發(fā)酵工業(yè)菌種ppt課件(參考版)
2025-05-09 18:05本頁面
【正文】 。 本章小結 ? 掌握微生物分離篩選的基本概念、基本原理與基本技術 ? 掌握菌種改良的基本技術與方法 作業(yè) 1. 如何篩選肌苷酸高產(chǎn)菌株？試根據(jù)肌苷酸的代謝調節(jié)機制來分析。 代謝工程育種思路 3. 轉移或構建新的代謝途徑 1)轉移代謝途徑 : 為生產(chǎn)某一新的化學結構的代謝產(chǎn)物 ， 將催化某一代謝途徑的基因組克隆到另一不具備該種能力的微生物中 ， 達到代謝途徑轉移的目的 ， 使之具備生產(chǎn)該種新化合物的能力 。 （ 3）構建代謝旁路 （ 4）改變能量代謝途徑 代謝工程育種思路 2. 擴展代謝途徑 （ 1） 在引入外源基因后 ， 使原來的代謝途徑向后延伸 ， 產(chǎn)生新的末端代謝產(chǎn)物 。 S I P S Ⅰ Ⅱ P Ⅱ B B1 B2 相依網(wǎng)路 獨立網(wǎng)路 （三）代謝工程育種思路 1. 改變代謝流 ： 改變分支代謝途徑的流向，阻斷有害代謝產(chǎn)物的合成。 代謝工程 發(fā)展基礎 ? 相依網(wǎng)絡 ：代謝網(wǎng)絡中各主節(jié)點集中于產(chǎn)物 ， 為了避免中間物的過量積累 ， 各分支的代謝流都必須保持平衡 ， 各分支的分流相等 ， 各節(jié)點的重要性相同 。 半柔性節(jié)點 ：須降低主分支的酶活并同時提高次分支的酶活或解除其反饋抑制 ， 才可提高次分支下游產(chǎn)物的產(chǎn)量 。 ? 代謝網(wǎng)絡分流處的代謝產(chǎn)物稱為節(jié)點 ， 其中對終產(chǎn)物合成起決定作用的少數(shù)節(jié)點稱為主節(jié)點 。 ? 又稱作途徑工程，是多基因的基因工程。 ? 篩選模型：目標酶 生長因子產(chǎn)生菌的篩選 ? 篩選模型：營養(yǎng)缺陷型試驗菌 ? 篩選方法：利用被分離的微生物產(chǎn)物能否促進營養(yǎng)缺陷型試驗菌生長 氨基酸產(chǎn)生菌的篩選 樣品 預處理 初篩 （ 除真菌 ） 在分離平板上生長獲得多個單菌落 復印平板 （ copy 法 ） 平板培養(yǎng) ， 其中有產(chǎn)生氨基酸的菌落分泌氨基酸 對應到 copy前相應 位置 ， 找到目的菌落 再鋪上一層含營養(yǎng)缺陷型試驗菌的瓊脂 培養(yǎng)后 產(chǎn)氨基酸菌落周圍有生長圈 目的菌落進行液體培養(yǎng) ， 對產(chǎn)物進行定量測定 篩選產(chǎn)物含量高的菌株 多糖產(chǎn)生菌的篩選 ? 取樣特點：碳水化合物工業(yè)的廢棄物 ? 篩選方案：從菌落外觀判斷，選擇外觀呈粘液狀的菌落，然后根據(jù)液體培養(yǎng)測定多糖含量來篩選高產(chǎn)菌。 ? 隨機分離技術舉例 ? 抗生素產(chǎn)生菌的篩選 ? 藥理活性化合物產(chǎn)生菌的篩選 ? 生長因子產(chǎn)生菌的篩選 ? 多糖產(chǎn)生菌的篩選 高產(chǎn)培養(yǎng)基設計的幾個原則 ? 制備一系列的培養(yǎng)基 ， 其中有各種類型的養(yǎng)分成為生長限制因素； ? 使用一聚合或復合形式的生長限制養(yǎng)分； ? 避免使用容易同化的碳源或氮源 ， 防止分解代謝物阻遏； ? 確定含有所需的輔因子 （ Co2+,Mg2+,Mn2+,Fe2+） ； ? 使 用 pH緩沖劑以減少 pH變化； ? 前體 、 促進劑及抑制劑
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