【正文】 32 結(jié) 論 本反應(yīng)以 5甲基 2氨基苯酚為原料，通過甲 Boc 酸酐來保護(hù)氨基，然后通過親核取代成環(huán)，隨后形成鹽酸鹽，然后經(jīng)過氧化，還原，氯代最終形成所要化合物，在實驗的過程中也遇到了一些問題，例如反應(yīng)路線不通，產(chǎn)率較低，純度不高， 如往甲基上上氯這個路線， 我們通 過探索先讓甲基氧化成醛，醛再還原為羥基，最后進(jìn)行氯代，使得甲基上成功上氯，使路線得以暢通，而且實驗過程中通過對實驗試劑的改變，以及試劑摩爾比的變動使得每步反應(yīng)的產(chǎn)率較好，如第六步反應(yīng)過程中對甲醇和水的比例的提高使產(chǎn)率從 30%上升到 50%以上，從而節(jié)省了大量的資源，通過對每步反應(yīng)的產(chǎn)物進(jìn)行核磁分析，證明所得產(chǎn)物均為所期待產(chǎn)物，而且對有些產(chǎn)物進(jìn)行了 LCMS 分析，所得純度較好，如產(chǎn)物（ 5）的純度為 %，產(chǎn)物（ 6）純度為 100%，產(chǎn)物（ 7）純度為 %，產(chǎn)物（ 8）的純度為 100%，這也為以后的反應(yīng) 的純度提供了保障，通過對這類新型醫(yī)藥中間體的研究也為腺苷 A2A 拮抗 劑的研究給予很大的幫助，也可能會成為新型治療帕金森病藥物，有著巨大的發(fā)展前景，也為帕金森病患者帶來福音。 30 圖 產(chǎn)物（ 8）的 核磁 圖 Figure NMR figure 0f the product (8) 對產(chǎn)物的核磁圖分析共有 15 個氫原子， 與所要化合物的化學(xué)分子式相同，是期望產(chǎn)物。 28 圖 產(chǎn)物（ 6）的 核磁 圖 Figure NMR figure 0f the product (6) 對產(chǎn)物的核磁圖分析共有 15 個氫原子，與所要化合物的化學(xué)分子式相同，是期望產(chǎn)物。 26 圖 產(chǎn)物（ 4）的 核磁 圖 Figure NMR figure 0f the product (4) 對產(chǎn)物的核磁圖分析共有 21 個氫原子，與所要化合物的化學(xué)分子式相同，是期望產(chǎn)物。 23 圖 產(chǎn)物（ 8）的 液相色譜 質(zhì)譜 圖 Figure LCMS figure 0f the product (8) 此圖為第 七步 產(chǎn)物 （ 8）的 譜圖，產(chǎn)物純度為 100%，產(chǎn)物很理想 核磁圖譜分析 24 圖 產(chǎn)物（ 2）的 核磁 圖 Figure NMR figure 0f the product (2) 對產(chǎn)物的核磁圖分析共有 14 個氫原子，與所要化合物的化學(xué)分子式相同，是期望產(chǎn)物。 圖 產(chǎn)物（ 6）的 液相色譜 質(zhì)譜 圖 Figure LCMS figure 0f the product (6) 22 此圖為第五步產(chǎn)物（ 6）的譜圖，可以看出產(chǎn)物純度為 100%。在我們整個反應(yīng)的進(jìn)程中，產(chǎn)物的極性是逐漸加大的，在前幾步純化時并不要求達(dá)到 100%，考慮時間以及經(jīng)濟(jì)效益我們選擇較佳方案，因此 會 以較高的效率得到最終產(chǎn)物。第五步反應(yīng)中加入稍微堿性的碳酸鉀，使其與鹽酸鹽反應(yīng)，硫酸二甲酯上的甲基取代上面的 氨 氮的氫，可能由于反應(yīng)過程中有些許水產(chǎn)生，對反應(yīng)有一些影響，也因為在第四步反應(yīng)后沒有進(jìn)行過柱純化，反應(yīng)物的純度不高，由 LCMS 圖 得 其 純度為 %，這 也造成了 產(chǎn)率偏低。 