蛋白質(zhì)的分離純化和表征(2)(參考版)
2025-05-17 11:44本頁(yè)面
【正文】 六 蛋白質(zhì)含量測(cè)定與純度鑒定 ? 含量測(cè)定 凱氏定氮法、雙縮脲法、 Folin酚試劑法等 ? 純度鑒定 電泳、沉降、 HPLC、溶解度等 。 *蛋白質(zhì)在離心場(chǎng)中的行為用 沉降系數(shù)(sedimentation coefficient, S)表示 ,沉降系數(shù)與蛋白質(zhì)的密度和形狀相關(guān) 。 * 凝膠過濾 (gel filtration)又稱分子篩層析， 利用 各 蛋白質(zhì)分子大小不同分離。 2 層析 層析 (chromatography)分離蛋白質(zhì)的原理 待分離蛋白質(zhì)溶液（流動(dòng)相）經(jīng)過一個(gè)固態(tài)物質(zhì)（固定相）時(shí)，根據(jù)溶液中待分離的蛋白質(zhì)顆粒大小、電荷多少及親和力等，使待分離的蛋白質(zhì)組分在兩相中反復(fù)分配，并以不同速度流經(jīng)固定相而達(dá)到分離蛋白質(zhì)的目的 。 *等電聚焦電泳 ，通過蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的差異而分離蛋白質(zhì)的電泳方法。 *有機(jī)溶劑深沉法 如乙醇 ,丙酮等沉淀 。 變性的蛋白質(zhì)易于沉淀 ， 有時(shí)蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀 ， 但并不變性 。 公式： 形狀 ? X射線晶體結(jié)構(gòu)分析 三 蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)與蛋白質(zhì)的沉淀 (一 )膠體性質(zhì) 蛋白質(zhì)屬于生物大分子之一 ， 分子
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