核酸的序列分析ppt課件-文庫吧資料
2025-01-20 22:12本頁面
【正文】 ，無則為 T。 化學法是用化學試劑在A、 G、 C、 T處特定地裂解 DNA片段，產(chǎn)生一簇各種長度的短鏈（等差數(shù)列 n=1），經(jīng)過 PAGE和放射自顯影后，可以直接讀出 DNA的順序。 T T G A C G A C 5 39。5 39。 A A C T G C T G 3 39。 C G A C 5 39。5 39。 A A C T G C T G 3 39。 T G A C G A C 5 39。5 39。 A A C T G C T G 3 39。 C 5 39。5 39。 A A C T G C T G 3 39。 5 39。與引物退火5 39。 不能和下一個核苷酸通過磷酸二酯鍵連接起來 ? 測序過程 : – – ?四個試管分別加入 DNA聚合酶 dNTP 標記底物 ?終止劑不同 ddA ddG ddC ddT ?四個試管中所有產(chǎn)物是一系列長度只差一個核苷酸的聚合鏈 – – 5 39。脫氧核苷酸那樣直接摻入新合成的 DNA鏈中，但因 3’ 端不具 OH基， DNA鏈合成至此中斷。 339。 高負荷， 1塊膠可測 16個樣品； 機讀不需放射自顯影；安全不用同位素；簡單迅速。 優(yōu)點 簡便、迅速、應用廣泛。 用化學試劑在 A、 G、C、 T處特定的裂解DNA片段，產(chǎn)生一簇各種長度的短鏈，經(jīng)過 PAGE放射自顯影可直讀 DNA順序。 70年代后期， Sanger和MaxamGilbert等人又建立了核酸序列測定的方法， Sanger雙脫氧末端終止法 和 MaxamGilbert化學裂解法
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