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實(shí)驗(yàn)二蛋白質(zhì)等電點(diǎn)及含量測定(參考版)

2025-05-16 06:47本頁面
  

【正文】 (可用乙醇或石油醚使溶液澄清后離心,取上澄清液再測) ? 測定樣品管吸光度時(shí),其吸光值應(yīng)界于標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi),如超出,應(yīng)適當(dāng)稀釋樣品后再測。 ? 顯色時(shí)間過長,可能會出現(xiàn)霧狀沉淀,影響比色。 ? 標(biāo)準(zhǔn)曲線選擇不能只看 R ,還應(yīng)該看曲線斜率和截距。 y = 17 【 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 】 —— 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量 樣品蛋白質(zhì)含量( mg/100 mL) =Y N 100/V 式中, Y為標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的蛋白質(zhì)的量( mg), N為稀釋倍數(shù), V為樣品所取的體積( mL)。 3. 取兩組樣品測定的 吸光值平均值 ,根據(jù)回歸方程計(jì)算出 相應(yīng)蛋白質(zhì)的 濃度 。 (見電腦桌面 Excel表格“標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制”) 16 【 操作步驟 】 —— 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量 ? (每小組做 1份) 2支 試管,分別加 1 mL未知濃度的 酪蛋白 蛋白質(zhì)樣品液 (注意樣品濃度不要超過 10 mg/mL), 加 1 mL蒸餾水 , 加 4 mL雙縮脲試劑 ,混勻, 室溫放置 30 min。 ? 以 0號管為對照管 ,于 540 nm處比色測定吸光值,記下各管吸光度。 ( 全班繪制 1份即可 ) ?取 6支 15mL試管,編號 05,按下表
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