【正文】 2022/5/26 85 。 ? 從 NOAEL到胚胎死亡劑量之間的劑量范圍叫致畸帶，致畸帶越寬的致畸物，致畸危險性越大。 ? 不同的發(fā)育毒物作用與不同的發(fā)育階段產(chǎn)生不同的效應(yīng)。 ? 結(jié)果評定 ：母體毒性及 NOAEL，胚胎毒性、致畸性、子代神經(jīng)行為影響及 NOAEL。 ? 終末處理 ：斷乳后處死母體和部分幼仔，每窩選 8只撫育到性成熟并交配，評價生育力的 F1代在 F2代出生后處死。 ? 實(shí)驗(yàn)動物 ：至少一種，首選大鼠，每組雌雄各 16～ 20只（窩）。 ? 結(jié)果評定 ：母體毒性及 NOAEL，胚胎毒性、致畸性及 NOAEL。 ? 終末處理 ：妊娠結(jié)束前一天處死，胎仔一半茜素紅染色，觀察骨骼，另一半 Bouin’s液固定，觀察內(nèi)臟。 ? 實(shí)驗(yàn)動物 ：通常兩種，嚙齒類首選大鼠，非嚙齒類可選家兔，每組雌雄各 16～ 20只（窩）。 ? 結(jié)果評定 ： F0代和 F1代毒性及 NOAEL，考慮各組受影響的窩數(shù)等。 ? 終末處理 ：雄性證實(shí)交配并使雌性受孕成功后處死，雌性在受孕 13～ 15天終止妊娠。每組雌雄各 16～ 20只（窩）。 2022/5/26 75 已知的人類致畸物 ? 電離輻射： 放射治療、放射性碘、原子武器 ? 感染： 風(fēng)疹、巨細(xì)胞病毒、單純性皰疹、梅毒、弓形體病毒 ? 代謝失調(diào)： 克汀病、糖尿病、苯丙酮酸尿、男性化腫瘤、高溫 ? 藥物和化學(xué)品： 反應(yīng)停、 Abameetin、 酒精、 氨基蝶呤、 雄性激素、麻 醉劑、抗甲狀腺藥物、白消安、咖啡因、氯代聯(lián)苯類、香豆素抗凝劑、環(huán)磷酰胺、二已基乙烯雌酚、敵螨普、三氟氯溴乙烷 、異維 A酸、鋰、甲巰咪唑、有機(jī)汞化合物、有機(jī)溶劑類、苯妥因、腐霉利、四環(huán)素、三甲惡唑烷二酮、丙 (基 )戊酸 2022/5/26 76 生育力和早期胚胎發(fā)育毒性試驗(yàn) （一般生殖毒性試驗(yàn)） ? 研究目的 ：評價化學(xué)毒物對配子發(fā)生和成熟、交配行為、生育力、胚體著床前和著床的影響。 (3)已知在妊娠的特殊階段暴露于接觸環(huán)境的改變，產(chǎn)生有特征性缺陷的綜合征。 2022/5/26 73 根據(jù)動物試驗(yàn)人群調(diào)查資料對致畸物分級 根據(jù)歐共體（ EEC）和經(jīng)濟(jì)與發(fā)展組織（ OECD）建議 2022/5/26 74 確認(rèn)人類致畸物的標(biāo)準(zhǔn) (1)一種特殊的缺陷或幾種缺陷并發(fā) (綜合征 )頻率突然增加。 D：如果在懷孕期間使用，應(yīng)通知病人對胎兒可能的危害。 2022/5/26 72 A、 B、 C2：僅在如果明顯地需要時，在懷孕期間可使用。 2022/5/26 70 國際生命科學(xué)院 (International Life Sciences Institute,ILSI) 1989年提出 2022/5/26 71 ICH人類用藥危險度分類 : ICH：人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會。 ? 優(yōu)點(diǎn)：所用動物少，檢測終點(diǎn)少，實(shí)驗(yàn)周期短，能提供有關(guān)化學(xué)物對生殖和／或發(fā)育可能發(fā)生影響的初步信息。 