【正文】 還有霉菌，放線菌，原生動物，線蟲，水生植物等。 ? 已查明泥土中和水中廣泛分布的 G為污泥中微生物的主體，已分離的菌膠團(tuán)是活性污泥絮凝物形成菌，此外還有埃希氏菌和假單孢菌。 活性污泥 ? 活性污泥是一種絮狀污泥，能吸附和凝集污水中有機(jī)物質(zhì)和其它物質(zhì)通過構(gòu)成活性污泥中的好氧微生物來進(jìn)行有機(jī)物的氧化和分解。 ? 沼氣發(fā)酵法 ? 即采用厭氧消化器把微生物可降解的有機(jī)物轉(zhuǎn)換成甲烷 、 CO 水和其它氣體的一種處理方法 。 即 20℃ 時 ， 每升廢水在 5日內(nèi)能被微生物降解的有機(jī)物徹底氧化所消耗的氧的量 ， mg/L。 強(qiáng)氧化劑 :KMnO4和 K2Cr2O7。 ? 真菌捕食線蟲和其它原生動物的現(xiàn)象 ? 捕食現(xiàn)象的利用 ——生物防治 第三節(jié) 微生物及環(huán)境保護(hù) ? 環(huán)境污染 ? 指土壤或水體等 生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)、功能受到外來有害因素的影響或破壞失去了平衡，導(dǎo)致物質(zhì)流、能量流無法正常運(yùn)轉(zhuǎn)的現(xiàn)象 ? 微生物對污染物的降解與轉(zhuǎn)化 ? 生物降解 (biodegradation) 是微生物 (也包括其他生物 )對物質(zhì) (特別是環(huán)境污染物 )的分解作用。 A ? +B ? ? A ? B ? ? 對其它生物沒有選擇性 。 前者叫寄生物 ，后者叫寄主或宿主 。 極端環(huán)境下的微生物 ? 嗜極菌 /極端微生物 Extremophiles 依賴于極端環(huán)境才能生長的微生物 ? 極端環(huán)境下微生物的研究意義 ? 獨特的細(xì)胞構(gòu)造 ? 生理、生化和遺傳 ? 種系進(jìn)化 ? 類群 ? 嗜熱微生物 ? 嗜冷微生物 ? 嗜酸微生物 ? 嗜堿微生物 ? 嗜鹽微生物 ? 嗜壓微生物 第二節(jié) 微生物與生物環(huán)境 之間的相互關(guān)系 ? 微生物與任何一種生物之間的關(guān)系： ? 雙方獲益：共生、互利共棲、協(xié)同共棲、互養(yǎng)共棲（ ++） ? 單方獲益，對方受害：寄生、捕食、拮抗（ + – ），（ – +） ? 單方獲益，對方無害：偏利共棲、衛(wèi)星狀共棲、互生（代謝共棲）（ +0） ? 互不相擾：無關(guān)共棲（ 00） ? 一方受害，對方無益無損：偏害共棲（ 0 – ） ? 雙方受損：競爭共棲（ – –） 1. 互生 ? 是指兩種可以單獨生活的生物 ， 當(dāng)它們在一起時 ，通過各自的代謝活動有利于對方 ， 或偏利于一方的一種生活方式 。 ? 空氣中檢出率較高的微生物類群是抵抗力較強(qiáng)、特別是耐干燥和耐紫外線力強(qiáng)的。多數(shù)為革蘭氏陰性菌、多嗜鹽、河口處有耐鹽菌，常見菌種：假單孢菌、弧菌、螺菌、無色桿菌、黃桿菌 水體的自凈作用（ Self Cleaning） ? 水體的自凈作用 通過 稀釋、沉降、吸附等物理作用，以及 生物學(xué)和生物化學(xué)的作用，包括好氧菌對有機(jī)物的 降解 、原生動物對細(xì)菌的 吞噬 、噬菌體對宿主的 裂解 、藻類對無機(jī)元素的 吸收利用 、浮游動物和后生動物通過食物鏈對有機(jī)物的 攝取和濃縮 作用，水體對有機(jī)或無機(jī)污染物的自凈作用 ? 水體自凈作用的實質(zhì) 除去水中天然微生物類群，其余微生物一般只生存一段時間，很快便死亡 ? 飲用水的微生物指標(biāo) ? 細(xì)菌總數(shù) (CFU)≤100個 /ml ? 大腸菌群 ≤ 3 個 /L ? 由水傳播的疾病及其檢驗依據(jù) ? 痢疾、霍亂、傷寒、腸道傳染病 ? 檢驗：直接檢驗法、大腸菌群法 大腸菌群 ?