【導讀】作人員掌握開展工作必需的生物安全知識和技術，避免實驗室感染，防止實驗室事故，適用于進檢驗科實驗室所有工作人員。設立生物安全監(jiān)督員一名。組織全科定期、不定期的學習生物安全的相關法律、法規(guī)。全面?zhèn)鬟_相關會議內(nèi)容，在本組內(nèi)要達到知曉率100%。認真執(zhí)行有關生物安全的各項法規(guī)、制度。服從質(zhì)量負責人的工作安排。均具有規(guī)范、遵守生物安全管理。規(guī)范的責任和義務，不但要規(guī)范自己的行為，還具有隨時糾正不符合規(guī)范的行為的義務。外泄，對實驗室工作環(huán)境進行評估，以鑒定生物安全防護等級，保證生物安全。具備有效治療和預防措施。身體出現(xiàn)開放性損傷；呼吸道感染或其它導致抵抗力下降的情況；事故的應急處置原則和上報程序。進入實驗室的一般申請由檢驗科負責人的批。制定年度生物安全培訓、考核計劃，報生物安全領導小組批準后實施。

　　

【正文】 要技術參數(shù) 滅菌室容積： (1m) 安全聯(lián)鎖裝置：滅菌室內(nèi)壓力大于 時，門被聯(lián)鎖。 工作壓力： 工作溫度： 126℃ 熱均勻度 : ≤177。1℃ 湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 33 頁 共 46 頁 供汽壓力： ～ MPa 安裝 在連接蒸汽輸送管道時，應在連接處、蒸汽輸送管下方安裝一只排放蒸汽輸送管道內(nèi)冷凝水的閥門。 安裝時應將排氣管接裝至室外，以免室內(nèi)霧氣彌漫，影響工作環(huán)境。 操作時排氣管不斷有冷凝水排出，可以在排氣管下方安裝一個錐形漏斗，并與下水道排水管連接，這樣，既能隨時觀察冷凝水瀉出的情況，又可防止因下水道淤塞，而造成污 水倒灌之弊。 安裝圖 操 作順序： 蒸汽加熱：排水 → 堆放 → 密閉 → 加熱 → 滅菌 → 干燥 (冷卻 ) → 結(jié)束 排水 滅菌器在加熱時必須在操作前將外接輸送正氣管道內(nèi)的冷凝水排掉。 堆放 將待滅菌的物品予以妥善包扎，順序地、相互之間保持適當?shù)拈g隙放入滅菌室內(nèi)。這樣，有利于蒸汽的穿透，確保滅菌效果。堆放輔料時，不宜緊靠滅菌室門，以免蒸汽的冷凝水沿著門壁滴在輔料上，使輔料吸收過多水分，造成滅菌終了時不易干燥之弊端。同時，輔料包不宜過大，一般以 20cm20cm10cm 為佳，否則，將延長滅菌時間，具體應根據(jù)實驗后確定。對溶液進行滅菌 時，應灌注于影質(zhì)耐熱玻璃瓶中，以不超過玻璃瓶容積的 3/4 為宜，用棉花紗布塞將瓶塞好，并用紗繩扎于瓶頸上，防止紗布塞落入瓶內(nèi)。且勿使用未打孔的橡膠或軟木塞。最好將玻璃瓶放置于容積稍大的搪瓷或金屬盤內(nèi)，以防萬一玻璃瓶爆炸時，溶液不致流失和污損滅菌室金屬內(nèi)壁。 密閉 將門關上，按順時針方向撥動鎖緊手柄至中方位，使撐檔進入門圈內(nèi)。然后順時針方向旋轉(zhuǎn)八角轉(zhuǎn)盤，使門和墊圈密合，不要將門閂得過緊，以免損壞墊圈。 加熱 先將滅菌器右下方處減壓閥手柄指針對準本次滅菌預定壓力值 (溫度 )，然后旋開下面進氣閥， 外接蒸汽經(jīng)過濾器、進氣閥由減壓閥減壓后進入滅菌器夾套內(nèi)。 (注意：由于各用戶單位的鍋爐所輸送的蒸汽壓力有高有低或汽源不穩(wěn)定會造成滅菌器上減壓閥減壓湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 34 頁 共 46 頁 后壓力有偏差，此時應微調(diào)減壓閥上手柄，逆時針方向旋轉(zhuǎn)，壓力降低，反之則相反 )。夾套內(nèi)冷凝水由夾套冷凝水泄水器排放。 