2022/5/26 66 （二）發(fā)育毒性資料的使用 化學(xué)物致畸潛力分類和安全系數(shù)確定 ICH人類用藥危險度分類 根據(jù)動物試驗(yàn)人群調(diào)查資料對致畸物分級 確認(rèn)人類致畸物的標(biāo)準(zhǔn) 2022/5/26 67 三、發(fā)育毒性的替代試驗(yàn) （一）體外預(yù)篩試驗(yàn) 大鼠全胚胎培養(yǎng) 器官培養(yǎng) 胚胎細(xì)胞微團(tuán)培養(yǎng) 小鼠胚胎干細(xì)胞試驗(yàn) 2022/5/26 68 （二）體內(nèi)預(yù)篩試驗(yàn)（ ） ? 又名生殖／發(fā)育毒性篩選試驗(yàn) ? 依據(jù)：大多數(shù)出生前受到的損傷將在出生后表現(xiàn)為存活力下降和／或生長障礙。 2022/5/26 63 三段生殖毒性試驗(yàn) ? 生育力和早期胚胎發(fā)育毒性試驗(yàn)（一般生殖毒性試驗(yàn)） ? 胚體 胎體毒性試驗(yàn) (致畸試驗(yàn) ) ? 出生前后發(fā)育毒性試驗(yàn) (圍生期毒性試驗(yàn) ) 2022/5/26 64 三段生殖試驗(yàn)圖解 Ⅰ . 生育力和早期胚胎發(fā)育毒性試驗(yàn)（一般生殖毒性試驗(yàn)） Ⅱ . 胚體 胎體毒性試驗(yàn)（致畸試驗(yàn)） Ⅲ . 出生前后發(fā)育毒性試驗(yàn)（圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn)） 2022/5/26 65 二、人群流行病學(xué)研究 （一）人類證據(jù)的獲得 流行病學(xué)調(diào)查：在接觸外來化合物的人群中進(jìn)行調(diào)查。 ? ：檢查成年雌性生殖功能、新生仔對宮外生活的適應(yīng)性、斷乳前的發(fā)育與生長。 ? ：檢查成年雌性生殖功能、胚體發(fā)育、主要器官形成。 2022/5/26 61 生殖發(fā)育過程可分為 6個階段 ? A. 從交配前到受孕 ：檢查成年雄性和雌性生殖功能、配子的發(fā)育與成熟、交配行為、受精。此外更要重視流行病學(xué)的調(diào)查，設(shè)法收集接觸者的流行病學(xué)及臨床資料，只有將動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果與流行病學(xué)調(diào)查資料結(jié)合起來，進(jìn)行綜合分析，才能得出正確的結(jié)論。 ? 維生素 A常用作致畸的陽性對照物，給大鼠 1000mg/kg劑量可引發(fā)畸胎，按此劑量推算， 50kg體重的人每天應(yīng)服用 50ml的魚肝油，才會產(chǎn)生致畸作用，而人類很難攝取如此大量的魚肝油，故到目前為止，維生素 A并未被列為人類的致畸物。 ? 但只要受試物在一種動物具有致畸作用，就應(yīng)警惕它對人類具有的潛在危險性。 2022/5/26 58 動物試驗(yàn)的缺點(diǎn)： 動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果外推到人的不肯定性： ? 由于致畸作用存在種屬差異和品系差異，故對一種受試物須多次重復(fù)同一實(shí)驗(yàn)，均出現(xiàn)一定畸胎發(fā)生率，才能認(rèn)為畸胎發(fā)生與該受試物有關(guān)。 ? 為保證哺乳機(jī)會，一般主張每窩保留 8只幼仔，并盡量雌雄數(shù)量相等。 黃體為 排卵 后由 卵泡 迅速轉(zhuǎn)變成的富有血管的腺體樣結(jié)構(gòu)。 2022/5/26 56 ? 孕鼠處死后，從子宮頂端依次取出其中活產(chǎn)幼仔、死胎以及吸收胎，并記錄編號。胎仔在臨近出生期間，發(fā)育進(jìn)展極為迅速。 2022/5/26