選修課臨床檢驗9熒光定量pcr在臨床實驗室診斷中的應用-資料下載頁
2024-10-09 15:48本頁面
【正文】 試劑盒 意義：可作為首選方法 FQ— PCR技術檢測 HIV HIV載量與感染的發(fā)展和愈后 Bagnarell:(92) HIV量高 ,免疫缺陷癥狀嚴重、潛伏期短 Pantaleo(95) HIV量低，潛伏期長，癥狀輕 根據 HIV量預測發(fā)病時間和預后 FQPCR在腫瘤研究和診斷中的應用 一、病毒感染與腫瘤 二、腫瘤相關基因的檢測 :常見癌基因 CerbB cmyc、 Nmyc、 Kras、 int Nras、 Mdm Cfas、 Ksam、 Met. 三、腫瘤標志物的 mRNA表達 關于結核桿菌等 5項檢測的 具體應用 概 述 用于臨床 PCR常規(guī)檢測三條件： ? SDA批準使用的試劑盒 ?國家批準符合要求的實驗室 ?經行政部門同意并培訓后持證上崗 ? 結核分枝桿菌 (TB) 靶序列來源 : a. 單抗檢出的 TB抗原旦白編碼基因 b. TB特異性核酸片段克隆 c. 插 入序列 實驗設計特點 ?結核的 PCR臨床主要應用 臨床評價 ? 沙眼衣原體 (Ct) 實驗設計特點 靶及引物選擇 ?外膜蛋白基因 (MOMPOMPI) ? 隱蔽性基因質粒拷貝 ? 16srRNA基 因 臨床評價 ?細胞培養(yǎng) McCoy. Hela229金標準 ? ELA法 ? PCR法 .專家希望 此法為新金標 ? HBVDNA 臨床評價： 般臨床靠免疫標志 ， 但無法明確時可測 、阿德福韋及干擾素治療監(jiān)測 ? HCVRNA 實驗室設計特點 ? 需擴增二次 ? 低溫啟動 UDG系統(tǒng) RNA不穩(wěn)定性 注意事項 防止 RNase污染 杜絕溶血 臨床評估： ? 定性用于診斷 (只憑抗 HCV，無法 決定病毒存在狀況） ? 定量用于治療監(jiān)測 ? 基因分型 ? HLA 方法 : 免疫學 分子生物學： PCR SSCP RFLP 基因芯片 I 類 (A,B,C) 與疾病發(fā)生頻率有關 II 類 (DR,DQ,DP) 等 移植配型 PCR 在臨床檢驗應用中的局限性 差之毫厘，失之千里 ，影響因素多，嚴格遵守操作規(guī)范 ：實驗條件設計欠佳；擴增產物或核酸提取中標 本間的交叉污染 ：在臨床標本核酸提取過程中 ,靶核酸的丟失； 提取試劑 (如有機溶劑等 )的殘留、標本中抑制 物的去除不徹底；擴增儀孔間溫度差異 質量保證措施 ?防止假陽性：實驗室首先要有嚴格的分區(qū)；使用帶濾心的吸頭；陰性質控樣本應與臨床標本一起處理 ,并適當散在分布于不同標本之間 ?防止假陰性：設立“內標” ?通過認證的參考品 謝 謝！ 晚 安！
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