【導(dǎo)讀】作人員掌握開展工作必需的生物安全知識和技術(shù)，避免實驗室感染，防止實驗室事故，適用于進(jìn)檢驗科實驗室所有工作人員。設(shè)立生物安全監(jiān)督員一名。組織全科定期、不定期的學(xué)習(xí)生物安全的相關(guān)法律、法規(guī)。全面?zhèn)鬟_(dá)相關(guān)會議內(nèi)容，在本組內(nèi)要達(dá)到知曉率100%。認(rèn)真執(zhí)行有關(guān)生物安全的各項法規(guī)、制度。服從質(zhì)量負(fù)責(zé)人的工作安排。均具有規(guī)范、遵守生物安全管理。規(guī)范的責(zé)任和義務(wù)，不但要規(guī)范自己的行為，還具有隨時糾正不符合規(guī)范的行為的義務(wù)。外泄，對實驗室工作環(huán)境進(jìn)行評估，以鑒定生物安全防護(hù)等級，保證生物安全。具備有效治療和預(yù)防措施。身體出現(xiàn)開放性損傷；呼吸道感染或其它導(dǎo)致抵抗力下降的情況；事故的應(yīng)急處置原則和上報程序。進(jìn)入實驗室的一般申請由檢驗科負(fù)責(zé)人的批。制定年度生物安全培訓(xùn)、考核計劃，報生物安全領(lǐng)導(dǎo)小組批準(zhǔn)后實施。

　　

【正文】 要技術(shù)參數(shù) 滅菌室容積： (1m) 安全聯(lián)鎖裝置：滅菌室內(nèi)壓力大于 時，門被聯(lián)鎖。 工作壓力： 工作溫度： 126℃ 熱均勻度 : ≤177。1℃ 湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 33 頁 共 46 頁 供汽壓力： ～ MPa 安裝 在連接蒸汽輸送管道時，應(yīng)在連接處、蒸汽輸送管下方安裝一只排放蒸汽輸送管道內(nèi)冷凝水的閥門。 安裝時應(yīng)將排氣管接裝至室外，以免室內(nèi)霧氣彌漫，影響工作環(huán)境。 操作時排氣管不斷有冷凝水排出，可以在排氣管下方安裝一個錐形漏斗，并與下水道排水管連接，這樣，既能隨時觀察冷凝水瀉出的情況，又可防止因下水道淤塞，而造成污 水倒灌之弊。 安裝圖 操 作順序： 蒸汽加熱：排水 → 堆放 → 密閉 → 加熱 → 滅菌 → 干燥 (冷卻 ) → 結(jié)束 排水 滅菌器在加熱時必須在操作前將外接輸送正氣管道內(nèi)的冷凝水排掉。 堆放 將待滅菌的物品予以妥善包扎，順序地、相互之間保持適當(dāng)?shù)拈g隙放入滅菌室內(nèi)。這樣，有利于蒸汽的穿透，確保滅菌效果。堆放輔料時，不宜緊靠滅菌室門，以免蒸汽的冷凝水沿著門壁滴在輔料上，使輔料吸收過多水分，造成滅菌終了時不易干燥之弊端。同時，輔料包不宜過大，一般以 20cm20cm10cm 為佳，否則，將延長滅菌時間，具體應(yīng)根據(jù)實驗后確定。對溶液進(jìn)行滅菌 時，應(yīng)灌注于影質(zhì)耐熱玻璃瓶中，以不超過玻璃瓶容積的 3/4 為宜，用棉花紗布塞將瓶塞好，并用紗繩扎于瓶頸上，防止紗布塞落入瓶內(nèi)。且勿使用未打孔的橡膠或軟木塞。最好將玻璃瓶放置于容積稍大的搪瓷或金屬盤內(nèi)，以防萬一玻璃瓶爆炸時，溶液不致流失和污損滅菌室金屬內(nèi)壁。 密閉 將門關(guān)上，按順時針方向撥動鎖緊手柄至中方位，使撐檔進(jìn)入門圈內(nèi)。然后順時針方向旋轉(zhuǎn)八角轉(zhuǎn)盤，使門和墊圈密合，不要將門閂得過緊，以免損壞墊圈。 加熱 先將滅菌器右下方處減壓閥手柄指針對準(zhǔn)本次滅菌預(yù)定壓力值 (溫度 )，然后旋開下面進(jìn)氣閥， 外接蒸汽經(jīng)過濾器、進(jìn)氣閥由減壓閥減壓后進(jìn)入滅菌器夾套內(nèi)。 (注意：由于各用戶單位的鍋爐所輸送的蒸汽壓力有高有低或汽源不穩(wěn)定會造成滅菌器上減壓閥減壓湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 34 頁 共 46 頁 后壓力有偏差，此時應(yīng)微調(diào)減壓閥上手柄，逆時針方向旋轉(zhuǎn)，壓力降低，反之則相反 )。夾套內(nèi)冷凝水由夾套冷凝水泄水器排放。 滅菌 當(dāng)夾套內(nèi)蒸汽壓力達(dá)到選擇的控制壓力時，即可將總閥旋鈕旋至 “滅菌 ”檔位置，使夾套內(nèi)蒸汽進(jìn)入滅菌室，此時物品處于加溫滅菌狀態(tài)，同時滅菌室壓力表和壓力式指示溫度計分別顯示滅菌室內(nèi)的壓力和溫度值，再升溫滅菌過程中，應(yīng)將冷凝水泄出器后端的截止閥旋 開少許，觀察滅菌室內(nèi)空氣和冷凝水是否通過冷凝水泄出器排出，閥門打開的最佳位置，應(yīng)有冷凝水和少量的蒸汽溢出，這樣可使滅菌室內(nèi)各點穩(wěn)定趨于均勻。當(dāng)滅菌室溫度達(dá)到預(yù)選溫度時，參照 (表三 )開始計算滅菌時間。 各種物品消毒滅菌參考表 (表三 ) 滅菌物品類 滅菌保溫時間 (min) 飽和蒸汽相對溫度(℃ ) 蒸汽壓力 (MPa) 固體物料緩沖液 30 121 培養(yǎng)基等 15 121 培養(yǎng)基 30 115 生物危害品 45 121 干燥 滅菌時間終了后，按各種不同類別 滅菌物品的要求，任由滅菌室內(nèi)的蒸汽自然冷卻或予以慢排或快排。例如：輔料、器械、器皿等不致因壓力突然下降而損壞，且須在滅菌后使之干燥，則可將總閥旋鈕旋轉(zhuǎn)至 “快排 ”檔，使滅菌室內(nèi)蒸汽迅速排出。當(dāng)滅菌室壓力指針下降至 “0”位后，再等一、二分鐘，才可緩慢地轉(zhuǎn)動手輪和撥動安全緊定手柄，將門打開縫隙約 4~5cm，再等 10~15 分鐘，然后將滅菌物品取出，即能干燥。 冷卻 溶液、培養(yǎng)基等物品在滅菌終了時，為防止滅菌室壓力突然降低，引起瓶內(nèi)溶液劇烈沸騰或受到損壞。則應(yīng)將總閥旋鈕旋轉(zhuǎn)至 “慢排 ”，使滅菌室內(nèi)的蒸汽緩慢地 排出，或者切斷蒸汽源，使滅菌室壓力和溫度自然降低。也可直接將壓力控制開關(guān)的旋鈕旋至 “關(guān) ”位置， 任其自然冷卻，直到滅菌室壓力表回將至 “0”位后，再將總閥旋鈕旋轉(zhuǎn)至 “慢排 ”檔，等數(shù)湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 35 頁 共 46 頁 分鐘后，再將門啟開。 結(jié)束 如不需要再連續(xù)滅菌時，切斷蒸汽源，隨后將總閥旋鈕旋轉(zhuǎn)至 “全排 ”檔，排去套層和滅菌室內(nèi)的蒸汽，并將滅菌室門開啟少許，散發(fā)滅菌室內(nèi)剩余蒸汽，使滅菌室內(nèi)壁經(jīng)常保持干燥。 使用完畢后，登記儀器使用記錄。 注意事項 不同類型的物品盡可能不要同時進(jìn)行滅菌，如輔料與溶液、橡膠與器械等 。以免顧此失彼，不能獲得良好的效果。 當(dāng)蒸汽輸入滅菌室內(nèi)，應(yīng)徐徐開放冷凝水泄出器前端的閥門，使冷凝水泄出器間斷地排出滅菌室內(nèi)的空氣和冷凝水，確保滅菌效果。 安全閥提柄每周應(yīng)提位 1~2 次，以保持其靈活狀態(tài)。 應(yīng)保持滅菌器的清潔和干燥，特別是暫時不用時，更應(yīng)予以擦干凈，以免受到腐蝕。