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選修課臨床檢驗(yàn)9熒光定量pcr在臨床實(shí)驗(yàn)室診斷中的應(yīng)用(參考版)

2024-10-11 15:48本頁(yè)面
  

【正文】 需要高靈敏度 的檢測(cè)方法 發(fā)展方向:篩選疾病基因、常見(jiàn)病基因、腫瘤基因等 FQ— PCR雙色及多色熒光標(biāo)記技術(shù)的應(yīng)用 FQ— PCR用于肺部感染的診斷 一、肺 炎支原體的檢測(cè): 二、肺炎衣原體的檢測(cè): 意義: 快速診斷 治療方案與細(xì)菌感染的治療方案 不同 FQ— PCR技術(shù)用于幽門(mén)螺桿菌( HP)的檢測(cè) HP與慢性胃炎、胃潰瘍、胃癌有密切的關(guān)系 我國(guó)胃癌發(fā)病率高、發(fā)病年齡輕與 HP的感染與關(guān)系 方法:取胃活檢標(biāo)本 口腔標(biāo)本 意義: HP感染的診斷 探討 HP載量與治療的關(guān)系 FQ— PCR技術(shù)對(duì)性傳播疾病的檢測(cè) 一、梅毒螺旋體( TP) 二、淋球菌( NG) 三、沙眼衣原體、解脲脲原體( CT、 UU) 四、單純庖疹病毒( HSV) 五、乳頭瘤病毒( HPV) 六、人類(lèi)免疫缺陷病毒( HIV) 七、其它病原體 FQ— PCR技術(shù)檢測(cè) CT、 UU 發(fā)病率最高的性傳播疾病 治療與淋病完全不同 FDA批準(zhǔn)的 PCR檢測(cè)試劑盒 意義:可作為首選方法 FQ— PCR技術(shù)檢測(cè) HIV HIV載量與感染的發(fā)展和愈后 Bagnarell:(92) HIV量高 ,免疫缺陷癥狀嚴(yán)重、潛伏期短 Pantaleo(95) HIV量低,潛伏期長(zhǎng),癥狀輕 根據(jù) HIV量預(yù)測(cè)發(fā)病時(shí)間和預(yù)后 FQPCR在腫瘤研究和診斷中的應(yīng)用 一、病毒感染與腫瘤 二、腫瘤相關(guān)基因的檢測(cè) :常見(jiàn)癌基因 CerbB cmyc、 Nmyc、 Kras、 int Nras、 Mdm Cfas、 Ksam、 Met. 三、腫瘤標(biāo)志物的 mRNA表達(dá) 關(guān)于結(jié)核桿菌等 5項(xiàng)檢測(cè)的 具體應(yīng)用 概 述 用于臨床 PCR常規(guī)檢測(cè)三條件: ? SDA批準(zhǔn)使用的試劑盒 ?國(guó)家批準(zhǔn)符合要求的實(shí)驗(yàn)室 ?經(jīng)行政部門(mén)同意并培訓(xùn)后持證上崗 ? 結(jié)核分枝桿菌 (TB) 靶序列來(lái)源 : a. 單抗檢出的 TB抗原旦白編碼基因 b. TB特異性核酸片段克隆 c. 插 入序列 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)特點(diǎn) ?結(jié)核的 PCR臨床主要應(yīng)用 臨床評(píng)價(jià) ? 沙眼衣原體 (Ct) 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)特點(diǎn) 靶及引物選擇 ?外膜蛋白基因 (MOMPOMPI) ? 隱蔽性基因質(zhì)粒拷貝 ? 16srRNA基 因 臨床評(píng)價(jià) ?細(xì)胞培養(yǎng) McCoy. Hela229金標(biāo)準(zhǔn) ? ELA法 ? PCR法 .專(zhuān)家希望 此法為新金標(biāo) ? HBVDNA 臨床評(píng)價(jià): 般臨床靠免疫標(biāo)志 , 但無(wú)法明確時(shí)可測(cè) 、阿德福韋及干擾素治療監(jiān)測(cè) ? HCVRNA 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)特點(diǎn) ? 需擴(kuò)增二次 ? 低溫啟動(dòng) UDG系統(tǒng) RNA不穩(wěn)定性 注意事項(xiàng) 防止 RNase污染
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