20xx年醫(yī)學(xué)專(zhuān)題—cd147在胃癌細(xì)胞sgc7901增殖-wenkub.com
2024-10-31 14:53 本頁(yè)面
【正文】 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染48h后用含0.4μg/ml的G418的完全培養(yǎng)基篩選(shāixuǎn)2周，然后改為半量維持。ir243。,第四十六頁(yè)，共四十九頁(yè)。,第四十五頁(yè)，共四十九頁(yè)。bāo)SGC7901，并獲得了穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株，經(jīng)Realtime PCR、Western Blot檢測(cè)，CD147在mRNA和蛋白水平均被顯著抑制； CD147表達(dá)沉默后SGC7901的增殖能力明顯降低，細(xì)胞的MMP2和MMP9的活性明顯降低，細(xì)胞的體外侵襲能力明顯降低，細(xì)胞對(duì)化療藥物順鉑的敏感性增強(qiáng)。,四、實(shí)驗(yàn)(sh237。參照Sondak等的報(bào)道，順鉑的PPC為3.0 μg/ml。y224。)小室的染成紫色的細(xì)胞（400）,第三十九頁(yè)，共四十九頁(yè)。)成分，含有層粘連蛋白、Ⅳ型膠原等。nɡ jiāo)酶譜結(jié)果,SGC7901/shRNA2細(xì)胞(x236。收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液，用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法可將這兩種明膠酶按分子量大小分開(kāi)，顯示兩條負(fù)染條帶，根據(jù)條帶的面積(mi224。其作用底物(dǐ w249。)能力均顯著降低.而陰性對(duì)照組SGC7901/shRNAcontrol增殖能力無(wú)顯著改變。,抑制率(%)=(對(duì)照組A 值實(shí)驗(yàn)組A 值)／對(duì)照組A 值100%,24h、48h、72h 時(shí)間(sh237。,Lane 1: SGC7901. Lane 2: SGC7901/shRNAcontrol Lane 3: SGC7901/shRNA1 Lane 4: SGC7901/shRNA2,HG代表(d224。,Realtime PCR檢測(cè)(jiǎn c232。n)培養(yǎng)基篩選2周，然后改為半量維持。n)正確。,重組質(zhì)粒測(cè)序鑒定(ji224。)載體的構(gòu)建：,將合成的三對(duì)片段分別用水浴中加熱后退火備用(b232。,設(shè)計(jì)(sh232。,第二十五頁(yè)，共四十九頁(yè)。bǎn)的設(shè)計(jì)示意圖,第二十四頁(yè)，共四十九頁(yè)。,第二十二頁(yè)，共四十九頁(yè)。研究表明(biǎom237。)的變化 ↓ SGC7901細(xì)胞體外侵襲力測(cè)定 ↓ MTT檢測(cè)SGC7901細(xì)胞順鉑敏感性的變化,技術(shù)(j236。,第十九頁(yè)，共四十九頁(yè)。njiū)目標(biāo),第十八頁(yè)，共四十九頁(yè)。u)發(fā)展為胃癌的過(guò)程中，CD147的表達(dá)量是逐漸增加的，并且CD147的表達(dá)與腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及MMPMMP9和VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)。,胃癌(w232。CD147可激活(jī hu243。guǎn)生成 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor ， VEGF）是很多情況下血管生成過(guò)程的主要調(diào)節(jié)因子，包括腫瘤形成過(guò)程 。,CD147在腫瘤發(fā)生發(fā)展(fāzhǎn)中的作用,1. 促進(jìn)腫瘤(zhǒngling zhǒng li)廣泛，參與精子發(fā)生、胚胎發(fā)育、腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移、炎癥反應(yīng)、病毒感染等多種生理和病理過(guò)程，是一個(gè)多功能的分子。只有HG形式能刺激MMP的產(chǎn)生。ng)2個(gè)典型的半球形Ig結(jié)構(gòu)域。,CD147的結(jié)構(gòu)(ji233。 第六屆人類(lèi)白細(xì)胞分化抗原協(xié)作組會(huì)議(hu236。 d224。)細(xì)胞利用MMP的基質(zhì)降解能力遷移到其他部位。,第五頁(yè)，共四十九頁(yè)。,MMP簡(jiǎn)介(jiǎn ji
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