對轉(zhuǎn)動機(jī)零件應(yīng)及時加潤滑油。 滅菌器應(yīng)在完整情況下進(jìn)行操作，并應(yīng)由專職保養(yǎng)人員或熟悉業(yè)務(wù)者定期維護(hù)，以使正常運行，避免發(fā)生事故。 滅菌器旁應(yīng)懸掛操作規(guī)程以備查閱和遵循。 在 外接蒸汽源通入滅菌器夾套內(nèi)時，應(yīng)先把外接蒸汽管道內(nèi)的冷凝水排凈，才可向滅菌器夾套輸送蒸汽。 設(shè)備在運行過程中，出現(xiàn)安全閥排氣，這時套層壓力表指示的壓力值超過工作壓力，此時應(yīng)對減壓閥進(jìn)行調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)方式見 (七、部件維護(hù)減壓閥一欄 )。 維護(hù)保養(yǎng) 墊圈門墊圈系橡膠制品，遇老化和殘損而漏氣時，應(yīng)及時更換。 壓力表 凡遇指針不能回復(fù) “0”、讀數(shù)不準(zhǔn)等情況，應(yīng)即時修理，并應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)壓力表校核后方可使用，否則應(yīng)更換新表。 溫度表 滅菌器裝有壓力式指示溫度計和水銀玻璃溫度計各一只， 其測熱部位皆在滅菌室底部的冷凝水排出口處，故兩者的讀數(shù)應(yīng)基本相同。如發(fā)現(xiàn)溫差較大而水銀玻棒表又完好時，應(yīng)對指針式溫度計進(jìn)行維修并經(jīng)校核后使用。 湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 36 頁 共 46 頁 減壓閥 減壓閥是將外接管道蒸汽減至所預(yù)定值，本滅菌器出廠時調(diào)整在 、 、 三檔壓力范圍。由于各用戶單位的輸送的蒸汽壓力有高有低或汽源不穩(wěn)定，會造成減壓后壓力偏差，此時應(yīng)微調(diào)減壓閥上手柄，逆時針方向旋轉(zhuǎn)，壓力降低，反之則調(diào)高。減壓閥是本器安全運行重要部件，應(yīng)由專業(yè)人員保養(yǎng)與維護(hù)。 冷凝水泄水器 冷凝水泄水器內(nèi)的一只主要零件是 控溫元件，該元件受熱后膨脹，使閥尖與閥座密合，阻止蒸汽外泄。反之，在受冷時，該元件使閥尖與閥座開啟，泄出滅菌室內(nèi)的冷凝水。冷凝水泄水器的性能與滅菌室能否達(dá)到工作壓力下的相對溫度值有關(guān)。現(xiàn)將故障與排除方法歸納如表 (表四 ) 表四 故障情況 可能原因 排除方法 滅菌室達(dá)不到相對溫度 泄出器閥座間有異物 旋開螺紋裝置，予以清洗 泄出器前段管道阻塞 疏通前段管道 波紋管損壞 更換，臨時措施：則可將冷凝器開放少許，使滅菌室中的冷凝水泄出 滅菌室溫度上升太慢 泄出器之閥座間距過小 旋開螺紋蓋，松開固定螺釘，旋 緊閥尖再固定 故障情況 可能原因 排除方法 泄出大量蒸汽 泄出器之閥尖閥座間距過大 放松閥尖及閥座間距離 儀器維修后，及時登記儀器維修記錄。 （八） 電動吸引器操作規(guī)程 一、目的 建立本 SOP 旨在使操作人員的操作步驟規(guī)范化。 二、范圍 對 波膜過濾 器械、消毒巾、培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌之用。 三、責(zé)任人 湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 37 頁 共 46 頁 質(zhì)量負(fù)責(zé)人 、微生物檢驗員。 