實(shí)驗(yàn)八聚炳烯凝膠電泳(參考版)
2025-05-04 01:20本頁(yè)面
【正文】 注 意 事 項(xiàng) 。 制備濃縮膠時(shí)，注意梳齒邊緣不能有氣泡 ,膠凝聚后，注意拔梳 子要垂直小心拔出。 玻璃板表面應(yīng)光滑潔凈，否則在電泳時(shí)會(huì)造成凝膠板與 玻璃板或硅橡膠條剝離，產(chǎn)生氣泡或滑膠；撥膠時(shí)凝膠板易斷 裂，為防止此現(xiàn)象，所用器材均應(yīng)嚴(yán)格的清洗。 六 . 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果 可在培養(yǎng)皿下襯一白紙，便于觀察，用手機(jī)拍下凝膠圖，打印出來(lái)附在實(shí)驗(yàn)報(bào)告后。 ※ 剝膠時(shí)要小心 ,保持膠完好無(wú)損 ,染色要充分 . (五 ). 固定和染色 將凝膠放入固定染色液中，使染色液剛好沒(méi)過(guò)膠板，放到搖床上，緩慢搖動(dòng)，染色 7 min。當(dāng)藍(lán)色染料遷移至距離凝膠下端 2cm時(shí)，將電流調(diào)回到零，關(guān)閉電源。 (三 ). 進(jìn) 樣 除去底板，將制膠裝置放在電泳槽內(nèi)， 加入稀釋 10倍的 Tris－甘氨酸電極緩沖液（注意：加緩沖液先從內(nèi)槽加入，上面沒(méi)過(guò)短玻璃板，外槽液面沒(méi)過(guò)最下一個(gè)螺絲處 , 加樣前要使凝膠凹形樣品槽內(nèi)的氣泡全部排出 ,否則會(huì)影響加樣效果 .（用針筒將凹洞中的氣泡抽出） 用微量進(jìn)樣器取已經(jīng)混合好的樣品 15μl ，在距凝膠凹形槽底三分之一處緩緩進(jìn)樣 , 每人加 2個(gè)樣，兩邊各留 2 孔不加樣，避免邊緣效應(yīng)。 加入此物后請(qǐng)迅速混勻加樣，否則易凝固無(wú)法加樣 凝膠聚合好的標(biāo)志是膠與水層之間形成清晰的界面 . 水封的目的是為了使分離膠上緣平直，并排除氣泡 ，可用濾紙?jiān)谶吘壩? 要將玻板底邊平齊地壓緊在紅色橡膠條上，否則容易漏膠 。 1) 樣品濃縮效應(yīng) A
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