【正文】 （ 2） 旋光性 游離黃酮類化合物中 ， 二氫黃酮、二氫黃酮醇、二氫異黃酮、黃 烷及黃烷醇有旋光性 。 （ 6） 瀉下作用 如營實甙 A （ 7） 解痙作用 如 異甘草素 、 大豆素 可解除平滑肌痙攣， 大豆 苷、 葛根黃 素等可 緩解高血壓患者的頭痛等癥狀 。 （ 5） 抗菌及抗病毒作用 抗菌作用 ： 木犀草素 、 黃芩苷 、 黃芩素等 。 （ 3） 抗炎作用 如蘆丁 、 二氫槲皮素等 。 （ 2） 抗肝臟毒作用 水飛薊素 、 異水飛薊素 、 次水飛薊素等治療急、慢性肝炎 、 肝硬化及多種中毒性肝損傷 。 降壓 ，如蘆丁。 擴 張 冠 脈， 如蘆丁 、 槲皮素 、 葛根素 、 立可定等 。 首先合成得到查耳酮，查 耳酮異構(gòu)化等得到二氫黃酮及異黃酮，二氫黃酮再生成其他黃酮化合物。 （ 2） 糖的連接位置 O糖苷 ： 與苷元的結(jié)構(gòu)類型有關(guān) ， 如黃酮醇類 常形成 3’、 4’位的單糖苷或 3, 3,4’、 7,4’的雙糖 鏈 苷。 雙糖類 ： 槐糖 （ glcβ1→ 2glc）、 龍膽二糖 （ glcβ1→ 6glc）、 蕓香糖 （ rhaα1→ 6glc）、 新橙皮糖 （ rhaα1→ 2glc）、 刺槐二糖 （ rhaα1→ 6gal） 等 。6 39。4 39。2 39。 黃酮類 主要結(jié)構(gòu)類型 根據(jù)中央三碳鏈的氧化程度、 B 環(huán)連接位置、三碳鏈是否構(gòu)成環(huán)狀等特點，可將主要的天然黃酮類化合物分為： 黃酮和黃酮醇類 、 二氫黃酮和二氫黃酮醇類 、 雙黃酮類 、 異黃酮和二氫異黃酮類 、 查耳酮和二氫查耳酮類 、 花色素類 、 黃烷醇類 、 其他 （如 山酮類 、 生物堿型黃酮 、橙酮類） 。 對植物的生長、發(fā)育、開花、結(jié)果及抵御異物的侵入起重要作用。O1 2345678A BCC6C3C6 苯環(huán)上常見的取代基： OH， CH3O， OCH2O，萜類側(cè)鏈等。539。 339。OO123456782苯基色原酮 139。5 39。 3 39。 1 39。 苷類 αC βC 端基碳 脂鏈苷 向低場移動（ δ↑） 向高場移動（ δ↓） 向低場移動（ δ↑） 酯苷 向高場移動（ δ↓） 向低 場移動（ δ↑） 向高場移動（ δ↓） 酚苷 向高場移動（ δ↓） 向低 場移動（ δ↑） 向低場移動（ δ↑） 脂環(huán)苷 β 位無取代或取代后與端基碳構(gòu)型相同時，與脂鏈苷類似；取代后構(gòu)型不同時則較復(fù)雜 方法 單糖組成 氧環(huán)大小 連接位置 連接順序 苷鍵構(gòu)型 酸催化水解法 √ √ 酸催化甲醇解法 √ 乙酰解 法 √ 堿水解法 √ 酶水解法 √ 氧化開裂法 √ √ 甲基化法 √ 質(zhì)譜 √ Klyne 法 √ NMR √ √ √ 黃酮類化合物 黃酮類化合物 （ Flavonoids） 基本母核為 2苯基色 原酮類化合物。 此外， 吡喃糖苷中 ， 端基質(zhì)子處于橫鍵時， JCH≈ 170~175Hz； 處于豎鍵時， JCH≈ 160~165Hz。 用 1HNMR 可判斷一些糖苷鍵的相對構(gòu)型，但還有一些糖由于其結(jié)構(gòu)上的原因，而無法判斷。 雙面角為 90o 時，偶合常數(shù)為0； 90～ 180o 時，隨角度的增大偶合常數(shù)變大 ； 0～ 90o 時，隨角度的變小偶合常數(shù)變大 。 ③ 利用 2DNMR，如 HMBC 譜中的遠程相關(guān)關(guān)系 （ 4） 苷鍵構(gòu)型的決定 ① 分子旋光差（ Klyne 法） ② 酶催化水解方法 ③ 1HNMR 判斷糖苷鍵的相對構(gòu)型 ： 根據(jù)端基質(zhì)子信號的個數(shù)和化學(xué)位移值，可推測糖的個數(shù)、種類、糖與糖以及糖與苷元的連接位置 。 （ 3） 糖鏈連接順序的決定 ① 緩和水解法 （部分水解） ：將糖鏈水解成較小的片段，然后分析這些低聚糖的連接順序。 苷化位移（ glycosidation shift） ：糖與苷元成苷后，苷元的 αC、 βC 和糖的端基碳的化學(xué)位移值均會發(fā)生改變，這種改變稱為苷化位移。 （ 2） 單糖之間連接位置的決定 ① 將糖鏈全甲基化→水解→甲基化單糖的定性和定量（ GC） （甲基化單糖中游離 OH 的部位就是連接位置） ② 13CNMR 測定：主要歸屬各碳信號，以確定產(chǎn)生苷化位移的碳。 （ 5） 離子交換層析 糖的硼酸絡(luò)合物 —— 可進行離子交換層析 （ 四硼酸鉀的緩沖溶液 洗脫） 不必制成衍生物，而直接用水溶液進行分離 （ 糖自動分析儀 ） 1 糖鏈結(jié)構(gòu)的測定 主要解決的問題 —— 單糖的組成、糖之間的連接位置和順序、苷鍵構(gòu)型 （ 1） 單糖的組成 低聚糖、多糖的結(jié)構(gòu)分析，首先要了解由哪些單糖所組成，各種單糖之間的比例如何。 （ 4） 液相色譜 填充材料 ： 化學(xué)修飾的硅膠 優(yōu)點：不必制備成衍生物 ； 適合分析對熱不穩(wěn)定、不揮發(fā)的低聚糖和多糖。 吸附劑：硅膠 顯色劑：除紙層析應(yīng)用的以外，還可用 H2SO4/H2O 或乙醇液 、 茴香醛 硫酸試劑 、 苯胺 二苯胺磷酸試劑等 （ 3） 氣相色譜 將糖制備成三甲基硅醚 化 、乙?；蛉阴；苌?，增加其揮發(fā)性； 將醛糖用 NaBH4 還原成多元醇（避免形成端基異構(gòu)體）制成乙?；锘蛉阴；铩? 顯色劑：鄰苯二甲酸 苯胺、 Molish 試劑、硝酸銀試劑 （ 使還原糖顯棕黑色 ） 、三苯四氮唑鹽試劑（單糖和還原性低聚糖呈紅色）、 3,5二羥 基甲苯鹽酸試劑（酮糖呈紅色）等。 三氟三氯乙烷法和 Sevag 法（用氯仿 :戊醇或丁醇 =5:1 混合） 處理， 在避免降解上有較好效果。 （ 10） 蛋白質(zhì)除去法 用分級沉淀法得到的多糖，常夾雜有較多的蛋白質(zhì)，通常選擇能使蛋白質(zhì)沉淀而使多糖不沉淀的試劑來處理，如酚、三氯乙酸、鞣酸等。 適于分離溶解度相差較大的多糖。 利用其在酸性、中性、微堿性、堿性中的分級沉淀可分離多糖 。 洗脫溶劑的選擇： 分離中性物質(zhì) —— 水及電解質(zhì)溶液（酸、堿、鹽溶液及緩沖液， 離子強度 ≥ ） 阻滯較大的組分 —— 水 +有機溶液（水 甲醇、水 乙醇、水 丙酮等） （ 8） 季銨氫氧化物沉淀法 季銨氫氧化物是一類乳化劑，常用于酸性多糖的分離。 常用商品名稱及型號：葡聚糖凝膠（ SephadexG） 、 瓊脂糖凝膠（ Sepharose， BioGel A） 、 聚丙烯酰胺凝膠（ BioGel P） 、 羥丙基交聯(lián)葡聚糖凝膠（ Sephadex LH20， 親脂性，可在有機溶劑中進行分離的分子篩） 。 應(yīng)用：除水提液中的酸、堿性成分和無機離子；酸性、中性、粘多糖的分離 。 溶劑系統(tǒng)：水和不同濃度的乙醇水溶液 、 丙酮、水飽和的正丁醇等 流出順序：水 溶性大的先流出， 水溶性差的 后出柱 。 