人工染色體載體ppt課件(參考版)
2025-05-05 00:10本頁面
【正文】 第四節(jié) P1噬菌體載體和 P1人工染色體載體（略） 2022/5/25 60 PAC載體 2022/5/25 61 人工染色體克隆載體的應用 構建基因組文庫 基因治療 基因功能鑒定 2022/5/25 62 質粒 * 受體細胞 結構 插入片斷 舉例 環(huán)狀 〈 8* pUC18/19 , T載體pGEM 3z等 λ噬菌體 線狀 9 24kb EMBL系列， Λ gt系列 絲狀噬菌體及噬菌粒 環(huán)狀 〈 10 kb M13mp系列 粘粒載體 環(huán)狀 35 45kb pJB8,c2RB, pcoslEMBL, pWE15/16, pCV BAC (Bacterial Artificial Chromosome) 環(huán)狀 ≈300 kb Pel oBAC系列 PAC (P1derived Artificial chromosome) 環(huán)狀 100 2022 kb PCYPAC1 YAC (Yeast Artificial chromosome ) 酵母細胞 線性染色體 100 2022 kb MAC (Mammalian Artificial Chromosome) 哺乳類細胞 線性染色體 〉 1000 kb 病毒載體 動物細胞 環(huán)狀 SV40 載體，昆蟲 桿狀病毒載體 穿梭載體 動物細胞 和細菌 環(huán)狀 pSVK3質粒， PBV, Ti質粒 載體的種類和特征 2022/5/25 63 質粒 λ噬菌體 柯斯質粒 單鏈噬菌 體 克隆 DNA大片段 177。 2022/5/25 55 二、 BAC載體工作原理 解決方法： 將 BAC載體裝載作為外源片段克隆到常規(guī)高拷貝質?？溯d體上，如（ pGEM4Z），從大腸桿菌中以多拷貝的形式復制，便于載體的制備，使用時將高拷貝質粒去掉。對如此大的 DNA片段一般要通過脈沖凝膠電泳分離。 2022/5/25 53 Structure of a bacterial artificial chromosome (BAC), used for cloning large fragments of donor DNA. CMR is a selectable marker for chloramphenicol resistance. oriS, repE, parA, and parB are F genes for replication and regulation of copy number. cosN is the cos site from l phage. HindIII and BamHI are cloning sites at which foreign DNA is inserted. The two promoters are for transcribing the inserted fragment. The NotI sites are used for cutting out the inserted fragment. 2022/5/25 54 二、 BAC載體工作原理 BAC載體的工作原理與常規(guī)的質?？溯d體相似。 （ parA、 parB 、 parC) 2022/5/25 52 一、 BAC載體及其結構 ?標記基因是氯霉素抗性基因（ Cmr) ?可以通過 α互補原理篩選重組子 ?設計了用于回收克隆DNA的 NotI酶切位點。 BAC復制單元來自 F質粒。 第三節(jié) 細菌人工染色體載體 （ Bacterial Artificial Chromosomes BAC） 2022/5/25 50 一、 BAC載體及其結構 BAC 載體 的大小約 kb，其 本質實際上是一個 質?？寺≥d體 。 ? YAC染色體與宿主細胞的染色體大小相近， YAC染色體轉入酵母細胞后很
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