選修課臨床檢驗(yàn)9熒光定量pcr在臨床實(shí)驗(yàn)室診斷中的應(yīng)用(完整版)
【正文】 NA表達(dá) 關(guān)于結(jié)核桿菌等 5項(xiàng)檢測的 具體應(yīng)用 概 述 用于臨床 PCR常規(guī)檢測三條件： ? SDA批準(zhǔn)使用的試劑盒 ?國家批準(zhǔn)符合要求的實(shí)驗(yàn)室 ?經(jīng)行政部門同意并培訓(xùn)后持證上崗 ? 結(jié)核分枝桿菌 (TB) 靶序列來源 : a. 單抗檢出的 TB抗原旦白編碼基因 b. TB特異性核酸片段克隆 c. 插 入序列 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)特點(diǎn) ?結(jié)核的 PCR臨床主要應(yīng)用 臨床評(píng)價(jià) ? 沙眼衣原體 (Ct) 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)特點(diǎn) 靶及引物選擇 ?外膜蛋白基因 (MOMPOMPI) ? 隱蔽性基因質(zhì)?？截? ? 16srRNA基 因 臨床評(píng)價(jià) ?細(xì)胞培養(yǎng) McCoy. Hela229金標(biāo)準(zhǔn) ? ELA法 ? PCR法 .專家希望 此法為新金標(biāo) ? HBVDNA 臨床評(píng)價(jià)： 般臨床靠免疫標(biāo)志 ， 但無法明確時(shí)可測 、阿德福韋及干擾素治療監(jiān)測 ? HCVRNA 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)特點(diǎn) ? 需擴(kuò)增二次 ? 低溫啟動(dòng) UDG系統(tǒng) RNA不穩(wěn)定性 注意事項(xiàng) 防止 RNase污染 杜絕溶血 臨床評(píng)估： ? 定性用于診斷 (只憑抗 HCV，無法 決定病毒存在狀況） ? 定量用于治療監(jiān)測 ? 基因分型 ? HLA 方法 : 免疫學(xué) 分子生物學(xué)： PCR SSCP RFLP 基因芯片 I 類 (A,B,C) 與疾病發(fā)生頻率有關(guān) II 類 (DR,DQ,DP) 等 移植配型 PCR 在臨床檢驗(yàn)應(yīng)用中的局限性 差之毫厘，失之千里 ，影響因素多，嚴(yán)格遵守操作規(guī)范 ：實(shí)驗(yàn)條件設(shè)計(jì)欠佳；擴(kuò)增產(chǎn)物或核酸提取中標(biāo) 本間的交叉污染 ：在臨床標(biāo)本核酸提取過程中 ,靶核酸的丟失； 提取試劑 (如有機(jī)溶劑等 )的殘留、標(biāo)本中抑制 物的去除不徹底；擴(kuò)增儀孔間溫度差異 質(zhì)量保證措施 ?防止假陽性：實(shí)驗(yàn)室首先要有嚴(yán)格的分區(qū)；使用帶濾心的吸頭；陰性質(zhì)控樣本應(yīng)與臨床標(biāo)本一起處理 ,并適當(dāng)散在分布于不同標(biāo)本之間 ?防止假陰性：設(shè)立“內(nèi)標(biāo)” ?通過認(rèn)證的參考品 謝 謝！ 晚 安！ 。熒光探針定量 PCR技術(shù)在臨床 實(shí)驗(yàn)室診斷中的應(yīng)用 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科 胥飚 38,200,000 (PCR) 8,800,000 (周杰倫） 內(nèi) 容 提 要 一、基因診斷技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的地位 二、熒光探針定量 PCR的技術(shù)特點(diǎn) 三、熒光探針定量 PCR在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用 臨床實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)發(fā)展 三個(gè)時(shí)代 標(biāo)志技術(shù) 性質(zhì) 生化診斷時(shí)代 生化分析 表象 免疫學(xué)診斷
研究報(bào)告相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1