按 H2O、 10%、 20%、 30%、 50%、 70%乙醇液 梯度 洗脫順序：無機鹽 、 單糖等→二糖→三糖→寡聚糖 預(yù)處理 ： 目的 —— 除去混雜的金屬離子，使活力增強。 分類：粉末狀活性炭 、 顆粒狀活性炭 、 錦綸 活性炭。 （ 4） 活性炭柱色譜 用途 ： 分離水溶性物質(zhì)較好 ，如 氨基酸、糖類及某些苷類。 破壞或抑制植物體內(nèi)酶的方法： 直接用沸水、甲醇或乙醇進行提取 ； 藥材中 加入一定量的碳酸鈣拌和后再用沸水提取 ； 新鮮材料采集后迅速加熱干燥或凍干處理后再提取 。 苷類分子的極性隨著糖基的增多而增大 ， 可根據(jù)其極性大小，來選擇相適應(yīng)的溶劑。 糖與糖苷的提取分離 （ 1）常用 提取方法 主要為溶劑提取法 ： 水、稀醇（單糖、低聚糖、多糖） 。 優(yōu)點：① 反應(yīng)條件溫和，可得到原苷元；② 對苷元結(jié)構(gòu)容易改變的苷以及 C苷的水解特別適宜 （ C 苷用 Smith裂解 ，獲得的是連有一個醛基的苷元 RCHO）； ③ 從降解產(chǎn)物，可推測糖的種類、糖與糖的連接方式、氧環(huán)的大小等 。 在未損傷的植物組織中苷和水 解酶是分隔存在的 ，提取分離時應(yīng)注意酶解。 可用于 獲知苷鍵的構(gòu)型 ， 可獲得保持苷元結(jié)構(gòu)不變的真正苷元 ， 還可以保留部分苷鍵得到次級苷或低聚糖， 以便獲知苷元和糖、糖和糖之間連接方式。這樣堿能使多糖還原端的單糖逐個被剝落，對非還原端則無影響。 β消除反應(yīng) ：苷鍵的 β位有吸電子基團者，使 αΗ 活化，在堿液中與苷鍵起消除反應(yīng)而開裂。反式：水解 產(chǎn)物為 1,6葡萄糖酐； 順式：水解產(chǎn)物為正常的糖。 2. β苷鍵 葡萄糖雙糖的反應(yīng)速度：（ 1→ 6） （ 1→ 4） （ 1→ 3） （ 1→ 2） 可用于 決定糖與糖之間的連接位置 ，并 增加了反應(yīng)產(chǎn)物的脂溶性， 還可 保護苷元上的 OH，有利于提取、精制和鑒定等 。 反應(yīng)產(chǎn)物為 單糖、低聚糖、苷元的乙酰化衍生物 。 反應(yīng)條件 較溫和，一般是在室溫放置數(shù)天。 可用于判斷苷中糖的氧環(huán)大小 。 酸水解反應(yīng)的產(chǎn)物為游離糖，故不能確定糖在苷中 的 氧環(huán)大小 。 苷元為小基團時 ， 苷鍵橫鍵比豎鍵易水解（橫鍵易質(zhì)子化） ； 苷元為大基團時 ， 苷鍵豎鍵比橫鍵易水解（苷的不穩(wěn)定性促使其易水解） 。 酸水解難易 受到苷原子的電子云密度和空間位阻 等 的影響，其 規(guī)律 如下 ： 1. 苷原子 酸水解由易到難： N苷 O苷 S苷 C苷 ，但 N 處于酰胺或嘧啶位置時， N苷也難以進行酸水解 。 （ 1）酸催化水 解反應(yīng) 苷鍵屬于縮醛結(jié)構(gòu)，易為稀酸催化水解。 苷鍵的水解 研究苷類的化學(xué)結(jié)構(gòu)，必須了解苷元結(jié)構(gòu)、糖的組成、糖和糖的連接方式以及苷元和糖的連接方式、苷鍵的構(gòu)型等。 α羥酸（ HOCHCOOH）：可絡(luò)合 ； β羥酸（ HOCHCH2COOH）：不作用 。 