選修課臨床檢驗(yàn)9熒光定量pcr在臨床實(shí)驗(yàn)室診斷中的應(yīng)用-資料下載頁(yè)
2025-09-30 15:48本頁(yè)面
【正文】 試劑盒 意義：可作為首選方法 FQ— PCR技術(shù)檢測(cè) HIV HIV載量與感染的發(fā)展和愈后 Bagnarell:(92) HIV量高 ,免疫缺陷癥狀嚴(yán)重、潛伏期短 Pantaleo(95) HIV量低，潛伏期長(zhǎng)，癥狀輕 根據(jù) HIV量預(yù)測(cè)發(fā)病時(shí)間和預(yù)后 FQPCR在腫瘤研究和診斷中的應(yīng)用 一、病毒感染與腫瘤 二、腫瘤相關(guān)基因的檢測(cè) :常見癌基因 CerbB cmyc、 Nmyc、 Kras、 int Nras、 Mdm Cfas、 Ksam、 Met. 三、腫瘤標(biāo)志物的 mRNA表達(dá) 關(guān)于結(jié)核桿菌等 5項(xiàng)檢測(cè)的 具體應(yīng)用 概 述 用于臨床 PCR常規(guī)檢測(cè)三條件： ? SDA批準(zhǔn)使用的試劑盒 ?國(guó)家批準(zhǔn)符合要求的實(shí)驗(yàn)室 ?經(jīng)行政部門同意并培訓(xùn)后持證上崗 ? 結(jié)核分枝桿菌 (TB) 靶序列來源 : a. 單抗檢出的 TB抗原旦白編碼基因 b. TB特異性核酸片段克隆 c. 插 入序列 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)特點(diǎn) ?結(jié)核的 PCR臨床主要應(yīng)用 臨床評(píng)價(jià) ? 沙眼衣原體 (Ct) 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)特點(diǎn) 靶及引物選擇 ?外膜蛋白基因 (MOMPOMPI) ? 隱蔽性基因質(zhì)粒拷貝 ? 16srRNA基 因 臨床評(píng)價(jià) ?細(xì)胞培養(yǎng) McCoy. Hela229金標(biāo)準(zhǔn) ? ELA法 ? PCR法 .專家希望 此法為新金標(biāo) ? HBVDNA 臨床評(píng)價(jià)： 般臨床靠免疫標(biāo)志 ， 但無(wú)法明確時(shí)可測(cè) 、阿德福韋及干擾素治療監(jiān)測(cè) ? HCVRNA 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)特點(diǎn) ? 需擴(kuò)增二次 ? 低溫啟動(dòng) UDG系統(tǒng) RNA不穩(wěn)定性 注意事項(xiàng) 防止 RNase污染 杜絕溶血 臨床評(píng)估： ? 定性用于診斷 (只憑抗 HCV，無(wú)法 決定病毒存在狀況） ? 定量用于治療監(jiān)測(cè) ? 基因分型 ? HLA 方法 : 免疫學(xué) 分子生物學(xué)： PCR SSCP RFLP 基因芯片 I 類 (A,B,C) 與疾病發(fā)生頻率有關(guān) II 類 (DR,DQ,DP) 等 移植配型 PCR 在臨床檢驗(yàn)應(yīng)用中的局限性 差之毫厘，失之千里 ，影響因素多，嚴(yán)格遵守操作規(guī)范 ：實(shí)驗(yàn)條件設(shè)計(jì)欠佳；擴(kuò)增產(chǎn)物或核酸提取中標(biāo) 本間的交叉污染 ：在臨床標(biāo)本核酸提取過程中 ,靶核酸的丟失； 提取試劑 (如有機(jī)溶劑等 )的殘留、標(biāo)本中抑制 物的去除不徹底；擴(kuò)增儀孔間溫度差異 質(zhì)量保證措施 ?防止假陽(yáng)性：實(shí)驗(yàn)室首先要有嚴(yán)格的分區(qū)；使用帶濾心的吸頭；陰性質(zhì)控樣本應(yīng)與臨床標(biāo)本一起處理 ,并適當(dāng)散在分布于不同標(biāo)本之間 ?防止假陰性：設(shè)立“內(nèi)標(biāo)” ?通過認(rèn)證的參考品 謝 謝！ 晚 安！
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