四、內(nèi)容 安裝、調(diào)試： 連接管路 ， 安裝前，在瓶塞的壓入瓶口部分凸緣處涂少量蒸餾水，可利于壓緊瓶塞并增強(qiáng)其密封性。 空氣過濾器上有綠點一面的接頭為 空氣入口，應(yīng)與貯液瓶的出口相接。 安裝車架 ， 接通電源 ， 電源指示燈亮。 檢驗管路 ， 按順時針方向旋緊負(fù)壓調(diào)節(jié)閥，堵塞吸氣口（用手指或滴管橡膠皮頭，或折疊并捏住吸引軟導(dǎo)管）。開啟吸引器開關(guān)或腳踏開關(guān)，機(jī)器運轉(zhuǎn)，真空表上指針將迅速上升至 以上；放開吸入口，表針將回到 以下。以上情況符合說明管路連接正確。 調(diào)節(jié)負(fù)壓 堵住吸入口，開啟吸引器開關(guān)，調(diào)節(jié)負(fù)壓調(diào)節(jié)閥，真空表上讀數(shù)應(yīng)在 ～極限負(fù)壓值范圍內(nèi)變化。臨床使用時，用負(fù)壓調(diào)節(jié)閥來控制吸引時需要的負(fù)壓 值。注意 ， 負(fù)壓調(diào)節(jié)閥順時針方向旋轉(zhuǎn)負(fù)壓增加。 檢查、實驗溢流裝置 開啟瓶塞，清潔閥口座閥口，按平浮子上的橡膠閥片，閥片應(yīng)無翹曲、撕裂等缺陷，且與浮子連接完好。浮子在浮子架中應(yīng)移動靈活，無阻軋現(xiàn)象。 手提瓶塞，使浮子垂直接觸水面，緩慢下移瓶蓋，浮子應(yīng)能在浮子架中浮起。 蓋緊瓶蓋，在吸入口接上吸引軟導(dǎo)管，旋緊調(diào)節(jié)閥，運行吸引器。 將吸引軟導(dǎo)管伸入一清水桶中，或模擬正常使用時的情況，將液體吸入帶溢流裝置的貯液瓶內(nèi)。液位上升將帶動浮子上浮，直至關(guān)閉閥口，吸 引自動停止。最終液位的高低會隨著吸引方法的不同而改變。 旋緊調(diào)節(jié)閥，關(guān)閉吸引器開關(guān)，開啟瓶塞，倒空貯液瓶。當(dāng)重新蓋緊瓶塞時，浮子應(yīng)處于浮子架的底部，閥口呈開啟狀態(tài)。 注意 一： 當(dāng)溢流裝置的關(guān)閉閥動作以后，液位仍繼續(xù)上升，有兩種可能情況： 1）由于貯液瓶內(nèi)剩余的負(fù)壓所致； 2）閥口沒有完全關(guān)閉。前一種情況，當(dāng)吸引軟導(dǎo)管離開被吸液體后再伸入其中，貯液瓶內(nèi)液位不再上升；后一種情況，液位仍會上升，對此，要仔細(xì)觀察，當(dāng)貯液瓶快滿時，應(yīng)立即從被吸液體中提起吸引軟導(dǎo)管，關(guān)閉吸引器，停止吸引，查找 閥口關(guān)閉失效的原因。 湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 38 頁 共 46 頁 注意 二： 浮子關(guān)閉閥口后，吸引停止。但由于管道內(nèi)的負(fù)壓，浮子可能仍被吸在閥口上。此時應(yīng)放松調(diào)節(jié)閥或關(guān)閉吸引器，即釋放管道內(nèi)的負(fù)壓，讓浮子依自重落下。嚴(yán)禁用手拉動浮子，防止橡膠閥片與浮子脫開。 注意 三： 關(guān)機(jī)后，放掉負(fù)壓，方可開啟瓶塞。 注意 四： 嚴(yán)禁在拆除溢流裝置和導(dǎo)向管的情況下，使用吸引器。 停機(jī) 安裝調(diào)試或使用結(jié)束后，要先關(guān)掉吸引器上的開關(guān)，再從電源插座上拔下電源插頭，以切斷網(wǎng)電源。 使用、保養(yǎng)及其注意事項 使用 使用前，按安裝、調(diào)試程序檢查吸引器，確保其性能完好后，連接消過毒的吸引軟導(dǎo)管和腹腔吸引管，即可使用。 