。 （一） 聚丙烯酰胺凝膠的本質(zhì) ? 優(yōu)點(diǎn) 聚丙烯酰胺凝膠具有機(jī)械強(qiáng)度好，有彈性，透明，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，對(duì) pH和溫度變化小，沒有吸附和電滲作用小的特點(diǎn)，是一種很好的電泳支持介質(zhì)。 在雙功能交聯(lián)劑如 N， N`亞甲雙丙烯酰胺 的參與下的共聚合反應(yīng)中，聚丙烯胺的交聯(lián)形成三維帶狀網(wǎng)格結(jié)構(gòu)。 5 所用的電壓 低電壓時(shí) DNA片段遷移率與所用的電壓成正比。 核酸電泳的上樣緩沖溶液 6 凝膠載樣緩沖液 類型 6 緩沖液 貯存溫度 I %溴酚藍(lán) 4℃ %二甲苯氰 FF 40% (m/V)蔗糖水溶液 II %溴酚藍(lán) 室溫 %二甲苯氰 FF 15% Ficoll(Type400)水溶液 III %溴酚藍(lán) 4℃ %溴酚藍(lán) %二甲苯氰 FF 30%甘油水溶液 IV 4℃ 40% (m/V)蔗糖水溶液 核酸電泳的指示劑 ? 指示劑：溴酚蘭、二甲苯青 ? 溴酚蘭 ：在堿性液體中呈紫蘭色，電泳中，溴酚蘭的遷移率與雙鏈線性 DNA片段 ? 二甲苯青： 水溶液呈蘭色，電泳時(shí)，其遷移速率與雙鏈線性 DNA大致相當(dāng) 瓊脂糖凝膠濃度 % 1% % 2% 遷移率 1Kb 瓊脂糖凝膠濃度 1% % 遷移率 2Kb 瓊脂糖凝膠電泳分離 DNA 3. 電泳 瓊脂糖凝膠電泳分離 DNA 4. DNA染色 溴化乙錠 核酸電泳的染色劑 —— 溴化乙錠 ? 一種熒光染料， EB分子可嵌入核酸雙鏈的堿基對(duì)之間，在紫外線激發(fā)下，發(fā)出紅色熒光 ? 可在凝膠電泳液中加入終濃度為，有時(shí)亦可在電泳后，將凝膠浸
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