細(xì)胞工程學(xué)專業(yè)復(fù)習(xí)資料(參考版)
2025-04-27 22:41本頁(yè)面
【正文】 7 / 7。三．轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：指在基因組內(nèi)穩(wěn)定的整合以實(shí)驗(yàn)方法導(dǎo)入外源基因，并且外源基因可以穩(wěn)定遺傳給后代的遺傳工程動(dòng)物。二．克隆技術(shù)的應(yīng)用：檢驗(yàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性；制備轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物，細(xì)胞核移植所得的雜種稱為核質(zhì)雜種。第八章干細(xì)胞干細(xì)胞：是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。四．細(xì)胞系：由初代培養(yǎng)產(chǎn)生的能進(jìn)行無(wú)限次傳代培養(yǎng)的細(xì)胞群稱作細(xì)胞系五．培養(yǎng)細(xì)胞的保存凍存復(fù)蘇。實(shí)效培養(yǎng)的細(xì)胞大約增殖10代左右，這樣的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞。第七章動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一．離體培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞可分為：貼壁依賴型，非貼壁依賴型，兼性貼壁細(xì)胞。應(yīng)含有適當(dāng)?shù)臍⒕鷦?。要求具有一定的緩沖強(qiáng)度，以保證繁殖體在生產(chǎn)、運(yùn)輸和種植操作中的安全。三．人工種子由以下三部分組成：繁殖體，人工胚乳，人工種皮。根據(jù)包被的程度可將人工種子分為三大類：裸露的或休眠的繁殖體、人工種皮包被的繁殖體、水凝膠包埋再包被的繁殖體。九．雜種細(xì)胞的選擇系統(tǒng)與體細(xì)胞雜種植株的鑒定（P131132）（實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題）例：材料 月季（紅）玫瑰（白）培養(yǎng)月季式玫瑰……分離……原生質(zhì)體：純化、活力測(cè)定 融合方法 雜種選擇 雜種植株鑒定 膜的融合細(xì)胞質(zhì)融合（發(fā)生膜融合后的數(shù)小時(shí)）核融合（可能發(fā)生在細(xì)胞間期，也可能發(fā)生在第一次同步分裂過(guò)程中）。膜的擊穿：給予高頻直流脈沖就可以使原生質(zhì)膜擊穿，從而導(dǎo)致兩個(gè)緊密接觸的細(xì)胞融合在一起。2）作用機(jī)理：PEG分子具有輕微的負(fù)極性，可與帶正極性基團(tuán)的水、蛋白質(zhì)和碳水化合物等形成H鍵，在原生質(zhì)體之間形成分子橋，使原生質(zhì)體發(fā)生粘連進(jìn)而促使原生質(zhì)體的融合；PEG還鞥增加類脂膜的流動(dòng)性，使原生質(zhì)體的核、細(xì)胞器發(fā)生融合成為可能。植物細(xì)胞雜交的類型：1）體細(xì)胞雜交2）體細(xì)胞配子雜交3）配子間細(xì)胞雜交4）微細(xì)胞雜交原生質(zhì)體融合的種類（完整程度）：1）對(duì)稱融合 2）非對(duì)稱融合※六．原生質(zhì)體的融合方法之一: PEG誘導(dǎo)融合法1）特點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)是成本低；融合子產(chǎn)生的異核率高；不受物種限制。伊凡藍(lán)染色法：有活力的原生質(zhì)體不能被染色。：有活力的原生質(zhì)體不能被染色。先制備飼養(yǎng)層，再在其上培養(yǎng)有活力的原生質(zhì)體。：懸浮液滴于皿底，封口培養(yǎng)。固體平板培養(yǎng)3。三．原生質(zhì)體培養(yǎng)方法：（P118）1。漂浮法：蔗糖作滲透壓調(diào)節(jié)劑，離心，原生質(zhì)體漂浮于溶液表面。第五章 原生質(zhì)體培養(yǎng)及雜交一．原生質(zhì)體（protoplast）：除去細(xì)胞壁的裸露細(xì)胞。如蒽醌類物質(zhì)合成的植物細(xì)胞 ：產(chǎn)物合成在細(xì)胞生長(zhǎng)停止以后。培養(yǎng)條件下的植物細(xì)胞次生產(chǎn)物積累特性：：產(chǎn)物合成與細(xì)胞生長(zhǎng)成正比。（填空）同步化的方法：分選法；饑餓法；抑制劑法；低溫法P91十二。3. 懸浮細(xì)胞的生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)：P89圖56 （填空——五個(gè)時(shí)期）延滯期，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，直線生長(zhǎng)期，減慢期，靜止期。懸浮體系外觀為大小均一的小顆粒，培養(yǎng)基清澈透亮，細(xì)胞色澤呈鮮艷的乳白色或淡黃色。：一個(gè)成功的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)體系必須滿足三個(gè)條件（簡(jiǎn)答）：A． 懸浮培養(yǎng)物分散性良好，細(xì)胞團(tuán)
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