選修課臨床檢驗(yàn)9熒光定量pcr在臨床實(shí)驗(yàn)室診斷中的應(yīng)用-文庫吧在線文庫
【正文】 en carrying feruses with trisomy 21 Clin chem, 1999 Oct, 45: 10, 174951 FQ— PCR技術(shù)用于植入前診斷 移入前診斷是第三代試管嬰兒的核心技術(shù) 在胚胎分裂至 4— 8細(xì)胞階段時(shí)，取 1— 2個(gè)細(xì)胞作篩選 技術(shù)難點(diǎn)：細(xì)胞數(shù)少，獲取核酸困難。 ?定 量 的 實(shí) 現(xiàn) ： ? 熒光探針與擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)合 ? Taq酶外切作用，探針裂解，熒光 被激發(fā) ? 熒光信號的檢測 ? 熒光強(qiáng)度與定量核酸模板相關(guān)性 ? 實(shí)時(shí)定量與終產(chǎn)物定量 ? ? ? ? ? ? 熒光定量 PCR技術(shù)的主要優(yōu)點(diǎn) 一、真正的樣品原始核酸模板的準(zhǔn)確定量 二、定量范圍寬（ 0— 1010/ml)，無需梯度稀釋 三、封閉狀態(tài)檢測，避免擴(kuò)增產(chǎn)物污染 四、探針使用使特異性更強(qiáng) 五、光譜分析技術(shù)使敏感性更高 六、儀器讀數(shù)，結(jié)果判斷客觀真實(shí) 七、無需 PCR后處理，操作更簡便、快速 八、數(shù)據(jù)電腦管理，利于醫(yī)院管理 熒光定量 PCR技術(shù)檢測的報(bào)告形式 一、報(bào)告形式： 熒光定量 PCR檢測的報(bào)告以：“拷貝數(shù)”（ copy) 二、拷貝數(shù)的意義： 表示原始標(biāo)本內(nèi)可供探針結(jié)合的核酸片段數(shù)量。需要高靈敏度 的檢測方法 發(fā)展方向：篩選疾病基因、常見病基因、腫瘤基因等 FQ— PCR雙色及多色熒光標(biāo)記技術(shù)的應(yīng)用 FQ— PCR用于肺部感染的診斷 一、肺 炎支原體的檢測： 二、肺炎衣原體的檢測： 意義： 快速診斷 治療方案與細(xì)菌感染的治療方案 不同 FQ— PCR技術(shù)用于幽門螺桿菌（ HP）的檢測 HP與慢性胃炎、胃潰瘍、胃癌有密切的關(guān)系 我國胃癌發(fā)病率高、發(fā)病年齡輕與 HP的感染與關(guān)系 方法：取胃活檢標(biāo)本 口腔標(biāo)本 意義： HP感染的診斷 探討 HP載量與治療的關(guān)系 FQ— PCR技術(shù)對性傳播疾病的檢測 一、梅毒螺旋體（ TP） 二、淋球菌（ NG） 三、沙眼衣原體、解脲脲原體（ CT、 UU） 四、單純庖疹病毒（ HSV） 五、乳頭瘤病毒（ HPV） 六、人類免疫缺陷病毒（ HIV） 七、其它病原體 FQ— PCR技術(shù)檢測 CT、 UU 發(fā)病率最高的性傳播疾病 治療與淋病完全不同 FDA批準(zhǔn)的 PCR檢測試劑盒 意義：可作為首選方法 FQ— PCR技術(shù)檢測 HIV HIV載量與感染的發(fā)展和愈后 Bagnarell:(92) HIV量高 ,免疫缺陷癥狀嚴(yán)重、潛伏期短 Pantaleo(95) HIV量低，潛伏期長，癥狀輕 根據(jù) HIV量預(yù)測發(fā)病時(shí)間和預(yù)后 FQPCR在腫瘤研究和診斷中的應(yīng)用 一、病毒感染與腫瘤 二、腫瘤相關(guān)基因的檢測 :常見癌基因 CerbB cmyc、 Nmyc、 Kras、 int Nras、 Mdm Cfas、 Ksam、 Met. 三、腫瘤標(biāo)志物的 mR
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