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高效液相色譜-20xx(參考版)

2024-08-27 00:47本頁(yè)面
  

【正文】 。 12121 11 ??????????????? ?? ??? ?? ??niniiininiiiniiixxnyxyxnb0 3 1 nxbyaniinii ??????cAAsi ??? 3 1 mLmgAAc si/2 9 0 3 1 0 3 1 ?????測(cè)mLmgc /2510100 ==標(biāo) ?%% ==標(biāo)測(cè) ???ccw本章小結(jié): 掌握高效液相色譜的速率理論表達(dá)式,并比較與 GC的異同; 掌握液液分配色譜中化學(xué)鍵合相的特點(diǎn)及分類; 掌握 HPLC儀器組成和主要部件的特點(diǎn); 熟悉 HPLC的常用分析模式及色譜條件; 熟悉 HPLC中分離度的影響因素式及分析條件的選擇 習(xí)題與思考題 ? 思考題 P306~307 8。精取 mL于 25 mL容量瓶中,同時(shí)加入內(nèi)標(biāo)溶液 mL,定容。得蘆丁色譜峰面積和內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的平均值分別為 、 、 、 。方法如下: 準(zhǔn)確配制 1 mg/mL濃度的蘆丁對(duì)照溶液和對(duì)氨基苯甲酸對(duì)照溶液,精取蘆丁對(duì)照溶液 mL、 mL、 mL、 mL、 mL,分別置于 25 mL容量瓶中,同時(shí)各加入內(nèi)標(biāo)溶液 mL,定容。 A 增加流動(dòng)相中甲醇的比例 B 增加流動(dòng)相中的水的比例 C 流動(dòng)相中加人少量 HAc D 流動(dòng)相中加人少量的氨水 例題 在液相色譜中,常用作固定相又可用作鍵 合相基體的物質(zhì)是( )。 A 樣品的 k降低, tR降低 B 樣品的 k增加, tR增加 C 樣品的 k增加, tR降低 D 樣品的 k降低, tR增加 例題 在正相色譜中,若適當(dāng)增大流動(dòng)相極性, 則( )。ttVVKVCVCWWk Rmsmmssms ??????。┑呐浔龋ㄊ苤鶞赜绊戄^:調(diào)整流動(dòng)相和固定相k續(xù)前 2. 對(duì)流動(dòng)相的要求: 1) 與固定液不反應(yīng) 2) 對(duì)樣品有良好溶解度 k=1~10 k=2~5 最理想的 3) 與檢測(cè)器匹配: UV( 常用 , 測(cè)定波長(zhǎng)應(yīng)大于溶劑的截止波長(zhǎng) ) 熒光 , 電化學(xué) 4) 使用粘度小 、 純度高的流動(dòng)相 ( 甲醇 , 乙腈 ) 使用前過濾 、 脫氣 續(xù)前 3.洗脫方式 1) 等度洗脫 ( 恒組成溶劑洗脫 ) 以固定配比的溶劑系統(tǒng)洗脫組分 ( 一個(gè)泵 ) 類似 GC的等溫度洗脫 2) 梯度洗脫: 在一定分析周期內(nèi)不斷變換流動(dòng)相的種類和比例 即不斷改變其極性 ( 兩個(gè)泵 ) 適于分析極性差別較大的復(fù)雜組分 類似 GC的程序升溫 ( 沸程較長(zhǎng)樣品 ) 圖示 第五節(jié) 高效液相色譜儀 HPLC 儀器示意圖 HPLC的基本流程圖 流 動(dòng) 相 泵 色 譜 柱 檢測(cè) 器 泵 液 分離 檢測(cè) 記錄 進(jìn)樣閥 進(jìn)樣 1. 泵 : 恒壓泵:流量精度不穩(wěn) 恒流泵:常用 2. 進(jìn)樣裝置 1) 隔膜進(jìn)樣 ( 高分子有機(jī)硅膠墊 →進(jìn)樣室 ) GC系統(tǒng)壓力較小 , 可以 HPLC系統(tǒng)壓力太大 , 必須停泵進(jìn)樣 ( 早期 ) 2) 閥進(jìn)樣:不必停泵 , 六通閥 開始分析 廢 液 樣 品 淋洗液 至分離柱 進(jìn)樣閥 樣 品 裝 樣 廢 液 淋洗液 至分離柱 六通 閥 (LOAD) (INJECT) 樣 品 環(huán) 續(xù)前 3. 色譜柱 :直徑 4~6mm,柱長(zhǎng) 10~30cm 柱效評(píng)價(jià):色譜系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) R, n, fs( 拖尾因子 ) 柱再生:維護(hù) 、 保養(yǎng) 、 柱子的沖洗 4. 檢測(cè)器 1) 紫外檢測(cè)器:適于吸收紫外光的物質(zhì) 2) 熒光檢測(cè)器:只能分析自身
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