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正文內(nèi)容

微生物菌種常規(guī)保藏技術(shù)規(guī)程來源accc(參考版)

2025-04-10 03:32本頁面
  

【正文】   復(fù)活復(fù)活時在無菌條件下打開沙土管,取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上,長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次,也可取沙土粒于適宜的液體培養(yǎng)基中,增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面。也可將純培養(yǎng)檢查合格的沙土管直接用牛皮紙或塑料紙包好,置干燥器內(nèi)保存?!?保藏將純培養(yǎng)檢查合格的沙土管用火焰熔封管口。無菌條件下用接種環(huán)取出少量沙土粒,接種于適宜的固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)后觀察其生長情況和有無雜菌生長?!?干燥用真空泵抽去安瓿管中水分并放置于干燥器內(nèi)。用無菌吸管吸取菌懸液,均勻滴入沙土管中, 。  斜面培養(yǎng)物的制備參照附錄A。塞好棉塞,或常壓間歇滅菌3次,每天每次1小時。另取瘦紅土100目過篩,水洗至中性,烘干,按沙∶土= 2∶1混合。用吸鐵石吸去鐵質(zhì),放入容器中用10%鹽酸浸泡,如河沙中有機物較多可用20%鹽酸浸泡。此方法可減少菌株突變,延長存活時間。不適用于病原性真菌的保藏,特別是不適于以菌絲發(fā)育為主的真菌的保藏?!?恢復(fù)培養(yǎng)恢復(fù)培養(yǎng)時,挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。  灌注石蠟 無菌條件下將滅菌的液體石蠟注入剛培養(yǎng)好的斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1厘米左右,使菌體與空氣隔絕?!?方法與步驟  液體石蠟將液體石蠟分裝加棉塞,用牛皮紙包好,置40℃恒溫箱蒸發(fā)水分,經(jīng)無菌檢查后備用。  保藏場所應(yīng)保持干燥,防止棉塞污染?!?應(yīng)選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟。此方法可阻止氧氣進入,使好氣菌不能繼續(xù)生長,也可防止因培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)而引起的菌體死亡,達到延長菌種保藏時間的目的?!?原理液體石蠟保藏法可作為定期移植保藏法的輔助方法。  菌種復(fù)壯菌種如有退化,應(yīng)將退化的菌種引入原來的生活環(huán)境中令其生長繁殖,通過純種分離,在宿主體內(nèi)生長等方法進行復(fù)壯。測量儀表采用毛發(fā)濕度計或干濕球濕度計。對于某些菌種,如芽裂酵母,阿舒假囊酵母,棉病囊霉等,須1-3個月移植一次?!?培養(yǎng)將接種后的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中,在適宜的條件下培養(yǎng)至細胞穩(wěn)定期或得到成熟孢子。適用于細菌和酵母菌等。適用靈芝等擔(dān)子菌類真菌。能充分利用斜面獲得大量菌體細胞,適用于細菌和酵母菌等。適用于易擴散的細菌,也適用于部分真菌。適用于細菌和酵母菌等。適用于擴散型生長及絨毛狀氣生菌絲類霉菌(如毛霉、根霉等)?!?無菌
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