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正文內(nèi)容

20xx年醫(yī)學(xué)專題—cd147在胃癌細(xì)胞sgc7901增殖(參考版)

2024-10-31 14:53本頁面
  

【正文】 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率(%)=[1OD(cisplatin+)/OD(cisplatin-)] 100%,第四十九頁,共四十九頁。轉(zhuǎn)染SGC7901細(xì)胞,篩選(shāixuǎn)穩(wěn)定表達(dá)干擾載體的SGC7901細(xì)胞株。ng)總結(jié),RNA干擾抑制CD147表達(dá)對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901增殖、侵襲和順鉑敏感性的影響。,內(nèi)容(n232。,第四十七頁,共四十九頁。bāo) 侵襲實(shí)驗(yàn)); 2.CD147自身的表達(dá)調(diào)控; 3.CD147在其他消化系統(tǒng)腫瘤中的作用; 4.CD147多藥耐藥的機(jī)制。,下一步(yī b249。)有效的靶點(diǎn)。,第四十四頁,共四十九頁。,成功構(gòu)建了靶向CD147的shRNA真核表達(dá)載體; 成功轉(zhuǎn)染了人胃癌細(xì)胞(x236。y224。,與SGC7901和SGC7901/shRNAcontrol相比(xiānɡ bǐ),順鉑對(duì)SGC7901/shRNA2的抑制率顯著增加,第四十二頁,共四十九頁。 本實(shí)驗(yàn)中使用的順鉑濃度為:0.01PPC,0.1PPC,10PPC。)順鉑的使用濃度以血漿峰濃度( Peak Plasma Concentration,PPC) 為標(biāo)準(zhǔn)。n),抗腫瘤藥物(y224。,順鉑敏感性實(shí)驗(yàn)(sh237。,SGC7901/shRNA2細(xì)胞(x236。,Transwell結(jié)果(jiē guǒ),穿過Transfer侵襲(qīnx237。將Matrigel鋪在Transwell侵襲小室的多孔濾膜上,能形成與天然基底膜極為相似的基底膜結(jié)構(gòu)。nlǐ),Matrigel是從小鼠EHS肉瘤中提取的基質(zhì)(jī zh236。bāo)上清液中MMP2和MMP9的活性明顯降低,第三十七頁,共四十九頁。,明膠(m237。n jī)和亮度可判定明膠酶的活性。,明膠酶譜法是一種測(cè)定明膠酶活性的常用方法。)為基底膜中的Ⅳ型膠原和變性的間質(zhì)膠原(明膠),其活性與腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)。)細(xì)胞上清中MMP2和MMP9的活性,明膠酶包括72 kDa的明膠酶A(基質(zhì)金屬蛋白酶2,MMP2)和92 kDa的明膠酶B (基質(zhì)金屬蛋白酶9,MMP9)。,第三十四頁,共四十九頁。,與SGC7901和SGC7901/shRNAcontrol相比,培養(yǎng)24h、48h、72h后SGC7901/shRNA2細(xì)胞增殖(zēngzh237。jiān)點(diǎn),MTT細(xì)胞增殖(zēngzh237。,第三十二頁,共四十九頁。ibiǎo)高糖基化形式的CD147,LG代表低糖基化形式的CD147。,第三十一頁,共四十九頁。)CD147 mRNA表達(dá)水平,與SGC7901相比,SGC7901/shRNA1和SGC7901/shRNA2細(xì)胞中CD147 mRNA相對(duì)表達(dá)(biǎod225。,第三十頁,共四十九頁。將抗G418的陽性細(xì)胞克隆用有限稀釋法分離出來并逐步擴(kuò)增以待進(jìn)一步分析。nqu225。,pSilencer/shRNA1測(cè)序圖(紅線為插入片段),第二十九頁,共四十九頁。u ji224。nd236。,第二十八頁,共四十九頁。iy242。,CD147 shRNA表達(dá)(biǎod225。j236。)在CD147 mRNA上的位置,1 AGCGGTTGGA GGTTGTA
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