豆科植物內(nèi)生固氮菌的分離與篩選(參考版)
2025-05-16 16:15本頁(yè)面
【正文】 指導(dǎo)教師簽名 年 月 日 。 儀器設(shè)備：顯微鏡，恒溫培養(yǎng)箱，高壓滅菌鍋，超凈工作臺(tái)，冰箱。 四 、本課題的研究基礎(chǔ)與工作條件 （以下各項(xiàng)均可加頁(yè)） 一， 研究基礎(chǔ) ： 在校期間開設(shè)了 微生物課程，對(duì)微生物的生長(zhǎng)特性、生長(zhǎng)條件等已經(jīng)有了一定的了解，也和導(dǎo)師學(xué)習(xí) 了很多關(guān)于 微生物 的知識(shí) 。 三、本課題 工作進(jìn)度安排 及預(yù)期研究結(jié)果 （以下各項(xiàng)均可加頁(yè)） 一 ： 編號(hào) 工作內(nèi)容 時(shí)間安排 1 資料收集，擬定實(shí)驗(yàn)方案，撰寫開題報(bào)告 2 周 2 以 阿須 貝無(wú)氮培養(yǎng)基為選擇分離條件對(duì)豆科植物內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)行初步篩選，并通過(guò) nif 基因引物擴(kuò)增確定其為具有固氮酶活性的菌株 24 周 3 數(shù)據(jù)整理與統(tǒng)計(jì)分析，論文撰寫 6 周 二 預(yù)期研究結(jié)果 : 篩選出 酶活性較高 的菌落。 （ 4） .實(shí)驗(yàn)所需的儀器設(shè)備生物研發(fā)中心都具備 。 （ 5） 內(nèi)生固氮茵的固氮酶活性測(cè)定 采用 nif 基因引物擴(kuò)增測(cè)定待測(cè)菌株的固氮酶活性。挑取不同形態(tài)的菌落平板劃線純化 ，鏡檢， 斜面保存。 取經(jīng)檢驗(yàn)表面滅菌徹底的 豆科植物 根、葉材料 1g 于無(wú)菌研缽中，加滅菌的 PBS緩沖液研磨，取上清液倍比稀釋， 取 0． 2mL 涂布 CCM 培養(yǎng)基平板。取 A 液 30． 5mI， B 液 18． 5mL 混合， pH 值 7． O。 磷酸緩沖液 (PBS)： A 液： 0． 2mol／ L Na2HPO3 0． 5mL。 7H20 0． 2，CaCl 7H20 0． 2，NaCI 0． 2， CaSO4． 2H20 0． 1， CaC03 5． 0。 ． 溶液 I、Ⅱ分別滅菌，冷卻至 50℃左右混合后再加入生物素 (5 g／ L)和維生素(10 g／ L)各 0． 5mL。 7H20 0． 2g， CaC1
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