動物細胞培養(yǎng)實驗內容(參考版)
2025-04-19 22:27本頁面
【正文】 CO2著色細胞數(shù)）247。(4)正常細胞不被染色。細胞濃度細胞懸液量。(2)每個方格的積為結果分析：(1)用雙蒸水和500個大方格中的細胞。倍放大用計數(shù)器計數(shù)在顯微鏡用吸管吸取少量混合液，注入血細胞計數(shù)板小室。細胞懸液，充分混勻，然后，將混合液放置DHanksHanks培養(yǎng)液，用吸管沖洗細胞，制成細胞懸液。1~2min后，加入約在恒溫箱培養(yǎng)。（2）收集消化下來的細胞，歸入前離心管中，500~800r/min5min，去除上清液。5~8min，需終止消化（加基礎培養(yǎng)液EDTA（二）傳代培養(yǎng)實驗步驟取原代培養(yǎng)物，吸除原瓶內舊培養(yǎng)液，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶，將細胞振入培養(yǎng)液內，將懸浮在培養(yǎng)液中的細胞移入離心管中。1恒溫箱培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長情況，每隔持瓶左右、上下輕輕搖晃，移入細胞懸液。培養(yǎng)液，再接種培養(yǎng)瓶中先加入接種(1)510515mL(3)液漂吸用500~800r/min7min，吸除上清液。制備單細胞懸液(1)20min，用吸管吹打組織塊，以分離細胞，然后，加入完全培養(yǎng)液約倍的用吸管去除上清液，加入沉淀量液沖洗，移入離心管中（蓋好蓋子，請注意無菌操作），低速離心（500~800r/min）7min。或無菌培養(yǎng)皿中的小組織塊用20~30min。mm3用眼科剪反復剪切成次，吸去多余的液體。清洗或塊左右的小塊，用將心室肌置于無菌培養(yǎng)皿中，剪成次。DHanks液沖洗HanksDHanksHanks(3)DHanksHanks(2)取一只鵪鶉，斷頸處死，用液無菌離心管 100二、實驗器材與用品鵪鶉的心臟 平衡鹽（BSS）液（各組自己配的）100mL細胞培養(yǎng)瓶（每人一個） 完全培養(yǎng)液 滅菌培養(yǎng)皿1合成，抑制細胞生長等。（3）支原體污染對細胞影響及污染物的檢測支原體污染后，因為它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，細胞無明顯變化，外觀上給人以正常感覺，實則細胞受到多方面潛在影響，如引起細胞變形，6影響用青霉素、鏈霉素可以預防細菌污染有效。用相差顯微鏡觀察，可見滿視野都是點狀的細菌顆粒。細菌污染大多數(shù)可以改變培養(yǎng)液量。次，每次換半量或一般情況下，每周換液PH(3)(2)值的檢查(1)（三）組織培養(yǎng)細胞的常規(guī)檢查營養(yǎng)液3mL2mL新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變園，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈工作臺中將消化液倒掉，加入5～10（二）組織塊傳代培養(yǎng)將長成單層的原代培養(yǎng)組織塊從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液――%胰蛋白酶溶液。37℃溫箱培養(yǎng)，24~48為宜，加少量培養(yǎng)液（維持濕潤即可）。用吸管吸取小塊肝組織于培養(yǎng)瓶底部，均勻，間距離液吹下剪刀中的碎塊，然后，反復吹打，靜置片刻，吸除上清或1~2mL
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