表 3. 2 不同溶劑對反應(yīng)產(chǎn)率的影響 Table 3. 2Different solvents on the influence of the reaction yield 序列 溶劑 收率（ %） 1 二氧六環(huán) 0 2 無水四氫呋喃 0 3 水 10 4 甲醇：水 =10:1 30 5 甲醇：水 =16:1 50 20 由第六步反應(yīng)我們可以知道反應(yīng)液的摩爾比以及幾倍當(dāng)量都對產(chǎn)率有著很大的影響，我們在實驗過程中要善于探索，尋求最佳方案。類似的反應(yīng)有 30%的產(chǎn)量對氨基苯醛 (表 )在 MeOH:水處理系統(tǒng)下，而對甲基苯胺與 DDQ 反應(yīng)在水溶液中給出的對氨基苯醛的收率達(dá) 10%左右。 M eN H 2C H ON H 2D D QM e O H : H 2 O = 1 6 : 1 我們也觀察到類似的結(jié)果為 DDQ 氧化對甲基苯胺在二氧六環(huán) (表 )和四氫呋喃 (表)溶劑下基本沒有反應(yīng)。適合高附加值的產(chǎn)品。 IBX 是鄰碘苯甲酸的衍生物。然后 我們往 乙酐中加入 CrO3，攪拌成橙色溶液，滴加底物， 在常溫下 反應(yīng) 3 小時左右（用 TLC 監(jiān)測）。首先我們先將甲基氧化成醛，一般方法是使用硫酰氯，高錳酸鉀，三氧化鉻，二氧化錫等方法氧化， 我們 將第五步的產(chǎn)物溶于苯中，加入硫酰氯，使其在常溫下反應(yīng) 1 個小時，收集起 來，并通過柱層析刮大板來測得到產(chǎn)物，將產(chǎn)品送核磁檢測不是產(chǎn)物。 18 第 3 章 實驗結(jié)果與討論 實驗收率 收率 =反應(yīng)物質(zhì)量摩爾分?jǐn)?shù)反應(yīng)物質(zhì)量產(chǎn)物質(zhì)量摩爾分?jǐn)?shù)產(chǎn)物質(zhì)量? 表 各步反應(yīng)收率 step of the reaction yield 對于第六步反應(yīng)，我們開始時根據(jù)所提供的文獻(xiàn)用第五步的產(chǎn)物 500mg 溶解于氯仿中，加入碳酸鈉，通入氯氣，使其在油浴溫度 60 度反應(yīng)，但通過這次小試反應(yīng)不成功，反應(yīng)物有點雜， Cl 并不是單個上在甲基上，而是由兩個 Cl 原子發(fā)生取代，不是所要的化合物。 分析方法 核磁檢測：取產(chǎn)品 3~5mg 于 5ml 核磁管中，（ 5）號產(chǎn)品用溶劑 DMSO（ %標(biāo)準(zhǔn)溶液） 溶解，其余的產(chǎn)品用溶劑 CDCl3（ %標(biāo)準(zhǔn)溶液） 溶解，用 400MZ 氫譜核磁共振儀檢測。 第七步反應(yīng)：將醛基還原為羥基 ONOONH ON a B H 4 7 8 選取二升單口燒瓶，將第六步產(chǎn)物 (7)，加入攪拌子，加入甲醇 400ml，將燒瓶置放在干冰浴中，向其中緩慢加入硼氫化鈉 ，反應(yīng)五分鐘開始點板，確認(rèn)反應(yīng)已完全，向反應(yīng)液加 10%的檸檬酸水溶液調(diào) ph 值至 6~7，將溶液旋干，用乙酸乙酯和水萃取，將有機(jī)相旋干，稱取質(zhì)量，加硅膠拌樣，留樣，選取小型柱子，裝硅膠，上樣，加石英砂，通過對留樣點爬板觀察，共有三個點，第一個為雜質(zhì)點，第二個為產(chǎn)物點，第三個也是雜質(zhì)點，選取石油醚：乙酸乙酯 =10:1 沖洗，開始有雜質(zhì)點出現(xiàn)，按此比例沖洗直至雜質(zhì)點消失，然后加大極性至石油醚：乙酸乙酯 =5:1，沒有點出現(xiàn)，繼續(xù)加大極性至石油醚：乙酸乙酯 =3:1，產(chǎn)物點出現(xiàn)，繼續(xù)沖洗，直至產(chǎn)物點消失，將其旋干，稱其質(zhì)量為，取樣送核磁檢測。 