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醫(yī)療器械檢化員微生物培訓(xùn)(參考版)

2024-12-31 17:49本頁面
  

【正文】 稀釋度選擇及菌落總數(shù)報告方式 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH 。 30~ 300之間,則以最近 300或 30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù) (見表 1,例 6)。 平皿計數(shù)法計數(shù)原則 ? 300,則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù) (見表 1,例 4)。 ? 30~ 300之間,則按兩者菌落總數(shù)之比值來決定。若片狀菌苔的大小不到平板的一半,而其余的一半菌落分布又很均勻時,則可將此一半的菌落數(shù)乘 2以代表全平板的菌落數(shù),然后再計算該稀釋度的平均菌落數(shù)。 ? 菌落數(shù)( cfu) /每只手 =平均菌數(shù)稀釋倍數(shù) 平皿計數(shù)法計數(shù)原則 ? 。 菌數(shù)( cfu) /cm2= 平均菌數(shù) 稀釋倍數(shù) /采樣面積( cm2) 生產(chǎn)人員手細菌總數(shù) 生產(chǎn)人員手細菌總數(shù) ? 方法:被檢人五指并攏,將浸有滅菌生理鹽水的棉拭子在右手指曲面,從指尖、甲溝至指根處往返涂抹 10次后,將棉拭子放入 10ml滅菌生理鹽水的試管中。 滅菌產(chǎn)品 + 100cfu 菌種 常規(guī)洗脫 回收細菌數(shù) 100cfu/ml 菌種 1 實驗組 2 對照組 實驗組回收細菌數(shù) /對照組菌數(shù) 100% ≥70% 初始污染菌方法驗證( ISO11737) 微生物實驗 實驗前 實驗中 實驗后 環(huán)境控制 培養(yǎng)基質(zhì)量 滅菌控制 人員控制 無菌操作 方法驗證 靈敏度實驗 無菌檢查 無菌實驗 初始污染菌 B/F 驗證洗脫液 驗證樣品無抑菌作用 儀器校正 沉降菌檢測 簡化操作 物體表面細菌總數(shù) 物體表面細菌總數(shù) ? 方法:將內(nèi)徑為 5cm 5cm的滅菌規(guī)格板,放在被檢物件體表面,根據(jù)物體表面積大小,采平行樣 l~ 4個,用浸有滅菌生理鹽水的棉拭子,在規(guī)格板內(nèi)涂抹 10次(往返計為 1次),將棉拭子放入 l0ml滅菌生理鹽水的采樣管中。( 4/2) 100% 試驗組 (1)的菌回收率應(yīng)均不低于 70% ( 13) /2 100% 100cfu/ml 菌種 無菌洗脫液 + 初始污染 菌樣品 無菌洗脫液 + 100cfu 菌種 初始污染菌方法驗證( ISO11737) ? 選用滅菌產(chǎn)品,如果洗脫技術(shù)中用到洗脫液,每一產(chǎn)品都應(yīng)經(jīng)受常規(guī)微生物洗脫技術(shù),則將一定數(shù)量的易受破壞的微生物放人洗脫液中,回收微生物。 ? 根據(jù)校正因子,滅菌前初始污染計數(shù)乘以校正因子即為產(chǎn)品帶菌總數(shù)。 ? 8待凝固后,放置在規(guī)定的培養(yǎng)條件下 (30~ 35℃ , 48h~ 82h)培養(yǎng),進行活菌計數(shù)。 ? 7如此反復(fù)洗脫 4次.即 A、 B、 C和 D,直至洗脫累積量 (初始污染菌 )不再增加,最后瀝干樣品,將其平鋪于無菌平皿中 (E)。 ? 6再注皿 :取 B洗脫液 2ml,分別注入兩個無菌平皿內(nèi),每平皿 lml。 ? 4再洗脫 :將樣品從洗脫液 A中取出瀝干,移入另一定量的無菌洗脫液中 (B)。 ? 2樣品的處理采用旋渦混臺器 (2800次/ min),振蕩 2min。 (即 SIP=1 ) ? SIP選擇舉例,見表 1 表 1 SIP 選擇舉例 表 1 SIP 選擇舉例 校正因子 校正因子 ? 定義:用于對活菌計數(shù)或滅菌前活菌計數(shù)進行修正的數(shù)值,以補償產(chǎn)品上無法完全洗脫的微生物,以便計算出生物負載估計值。樣品份額可以根據(jù)供試產(chǎn)品單元的長度、質(zhì)量、體積或表面積。 ? 。如果已驗證微生物在產(chǎn)品單元上是均勻分布的,應(yīng)從產(chǎn)品單元上任一部位選擇樣品份額。但這往往被認為是不可行的,產(chǎn)品單元上的樣品份額宜在實驗室易于操作的前提下盡可能大。 初始污染菌相關(guān)標準 ? 微生物學(xué)方法 第一部分產(chǎn)品上微生物總數(shù)的估計 ? ISO117371:2023 用器材的滅菌 微生物學(xué)方法 第一部分產(chǎn)品上微生物總數(shù)的估計 樣品份額取樣原則 ? 1 定義:樣品份額 (SIP) sample item portion,即從某一保健產(chǎn)品單元上取出的用于試驗的部分。 釋出物檢查常用菌種 初始污染菌 定 義 ? 生物負載 :一件產(chǎn)品和 / 或包裝上存活的微生物總數(shù)。如果中和劑無效, 增加培養(yǎng)基的量 。 釋出物檢查 ? 解釋:通過與陽性對照對比,如果在培養(yǎng)容器內(nèi)看不到微生物生長,則說明使用的樣品能抑止細菌或霉菌的生長。 無菌樣品 100cfu 菌種 + 無菌樣品 實驗組 對照組 釋 出 物 檢 查 在合適的溫度培養(yǎng)不超過 5天。 無菌實驗驗證:釋出物檢查 ? 取滅菌產(chǎn)品以無菌操作轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基中 ,3035℃ 培養(yǎng) 24hrs ; ? 注意:使用與實際無菌實驗同種等量的培養(yǎng)基 ? 接種每毫升濃度小于 100cfu的菌種稀釋液在無菌培養(yǎng)基內(nèi),一式兩份,其中一份加入 無菌 試樣,另一份作為陽性對照,并在合適的溫度培養(yǎng)不超過 5天。 ? 沉淀生長:液體澄清,管底有沉淀物 混濁生長:液體變混濁 肉湯培養(yǎng)基有菌生長的常見形式 無菌實驗:結(jié)果判斷 ,陰性對照管應(yīng)無菌生長 ,如培養(yǎng) 14天后,培養(yǎng)基
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