糖 + H3BO3（ Lewis 酸） → 絡(luò)合物 （酸性增加、可離子化） 與溶液 pH、化合物比例與結(jié)構(gòu)等有關(guān) 反應(yīng) 要求 開環(huán)化合物： 碳鏈上 OH 越多，越易造成有利地位（順鄰二 OH） 。如： 糖 + 丙酮 → 五元環(huán)縮酮（異丙叉衍生物） 糖 + 丙酮 → 五元環(huán)縮酮（雙異丙叉衍生物） 當糖結(jié)構(gòu)中無順鄰 OH 時，則易轉(zhuǎn)變?yōu)檫秽墙Y(jié)構(gòu)，再生成五元環(huán)狀物（異丙叉衍生物） 糖 + 苯甲 醛 → 六元環(huán)狀縮醛（苯甲叉衍生物） 4. 硼酸絡(luò)合反應(yīng) 糖的鄰二 羥基可與許多試劑生成絡(luò)合物，借生成絡(luò)合物的某些物理常數(shù)的改變，可 有助于糖的分離、鑒定和構(gòu)型推定。 ⑤ 縮酮和縮醛化反應(yīng)（保護游離羥基） 酮或醛在脫水劑如礦酸、無水 ZnCl無水 CuSO4 等存在下 ， 易與多元醇的二個有適當空間位置的羥基形成環(huán)狀縮酮（ ketal） 或 縮醛（ acetal）。 如 Haworth 法（硫酸二甲酯，不常用）、 Purdie 法、 Hakomori 法（箱守法 ： 樣品 + DMSO + NaH + MeI → 全甲基化 ，反應(yīng)在非水溶劑即二甲基亞砜溶液中進行 ， 反應(yīng)一次即可） ② 三苯甲醚化（可逆，可用于保護羥基） ③ 三甲硅醚化（可用于增大糖類揮發(fā)性 ，利于色譜分析 ） ④ ?；磻?yīng)（酯化反應(yīng)） 羥基活性與甲基化反應(yīng)相同 。） * 環(huán)狀結(jié)構(gòu)中 ： 橫鍵羥基 ＞ 豎鍵羥基 （橫鍵位阻有利） ① 甲醚化 * 判 斷反應(yīng)是否完全的方法：甲基化物可用紅外光譜測試，直到無 OH 吸收峰為止。 糠 醛 衍 生 物 + 芳 胺 或 酚 類（ 苯 酚 、 萘 酚 、 苯 胺 、 蒽 酮 等 ）縮合 顯色 糖顯色反應(yīng)： * Molish 試劑：濃 H2SO4 + α萘酚 * 鄰苯二甲酸＋苯胺 （色譜顯色） 多糖等在濃酸作用下先水解在發(fā)生 Molish 反應(yīng)。 用途： 通過測定 HIO4 的消耗量以及最終的降解產(chǎn)物 ① 推測糖中鄰二 羥基 多少（ 如游離單糖， 1 鄰二羥基結(jié)構(gòu)消耗 1HIO4）； ② 同一分子式的糖，推測是吡喃糖還是呋喃糖； ③ 推測低聚糖和多聚糖的聚合度； ④ 推測 1,3 連接還是 1,4 連接（糖與糖連接的位置） 。 ④ 游離單糖，產(chǎn)物及消耗過碘酸用 Fischer 式計算 ； 成苷時 ，產(chǎn)物及消耗過碘酸用 Haworth 式計算 。 ② 在水溶液中進行或有水溶液（否則不反應(yīng)） 。C O O H+ 過碘酸反應(yīng)必有鄰二醇或相應(yīng)結(jié)構(gòu)（無則不反應(yīng)）； 有二氧化碳生成必有羧基； 有甲酸生成必有鄰三醇結(jié)構(gòu) ； 有氨生成必有氨基； 有羧酸生成必有羰基。 C H O N H3 + + CCOORR 39。HO H OI O 4 R C H O R 39。 C H O + CH2OHCHOBr2 / H2OCH2OHCOOH稀 HNO3COOHCOOHC C CH HO H O HHO HI O 4 R C H O R 39。 （反應(yīng)中形成五元環(huán) 結(jié)構(gòu)） R C C R 39。 1. 氧化反應(yīng) 單糖分