第五步反應(yīng) OH . H C lNONM e 2 S O 4K 2 C O 3 5 6 將第四步的產(chǎn)物（ 5） ，加入碳酸鉀 150g，然后加入硫酸二甲酯 180ml,讓其在 0 度進(jìn)行反應(yīng)，然后保持室溫過夜反應(yīng)，此反應(yīng)在高度真空下進(jìn)行，點板反應(yīng)完全后過濾，然后用乙酸乙酯和水萃取三次，有機(jī)相旋干稱其質(zhì)量，進(jìn)行拌樣，裝柱子進(jìn)行過柱，通過對留樣的點板觀察，一共有兩個點，第一個是產(chǎn)物點，第二個是雜質(zhì)點，選取展開劑石油醚：乙酸乙酯 =20： 1 進(jìn)行 沖洗，點板確認(rèn)有熒光點，用展開劑石油醚：乙酸乙酯 =4:1 進(jìn)行爬板，發(fā)現(xiàn)純凈的產(chǎn)物點已經(jīng)下來，因為雜質(zhì)點和產(chǎn)物點相距較遠(yuǎn)，于是加大展開劑極性到 10:1，通過點板確認(rèn)產(chǎn)物依然純凈，于是繼續(xù)用此極性進(jìn)行沖洗直至沒有產(chǎn)物點出現(xiàn)，此過程中沒有雜質(zhì)點下來，將收集的溶液旋干既得產(chǎn)物 ，取樣送核磁檢測。 第四步反應(yīng) OB o cNOH . H C lNH C l / d i o x a n e 4 5 選取三升三口燒瓶，將第三步的產(chǎn)物（ 4） ，用 1000ml 無水二氯甲烷溶解，然后加入二氧六環(huán) 500ml，使其反應(yīng) 小時，可發(fā)現(xiàn)混合液伴隨著白色沉淀物的形成，點板確認(rèn)反應(yīng)完全后將反應(yīng)液然旋干，然后用甲基叔丁基醚潤洗三次，將溶液過濾，收集白色固體即得到產(chǎn)物 。取樣送核磁檢測。 第二步反應(yīng) N H B o cO HN H B o cO B rB r ( C H 2 ) 3 B rK 2 C O 3 2 3 取三升三口燒瓶將第一步的產(chǎn)物（ 2） 2020ml 乙腈中，然后加入 溴甲烷 175ml，再加入碳酸鉀 270g，使該混合液在油浴加熱至 55 度并保持此溫度反應(yīng) 小時，點板確認(rèn)反應(yīng)完全后，選取合適的濾紙和錐形瓶進(jìn)行過濾以除去固體，將濾液收集并用乙酸乙酯 2020ml 和水 1000ml 進(jìn)行萃取三次，有機(jī)相再用飽和鹽水 (300ml)潤洗三次，用無水硫酸鈉進(jìn)行干燥，旋干，稱取質(zhì)量加入 倍量硅膠，拌樣，旋干，留樣，裝柱，選取中型柱子，加入硅膠 700g，上樣，加入石英砂，先用石油醚沖洗，根據(jù)對留樣點點板觀察，產(chǎn)物點在上方，雜質(zhì)點在下方，用 50:1 沖洗，一段時間后產(chǎn)物點出現(xiàn)。 一 種拮抗劑的合成路線 X=Y=CH X=N， Y=CH X=Y=N 通過這 條路線 ，我們用這種藥物中間體來形成新型的 A2A 受體阻滯劑，研發(fā)出治療帕金森病的新藥物。 10 KW 60021 NN NNO M eO M eOO 最近 ， 抗瘧化合物 mefloquine 2是一種潛在的和合理的選擇性拮抗，這個 A2A受體如下 ，我們努力優(yōu)化這種化合物，并找到相關(guān)系列的化合物作為臨床藥物 ，如下： NH ONHC F 3C F 3 雖然我們可以準(zhǔn)備衍生物 ， 我們迄今所發(fā)現(xiàn)的這些平行特性的優(yōu)化是一個相當(dāng)大的挑戰(zhàn)。 