使用中，可以用負(fù)壓調(diào)節(jié)閥控制所需負(fù)壓，視情況開啟或關(guān)閉吸引器開關(guān)或腳踏開關(guān)，并經(jīng)常注意貯液瓶中液位高度。 當(dāng)一次吸引量較大，不得不進(jìn)入后級貯液瓶時，在溢流裝置未動作前，及時倒空貯液瓶，否則液位將帶動浮子上升，直至關(guān)閉閥口，迫使吸引自動停止。 如果溢流裝置的關(guān)閉閥動作以后，液位仍繼續(xù)上升，處理方法見“檢查、測試溢流 裝置”。注意吸引器使用時應(yīng)在 技術(shù)人員 的指導(dǎo)下，嚴(yán)格按說明書的使用范圍、操作程序進(jìn)行，如有疑問請與供應(yīng)商或制造廠聯(lián)系。 空氣過濾器的更換 如空氣過濾器吸入泡沫或塞滿塵埃，將導(dǎo)致過濾膜的顏色會由淺變深，還會引起管道入口處的吸力明顯減小甚至消失。而真空表上負(fù)壓將不斷上升至 以上，此時應(yīng)及時用本廠的空氣過濾器替換。 注意 一： 使用中溢流裝置關(guān)閉、管道堵塞也會引起吸力減小或消失，負(fù)壓值上升。參見“故障分析與排除”。 注意 二： 空氣過 濾器應(yīng)經(jīng)常更換，并集中銷毀。 保養(yǎng) 停機(jī)前，建議使吸引管吸入少量的潔凈水以清洗管道的內(nèi)壁。 停機(jī)后，倒空貯液瓶，用柔軟的刷子或抹布清除瓶和瓶塞上的污垢，再用清水沖洗，其中包括溢流裝置和各種管道。必要時，旋下溢流裝置，分離其各部件（閥座與湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 39 頁 共 46 頁 浮子架為三腳卡口連接）并拆下導(dǎo)向管，進(jìn)行徹底清洗。 注意 ： 對于玻璃貯液瓶，在清洗和使用時切忌與銳器碰撞，并要防止跌落。貯液瓶、瓶塞及各種管道可以用康威達(dá)消毒片（每片 ） 按 1﹕ 500 濃度配置的消毒液浸泡 1 小時。 機(jī)箱外表面用浸過消毒液的微濕抹布來擦拭，防止液體滲入機(jī)箱縫隙。 金屬材料的吸引管可用溫度為 134177。 4℃的飽和蒸汽，保持 20 分鐘進(jìn)行消毒、滅菌。 設(shè)備不使用時應(yīng)放置在干燥、清潔的地方，定期（一般情況下為半年）開機(jī)運轉(zhuǎn)一次。 注意設(shè)備再次使用前，必須按 要求 裝上溢流裝置、導(dǎo)向管及其它管路。其中導(dǎo)向管上的三個插腳位置為非均布，確保裝好的導(dǎo)向管管口朝向貯液瓶內(nèi)壁。 （九）離心機(jī)操作規(guī)程 一、目 的 建立本 SOP 旨在使操作人 員的操作步驟規(guī)范化。 二、范 圍 適用于離心機(jī)調(diào)試、使用，正常狀態(tài)下操作 。 三、責(zé)任人 質(zhì)量負(fù)責(zé)人 、微生物檢驗員。 四、內(nèi)容 離心前必須仔細(xì)檢查轉(zhuǎn)頭各孔內(nèi)有無異物。 離心管必須仔細(xì)平衡。 機(jī)內(nèi)若不清潔，離心管要用塑料薄膜封口。 調(diào)節(jié)好離心時間后，再慢起動，然后加速。 離心時不準(zhǔn)開蓋。 離心結(jié)束，不能馬上開蓋，等電機(jī)完全停止后才能打開蓋子，取出樣品 。 （十） 實驗室 操作人員洗手、消毒操作規(guī)程 一、目的 湖南 省茶陵縣中 醫(yī)院檢驗科 第 40 頁 共 46 頁 建立進(jìn)入 實驗室 操作人員的洗手、消毒的管理規(guī)定，防止手對藥品、設(shè)