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chapter9核糖體ribosom(參考版)

2025-05-02 08:34本頁面
  

【正文】 (Darnell et al., 1990) L11rRNA復合物的三維結(jié)構(gòu) (引自 Porse .,1999) 。 原核生物與真核生物核糖體成分的比較 rRNA與 r蛋白的相互關(guān)系示意圖 線條表示相互作用及作用力的強(粗線)與弱(細線) (引自 Alberts et al, 1989) ( a)核糖體小亞單位中的部分 r蛋白與 rRNA的結(jié)合位點) ( b)及其在小亞單位上的部位 (引自 Albert et al., 1989,圖 a。 ?由 RNA催化產(chǎn)生了蛋白質(zhì) DNA代替了 RNA的遺傳信息功能 ?DNA雙鏈比 RNA單鏈穩(wěn)定; ?DNA鏈中胸腺嘧啶代替了 RNA鏈中的尿嘧啶 ,使之易于修復 。 因此 , 推測 RNA 可能是生命起源中最早的生物大分子 。然而雖然 RNAi的效應(yīng)是長效的,甚至在注射的華麗線蟲的子一代的整個生活周期里都能持續(xù),但是由于它不能產(chǎn)生 DNA的修飾,隨著細胞的不斷分裂,dsRNA被逐漸稀釋,最終不能持續(xù)的遺傳下去。 RNAi的可遺傳性 初期的試驗觀察到, 細胞增殖 50- 100倍仍可保持RNAi效應(yīng) 。 每個細胞只需少量的 dsRNA即能完全關(guān)閉相應(yīng)基因地表達 ,可見, RNAi過程具有生物催化反應(yīng)的基本特性 。 RNAi的高效性 siRNA的反義鏈結(jié)合到目的 mRNA后,不僅誘導RISC對該基因進行降解,同時還激活 RdRp介導的單鏈 RNA的合成,產(chǎn)生大量 dsRNA,這些 dsRNA再次被RISC切割成許多 siRNA,進入下一個 RNAi循環(huán)。 Breakthrough: Short dsRNA (~22 nt) induces RNAi Silencing of lamin proteins in human cells by dsRNA transfection ? RNAi的特點 RNAi的特異性 導入生物體的 siRNA只能引起同源基因的表達抑制,而無關(guān)基因不受影響。被切割成 21- 23bp的siRNA再與 RISC結(jié)合并激活, siRNA在 ATP提供的能量下解鏈,以它的反義鏈為模板識別靶 mRNA,引導 RISC對其進行降解,最終抑制目的基因的表達。 RISC對靶 mRNA的切割是以內(nèi)切的方式進行的,而且切割僅發(fā)生在與 siRNA同源的部分。但用 blast搜索果蠅和人的基因組序列,沒有發(fā)現(xiàn)與已知RdRp同源的序列,所以有非 RdRp依賴的 RNAi學說。 siRNA dsRNA RdRp RNAi需要的另一種酶為 RNA依賴性的 RNA多聚酶( RNA dependent RNA polymerase, RdRp)。 Dicer切割 dsRNA,產(chǎn)生 21- 23bp的 siRNA片斷。 Dicer是 RNA酶 Ⅲ 家族中dsRNA特異性核酸內(nèi)切酶,具有解旋活性。 siRNA的結(jié)構(gòu)特征是: 雙鏈,長度 21- 23nt; 具有 5’末端磷酸基團和 3’末端羥基; 雙鏈兩端具有兩個突出的單鏈核甘酸。 研究發(fā)現(xiàn)在植物、真菌、錐蟲、渦蟲、囊蟲、線蟲、果蠅、斑馬魚、老鼠早期胚胎等不同種屬的生物體中都存在這一現(xiàn)象。由于這種由于外源基因的導入而造成的抑制作用最初被確認是發(fā)生在轉(zhuǎn)錄后水平,所以被稱為 “ 轉(zhuǎn)錄后基因沉寂 ” ( posttranscriptional gene silencing)或共抑制( cosuppression)。
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