第二章工業(yè)微生物基礎(chǔ)(參考版)
2024-10-21 12:31本頁面
【正文】 。 具體措施有： A、 配合一定的培養(yǎng)條件 ， 對退化菌株進(jìn)行單菌落或單細(xì)胞分離 ， 淘汰退化的個(gè)體 ， 純化菌種； B、 將芽孢桿菌的懸液加熱至 90處理數(shù)分鐘 ， 殺滅已退化的菌體 ， 保留芽孢；再將芽孢或孢子進(jìn)行傳代 ， 以淘汰退化的個(gè)體； C、 提供特殊的培養(yǎng)條件 ， 使環(huán)境有利于優(yōu)良性狀菌株的生長而不利于退化菌株的生長 ， 從而淘汰已退化的菌株個(gè)體； D、 將分離后得到的初篩菌株先保藏 ， 再進(jìn)行復(fù)篩考察 ， 從中選出穩(wěn)定性較好的菌種； E、同時(shí)應(yīng)用上述方法的兩種或兩種以上的方法，會(huì)收到更好的復(fù)壯效果。 “ 返祖” 菌種退化的防治 由于菌種的退化將會(huì)引起發(fā)酵過程的產(chǎn)量急劇下降，一旦發(fā)生菌種退化，就必須采取有效的預(yù)防和防治措施，防止菌種的優(yōu)良性能發(fā)生退化，同時(shí)若發(fā)現(xiàn)某些優(yōu)良性狀退化，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行分離純化，使生產(chǎn)菌種保持穩(wěn)定的優(yōu)良特性。 微生物細(xì)胞在每一世代中的突變機(jī)率一般為 108109，保藏在 04度時(shí)這一突變機(jī)率更小，但仍然不能排除菌種退化的可能。 使培養(yǎng)物常處于旺盛的生長狀態(tài)、且每次傳代時(shí)營養(yǎng)和環(huán)境條件都是在不斷的變化。 菌種的退化的原因可歸結(jié)為內(nèi)因和外因兩個(gè)方面，即自身變化和環(huán)境影響。 菌種的退化不同于培養(yǎng)過程中由環(huán)境條件變化引起的表面的、暫時(shí)的變化，而是由個(gè)別、少數(shù)菌體細(xì)胞衰退后逐漸導(dǎo)致整個(gè)菌株退化的一個(gè)從量變到質(zhì)變的遺傳變異過程。采用較大的接種量可以 縮短發(fā)酵罐中菌絲繁殖到達(dá)高峰的時(shí)間，但是，如果接種量過多，往往使菌絲生長過 快，培養(yǎng)液粘度增加，造成溶解氧供應(yīng)不足而影響產(chǎn)物的合成。 問題 3 什么叫接種量？以什么接種量接種較好？ 指移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的比例。 通常接種齡以 菌絲處于生命極為旺盛的對數(shù)生長期，且培養(yǎng)液中菌體尚未達(dá)到最高峰時(shí)較為合適。但也必須考慮盡量延長發(fā)酵罐最終代謝產(chǎn)物積累的時(shí)間，縮短由于種子發(fā)芽、 生長而占用的非生產(chǎn)時(shí)間，以提高發(fā)酵罐的生產(chǎn)率。一般 50m3發(fā)酵罐都采用三級發(fā)酵 。如谷氨酸生產(chǎn)，種子接入種子罐后于 32C培養(yǎng) 710h，菌濃達(dá)到 108109個(gè) /ml，即可接入發(fā)酵罐作為種子，這稱為一級種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)，也稱二級發(fā)酵。 種子擴(kuò)大培養(yǎng)流程圖 P25圖 22 實(shí)驗(yàn)室種子制備階段 （一級種子培養(yǎng)） 生產(chǎn)車間種子制備階段 （二級種子培養(yǎng)、 三級種子培養(yǎng)） 二級發(fā)酵 三級發(fā)酵 砂土孢子 冷凍干燥孢子 斜面孢子 搖瓶液體培養(yǎng) 茄子瓶斜面培養(yǎng) 固體培養(yǎng)基培養(yǎng)
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