滅菌 當夾套內(nèi)蒸汽壓力達到選擇的控制壓力時，即可將總閥旋鈕旋至 “滅菌 ”檔位置，使夾套內(nèi)蒸汽進入滅菌室，此時物品處于加溫滅菌狀態(tài)，同時滅菌室壓力表和壓力式指示溫度計分別顯示滅菌室內(nèi)的壓力和溫度值，再升溫滅菌過程中，應將冷凝水泄出器后端的截止閥旋 開少許，觀察滅菌室內(nèi)空氣和冷凝水是否通過冷凝水泄出器排出，閥門打開的最佳位置，應有冷凝水和少量的蒸汽溢出，這樣可使滅菌室內(nèi)各點穩(wěn)定趨于均勻。當滅菌室溫度達到預選溫度時，參照 (表三 )開始計算滅菌時間。 各種物品消毒滅菌參考表 (表三 ) 滅菌物品類 滅菌保溫時間 (min) 飽和蒸汽相對溫度(℃ ) 蒸汽壓力 (MPa) 固體物料緩沖液 30 121 培養(yǎng)基等 15 121 培養(yǎng)基 30 115 生物危害品 45 121 干燥 滅菌時間終了后，按各種不同類別 滅菌物品的要求，任由滅菌室內(nèi)的蒸汽自然冷卻或予以慢排或快排。例如：輔料、器械、器皿等不致因壓力突然下降而損壞，且須在滅菌后使之干燥，則可將總閥旋鈕旋轉(zhuǎn)至 “快排 ”檔，使滅菌室內(nèi)蒸汽迅速排出。當滅菌室壓力指針下降至 “0”位后，再等一、二分鐘，才可緩慢地轉(zhuǎn)動手輪和撥動安全緊定手柄，將門打開縫隙約 4~5cm，再等 10~15 分鐘，然后將滅菌物品取出，即能干燥。 冷卻 溶液、培養(yǎng)基等物品在滅菌終了時，為防止滅菌室壓力突然降低，引起瓶內(nèi)溶液劇烈沸騰或受到損壞。則應將總閥旋鈕旋轉(zhuǎn)至 “慢排 ”，使滅菌室內(nèi)的蒸汽緩慢地 排出，或者切斷蒸汽源，使滅菌室壓力和溫度自然降低。也可直接將壓力控制開關的旋鈕旋至 “關 ”位置， 任其自然冷卻，直到滅菌室壓力表回將至 “0”位后，再將總閥旋鈕旋轉(zhuǎn)至 “慢排 ”檔，等數(shù)湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 35 頁 共 46 頁 分鐘后，再將門啟開。 結(jié)束 如不需要再連續(xù)滅菌時，切斷蒸汽源，隨后將總閥旋鈕旋轉(zhuǎn)至 “全排 ”檔，排去套層和滅菌室內(nèi)的蒸汽，并將滅菌室門開啟少許，散發(fā)滅菌室內(nèi)剩余蒸汽，使滅菌室內(nèi)壁經(jīng)常保持干燥。 使用完畢后，登記儀器使用記錄。 注意事項 不同類型的物品盡可能不要同時進行滅菌，如輔料與溶液、橡膠與器械等 。以免顧此失彼，不能獲得良好的效果。 當蒸汽輸入滅菌室內(nèi)，應徐徐開放冷凝水泄出器前端的閥門，使冷凝水泄出器間斷地排出滅菌室內(nèi)的空氣和冷凝水，確保滅菌效果。 安全閥提柄每周應提位 1~2 次，以保持其靈活狀態(tài)。 應保持滅菌器的清潔和干燥，特別是暫時不用時，更應予以擦干凈，以免受到腐蝕。對轉(zhuǎn)動機零件應及時加潤滑油。 滅菌器應在完整情況下進行操作，并應由專職保養(yǎng)人員或熟悉業(yè)務者定期維護，以使正常運行，避免發(fā)生事故。 滅菌器旁應懸掛操作規(guī)程以備查閱和遵循。 在 外接蒸汽源通入滅菌器夾套內(nèi)時，應先把外接蒸汽管道內(nèi)的冷凝水排凈，才可向滅菌器夾套輸送蒸汽。 設備在運行過程中，出現(xiàn)安全閥排氣，這時套層壓力表指示的壓力值超過工作壓力，此時應對減壓閥進行調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)方式見 (七、部件維護減壓閥一欄 )。 維護保養(yǎng) 墊圈門墊圈系橡膠制品，遇老化和殘損而漏氣時，應及時更換。 壓力表 凡遇指針不能回復 “0”、讀數(shù)不準等情況，應即時修理，并應與標準壓力表校核后方可使用，否則應更換新表。 溫度表 滅菌器裝有壓力式指示溫度計和水銀玻璃溫度計各一只， 其測熱部位皆在滅菌室底部的冷凝水排出口處，故兩者的讀數(shù)應基本相同。如發(fā)現(xiàn)溫差較大而水銀玻棒表又完好時，應對指針式溫度計進行維修并經(jīng)校核后使用。 湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 36 頁 共 46 頁 減壓閥 減壓閥是將外接管道蒸汽減至所預定值，本滅菌器出廠時調(diào)整在 、 、 三檔壓力范圍。由于各用戶單位的輸送的蒸汽壓力有高有低或汽源不穩(wěn)定，會造成減壓后壓力偏差，此時應微調(diào)減壓閥上手柄，逆時針方向旋轉(zhuǎn)，壓力降低，反之則調(diào)高。減壓閥是本器安全運行重要部件，應由專業(yè)人員保養(yǎng)與維護。 冷凝水泄水器 冷凝水泄水器內(nèi)的一只主要零件是 控溫元件，該元件受熱后膨脹，使閥尖與閥座密合，阻止蒸汽外泄。反之，在受冷時，該元件使閥尖與閥座開啟，泄出滅菌室內(nèi)的冷凝水。冷凝水泄水器的性能與滅菌室能否達到工作壓力下的相對溫度值有關。現(xiàn)將故障與排除方法歸納如表 (表四 ) 表四 故障情況 可能原因 排除方法 滅菌室達不到相對溫度 泄出器閥座間有異物 旋開螺紋裝置，予以清洗 泄出器前段管道阻塞 疏通前段管道 波紋管損壞 更換，臨時措施：則可將冷凝器開放少許，使滅菌室中的冷凝水泄出 滅菌室溫度上升太慢 泄出器之閥座間距過小 旋開螺紋蓋，松開固定螺釘，旋 緊閥尖再固定 故障情況 可能原因 排除方法 泄出大量蒸汽 泄出器之閥尖閥座間距過大 放松閥尖及閥座間距離 儀器維修后，及時登記儀器維修記錄。 （八） 電動吸引器操作規(guī)程 一、目的 建立本 SOP 旨在使操作人員的操作步驟規(guī)范化。 二、范圍 對 波膜過濾 器械、消毒巾、培養(yǎng)基等進行滅菌之用。 三、責任人 湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 37 頁 共 46 頁 質(zhì)量負責人 、微生物檢驗員。 四、內(nèi)容 安裝、調(diào)試： 連接管路 ， 安裝前，在瓶塞的壓入瓶口部分凸緣處涂少量蒸餾水，可利于壓緊瓶塞并增強其密封性。 空氣過濾器上有綠點一面的接頭為 空氣入口，應與貯液瓶的出口相接。 安裝車架 ， 接通電源 ， 電源指示燈亮。 檢驗管路 ， 按順時針方向旋緊負壓調(diào)節(jié)閥，堵塞吸氣口（用手指或滴管橡膠皮頭，或折疊并捏住吸引軟導管）。開啟吸引器開關或腳踏開關，機器運轉(zhuǎn)，真空表上指針將迅速上升至 以上；放開吸入口，表針將回到 以下。以上情況符合說明管路連接正確。 調(diào)節(jié)負壓 堵住吸入口，開啟吸引器開關，調(diào)節(jié)負壓調(diào)節(jié)閥，真空表上讀數(shù)應在 ～極限負壓值范圍內(nèi)變化。臨床使用時，用負壓調(diào)節(jié)閥來控制吸引時需要的負壓 值。注意 ， 負壓調(diào)節(jié)閥順時針方向旋轉(zhuǎn)負壓增加。 檢查、實驗溢流裝置 開啟瓶塞，清潔閥口座閥口，按平浮子上的橡膠閥片，閥片應無翹曲、撕裂等缺陷，且與浮子連接完好。浮子在浮子架中應移動靈活，無阻軋現(xiàn)象。 手提瓶塞，使浮子垂直接觸水面，緩慢下移瓶蓋，浮子應能在浮子架中浮起。 蓋緊瓶蓋，在吸入口接上吸引軟導管，旋緊調(diào)節(jié)閥，運行吸引器。 將吸引軟導管伸入一清水桶中，或模擬正常使用時的情況，將液體吸入帶溢流裝置的貯液瓶內(nèi)。液位上升將帶動浮子上浮，直至關閉閥口，吸 引自動停止。最終液位的高低會隨著吸引方法的不同而改變。 旋緊調(diào)節(jié)閥，關閉吸引器開關，開啟瓶塞，倒空貯液瓶。當重新蓋緊瓶塞時，浮子應處于浮子架的底部，閥口呈開啟狀態(tài)。 注意 一： 當溢流裝置的關閉閥動作以后，液位仍繼續(xù)上升，有兩種可能情況： 1）由于貯液瓶內(nèi)剩余的負壓所致； 2）閥口沒有完全關閉。前一種情況，當吸引軟導管離開被吸液體后再伸入其中，貯液瓶內(nèi)液位不再上升；后一種情況，液位仍會上升，對此，要仔細觀察，當貯液瓶快滿時，應立即從被吸液體中提起吸引軟導管，關閉吸引器，停止吸引，查找 閥口關閉失效的原因。 湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 38 頁 共 46 頁 注意 二： 浮子關閉閥口后，吸引停止。但由于管道內(nèi)的負壓，浮子可能仍被吸在閥口上。此時應放松調(diào)節(jié)閥或關閉吸引器，即釋放管道內(nèi)的負壓，讓浮子依自重落下。嚴禁用手拉動浮子，防止橡膠閥片與浮子脫開。 注意 三： 關機后，放掉負壓，方可開啟瓶塞。 注意 四： 嚴禁在拆除溢流裝置和導向管的情況下，使用吸引器。 停機 安裝調(diào)試或使用結(jié)束后，要先關掉吸引器上的開關，再從電源插座上拔下電源插頭，以切斷網(wǎng)電源。 使用、保養(yǎng)及其注意事項 使用 使用前，按安裝、調(diào)試程序檢查吸引器，確保其性能完好后，連接消過毒的吸引軟導管和腹腔吸引管，即可使用。 使用中，可以用負壓調(diào)節(jié)閥控制所需負壓，視情況開啟或關閉吸引器開關或腳踏開關，并經(jīng)常注意貯液瓶中液位高度。 當一次吸引量較大，不得不進入后級貯液瓶時，在溢流裝置未動作前，及時倒空貯液瓶，否則液位將帶動浮子上升，直至關閉閥口，迫使吸引自動停止。 如果溢流裝置的關閉閥動作以后，液位仍繼續(xù)上升，處理方法見“檢查、測試溢流 裝置”。注意吸引器使用時應在 技術人員 的指導下，嚴格按說明書的使用范圍、操作程序進行，如有疑問請與供應商或制造廠聯(lián)系。 空氣過濾器的更換 如空氣過濾器吸入泡沫或塞滿塵埃，將導致過濾膜的顏色會由淺變深，還會引起管道入口處的吸力明顯減小甚至消失。而真空表上負壓將不斷上升至 以上，此時應及時用本廠的空氣過濾器替換。 注意 一： 使用中溢流裝置關閉、管道堵塞也會引起吸力減小或消失，負壓值上升。參見“故障分析與排除”。 注意 二： 空氣過 濾器應經(jīng)常更換，并集中銷毀。 保養(yǎng) 停機前，建議使吸引管吸入少量的潔凈水以清洗管道的內(nèi)壁。 停機后，倒空貯液瓶，用柔軟的刷子或抹布清除瓶和瓶塞上的污垢，再用清水沖洗，其中包括溢流裝置和各種管道。必要時，旋下溢流裝置，分離其各部件（閥座與湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 39 頁 共 46 頁 浮子架為三腳卡口連接）并拆下導向管，進行徹底清洗。 注意 ： 對于玻璃貯液瓶，在清洗和使用時切忌與銳器碰撞，并要防止跌落。貯液瓶、瓶塞及各種管道可以用康威達消毒片（每片 ） 按 1﹕ 500 濃度配置的消毒液浸泡 1 小時。 機箱外表面用浸過消毒液的微濕抹布來擦拭，防止液體滲入機箱縫隙。 金屬材料的吸引管可用溫度為 134177。 4℃的飽和蒸汽，保持 20 分鐘進行消毒、滅菌。 設備不使用時應放置在干燥、清潔的地方，定期（一般情況下為半年）開機運轉(zhuǎn)一次。 注意設備再次使用前，必須按 要求 裝上溢流裝置、導向管及其它管路。其中導向管上的三個插腳位置為非均布，確保裝好的導向管管口朝向貯液瓶內(nèi)壁。 （九）離心機操作規(guī)程 一、目 的 建立本 SOP 旨在使操作人 員的操作步驟規(guī)范化。 二、范 圍 適用于離心機調(diào)試、使用，正常狀態(tài)下操作 。 三、責任人 質(zhì)量負責人 、微生物檢驗員。 四、內(nèi)容 離心前必須仔細檢查轉(zhuǎn)頭各孔內(nèi)有無異物。 離心管必須仔細平衡。 機內(nèi)若不清潔，離心管要用塑料薄膜封口。 調(diào)節(jié)好離心時間后，再慢起動，然后加速。 離心時不準開蓋。 離心結(jié)束，不能馬上開蓋，等電機完全停止后才能打開蓋子，取出樣品 。 （十） 實驗室 操作人員洗手、消毒操作規(guī)程 一、目的 湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 40 頁 共 46 頁 建立進入 實驗室 操作人員的洗手、消毒的管理規(guī)定，防止手對藥品、設