菌種分離篩選ppt課件(參考版)
2025-05-07 12:07本頁面
【正文】 將純培養(yǎng)接種到無菌試管斜面上保藏． 。 ? 在選擇培養(yǎng)基上選擇水解圈大的不同菌種，分別接種到鑒別及純化培養(yǎng)基（須無菌操作）上，待其生長。 ? 本實驗以在濕潤的松針堆積層下、腐爛的草下、多種混合葉腐爛堆下的土壤，熊貓糞和牛糞為樣本。 實驗方法與步驟 : ? 取樣 →菌懸液的制備 →將菌懸液涂布到有選擇與鑒定作用的培養(yǎng)基（含剛果紅）上 →挑選單菌落純培養(yǎng) →對純培養(yǎng)物制片鏡檢 (有條件的話查出菌的種屬類別 ) →將純培養(yǎng)接種到無菌試管內保藏。 ? 纖維素分解菌（ 混合 ）的選擇培養(yǎng)基 : 纖維素粉 5g、 NaNO3 1g、 Na2HPO3 、 KH2PO3 、 MgSO4 、 KCl 、酵母膏 、水解酪素、以上物質溶解后蒸餾水定容到 1000ml 、 鑒別及純化培養(yǎng)基（半固體） ? 鑒別培養(yǎng)基的成分 :(NH4)2SO4 2 g， MgSO4 g，K2HPO4 1 g， NaCl g，剛果紅 g，水 1000 mL，瓊脂 5g 、 自然 pH 值 、 剛果紅 、濾紙片（去淀粉） 。7H2O 0. 50 g、 N aCl 0. 50 g、 10%FeSO 4 2滴、 H2O 1000 mL、 pH 7. 2～ 7. 4 、瓊脂 20g、剛果紅 . ? 纖維素分解 真菌 培養(yǎng)基 : ? CMC、馬鈴薯 200g KH2PO 4 3. 00 g、MgSO4 實驗所用的器材 ： ? 培養(yǎng)皿， 250mL錐形瓶，無菌稱量瓶，濾紙，藥匙、 1 mL和 10 mL的移液管、電子秤、無菌培養(yǎng)皿、涂布器、解剖鏡、顯微鏡、接種針、溫箱等 實驗用培養(yǎng)基配方及配制注意事項 、選擇培養(yǎng)基 : ? 纖維素分解 細菌 赫奇遜培養(yǎng)基 : ? CMC, 、 MgSO4短時間培養(yǎng)也無大礙。 ? 方法二的優(yōu)點是操作簡便，不存在菌落混雜問題，缺點是由于實驗材料和瓊脂都含有淀粉類物質，可以使能夠產生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應。 ? 纖維素分解菌的篩選 纖維素 剛果紅混合培養(yǎng)基 剛果紅染色法 ? 常用的剛果紅染色法有兩種：一是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應，二是倒平板時就加剛果紅。 實驗原理 纖維素與纖維素酶 ? 纖維素酶是一種復合酶，一般認為至少包含三部分，C1,Cx,和葡萄糖苷酶組成。 ? ：練習科研過程中查閱資料、設計實驗方案、動手實施方案、綜合安排實驗、解決臨時實際困難等方面的基本能力，認識科研程序，感受科研樂趣和困難。 ? 子實體直接分離培養(yǎng)擔子菌：新采集的子實體組織植入平板內或在放于液體培養(yǎng)基表面放一小塊無菌濾紙上培養(yǎng) 。 ? 水中真菌的分離：水樣稀釋后涂布分離 。 真菌的分離方法 ? 土中真菌的分離：稀釋法 ， 混入法 ， 壓貼法 ，粘附法 ， 土過篩法 ， 庶糖密度梯度離心法 。 富集可以是種水平的，如通過營養(yǎng)要求的改變來富集分離鐮刀菌；也可以是組成群水平的，如以纖維素為唯一碳源的選擇性培養(yǎng)基可選擇性富集所有能降解纖維素的纖維素裂解微生物。 有時 ， 真菌子實體形成必須有光線 ， 這在分離培養(yǎng)時應加以考慮 。 這里主要是利用營養(yǎng)成分的減少而使生長減慢 ， 并由此限制真菌的遷徙生長 。 ? 將分離平板上所形成的菌
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