通過這些發(fā)現(xiàn) ,拮抗劑已經(jīng)表現(xiàn)出良好的耐受性，口服拮抗劑受體。 紋狀 體多巴胺 能 不斷變小 ， 可能是因為增加了 D2受體的親和力 ，最近的證據(jù)表明 ， 腺苷的拮抗劑也許不能純粹為患者減輕帕金森病癥狀 (這種方式類似于發(fā)射機(jī)替代療法 ,如左旋多巴 )， 但也可以帶來神經(jīng)保護(hù) ， 減緩疾病的進(jìn)展。再者 ， 因為反饋抑制 ， 管理水平的增加外源性左旋多巴的結(jié)果會降低內(nèi)部形成的化合物 (內(nèi)源性多巴胺 )。 稀堿液處理能誘發(fā)不由自主的肌肉運動，有時 ， 在極端的情況下會出現(xiàn)張力 ， 這是令人非常痛苦的 ， 有些則是身體不同的部位發(fā)生肌肉痙攣 ， 使其處于更虛弱的潛在疾病狀態(tài)。這種待遇不盡理想 ， 藥物遭受飄忽不定的藥物動力學(xué)、導(dǎo)致出現(xiàn)一些相關(guān)的問題 ， 通過對藥物進(jìn)行預(yù)測 ， 我們發(fā)現(xiàn)如果太少藥物被吸收進(jìn)入大腦 ， 不夠一定級別的多巴胺達(dá)成 ， 這導(dǎo)致過早的重現(xiàn)帕金森癥狀 ， 被稱為一個 “關(guān)閉事件 ”。 對癥治療 帕金森 疾病需圍繞更換枯竭的大腦中多巴胺 ， 因此一般通過管理多巴胺前體左旋多巴。此外 ， 該衍生工具的藥效及臨床表現(xiàn)成功完成了第一階段的臨床研究。優(yōu)化這些化合物，改進(jìn)其效力 ， 選擇性、和動力學(xué)特性而得到一些關(guān)鍵衍生物。這認(rèn)為是可以會發(fā)生的 ,至少在部分 ,可以增加多巴胺神經(jīng)元的敏感性和紋狀體多巴胺的耗竭水平。因此， DA 缺乏的最終結(jié)果可能由于 A2A 受體的阻滯而有所緩解。 除了上述 A2A 受體的作用外，這種受體還能降低多巴胺 D2受體的親和力以及對抗 D1和 D2受體行為學(xué)、基因表達(dá)和第二信使系統(tǒng) [21]的影響作用。因此，多巴胺神經(jīng)支配總的作用是引起兩個傳出通路活動的失平衡，這也在編碼神經(jīng)肽的基因表達(dá)中得到了反映。這一通路活動增強(qiáng)還伴隨有這些神經(jīng)元編碼前腦非肽的基因表達(dá)增強(qiáng) [2]。在沒有多巴胺的情況下，從皮質(zhì)紋狀體神經(jīng)末梢上的 D2和 D1受體介導(dǎo)谷氨酸釋放的功能就失去了作用，這就會導(dǎo)致谷氨酸刺激紋狀體神經(jīng)元活動的增強(qiáng)[16]。另外，在紋狀體 Gpe 神經(jīng)元點燃時可能也有一些作用，而神經(jīng)元失活時其作用則相當(dāng) 小。由此可見， A2A 受體拮抗劑的作用是通過增加控制紋狀體 Gpe 神經(jīng)元的內(nèi)源性負(fù)反饋，從而代償 DA 介導(dǎo)對這些細(xì)胞的調(diào)節(jié)的缺乏。因此 ，通過增加（ GABA 介導(dǎo)）抑制性傳入（從返回側(cè)枝）使得 A2A 受體具有降低中型棘型傳出神經(jīng)元活性的作用。 至少有兩種神經(jīng)遞質(zhì)（ GABA 和 Ach）控制著紋狀體中型棘型傳出神經(jīng)元，這些神經(jīng)遞質(zhì)的釋放是受 A2A 受體的調(diào)節(jié)。 8 Ach受體拮抗劑在 PD中僅有輕微的治療作用，主要因為 A2A 受體能刺激 Ach的釋放，因此 A2A 受體拮抗劑通過減少 Ach的影響能對這種疾病起輔助 的治療。 A2A受體刺激紋狀體突觸體釋放 Ach是以蛋白激酶 A 和 C 介導(dǎo)的方式。另一觀點認(rèn)為煙堿型受體拮抗劑的治療作用是對 M1受體介導(dǎo)的促進(jìn)紋狀體 Gpe 神經(jīng)元點燃的抑制以