腸道正常細(xì)菌有三類： 大腸菌群 、 腸桿菌和產(chǎn)氣莢膜桿菌 ? 大腸菌群 ：一群以大腸桿菌為主的需氧及兼性厭氧的 G無芽孢桿菌 ， 能在 48h內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣 。如硫細(xì)菌、鐵細(xì)菌、衣細(xì)菌，藍(lán)細(xì)菌、綠硫細(xì)菌、紫細(xì)菌等。 ? 過程 ? 平皿反應(yīng)快速檢出法 ? 粗篩和復(fù)篩兩步 ? 培養(yǎng)條件優(yōu)化 ? 培養(yǎng)基的組成、通風(fēng)量、 pH值、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間等 ? 分析：定量分析 平皿反應(yīng)快速檢出法 ? 1. 紙片培養(yǎng)顯色法 ? 2. 透明圈法 ? 碳酸鈣平板透明圈：產(chǎn)酸量 ? 酪蛋白平板透明圈：蛋白酶 ? 3. 變色圈法 ? 淀粉平板噴稀碘液：透明圈，液化型淀粉酶 ? 支鏈淀粉平板噴稀碘液：藍(lán)色圈，異淀粉酶 ? 支鏈淀粉平板噴稀碘液：無色圈，液化型淀粉酶 ? 加葡聚糖的剛果紅平板：葡聚糖酶 平皿反應(yīng)快速檢出法 ? 4. 生長圈法 ? 適用：氨基酸，核苷酸，維生素產(chǎn)生菌的選育 ? 工具菌： ? 營養(yǎng)缺陷型，不能合成的物質(zhì)為目的菌積累的產(chǎn)物 ? 菌落形態(tài)明顯不同于目的菌 ? 5. 抑菌圈法 ? 適用：抗生素產(chǎn)生菌的選育 ? 工具菌：對目的抗生素敏感的微生物 初篩和復(fù)篩的比較 初篩 復(fù)篩 種子 斜面菌種 液體種子 搖瓶 每株 1瓶 每株 3~5瓶 接種量 每瓶一環(huán) 3~5% 取舍情況 留下產(chǎn)量較高的10~20%的菌株 每次保留 10~20%，直至最后 3~5株 好氧培養(yǎng) ? 五 . 純種分離及篩選 ? 單細(xì)胞 （ 單孢子 ） 分離：獲得細(xì)胞純 ? 小滴分離法 、 顯微操縱器進(jìn)行分離 ? 六 . 生產(chǎn)性能試驗 ? 培養(yǎng)條件優(yōu)化 ， 最終菌株可作為生產(chǎn)菌株或進(jìn)一步育種出發(fā)菌株 ? 七 . 毒性試驗及菌種鑒定 從自然界中分離菌種 ? 舉例 設(shè)計一種從自然界分離中溫型（高溫型）淀粉酶高產(chǎn)菌株的方案，并說明主要步驟的基本原理 ? 從糧食加工廠、飯店附近土壤、陰溝（高溫堆肥）采樣 → 用含淀粉的液體培養(yǎng)基于 37℃（ 50~60℃ ）增殖 → 淀粉平板劃線或涂布 → 依透明圈大小挑選菌株 → 劃線純化 → 液體搖瓶發(fā)酵 → 篩菌株（初篩、復(fù)篩） → 測酶活 → 鑒定菌株 → 獲高產(chǎn)菌株 水中的微生物類群 ? 水中微生物的來源 土著微生物，來自空氣、土壤、污水、垃圾中的微生物 ? 水包括大氣水（雨雪） 、地面水、聚集水（河流、湖泊、水庫）、地下水、海水 ? 這類微生物類群，會由于陽光的照射、河水的流動以及遇到不利的條件，如水中有機(jī)物因消耗而減少，浮游生物及噬菌體的吞噬，迅速死亡。 1. 環(huán)境條件對微生物分布影響 ? 土壤中有機(jī)物的含量（營養(yǎng)環(huán)境） ? 水分 ? 溫度 ? 通風(fēng) ? 酸堿度 ? 植被情況 （ 1）土壤中營養(yǎng)環(huán)境 ? 高糖環(huán)境 （ 加工蜜餞 、 糖果 、 蜂蜜的環(huán)境 ） 土壤 ? 耐滲透壓酵母 ， 檸檬酸產(chǎn)生菌 ， 氨基酸產(chǎn)生菌 ? 富含淀粉環(huán)境污泥 、 水溝旁土壤中 ? 淀粉酶產(chǎn)生菌 ? 森林中腐葉爛草下土壤 ? 纖維素酶產(chǎn)生菌 ? 富含蛋白質(zhì) （ 蠶絲 、 豆餅 、 生皮曬廠 ） 土壤 ? 蛋白酶產(chǎn)生菌 ? 油田土 ? 石油分解菌 (2)環(huán)境條件對分布的影響 ? 水分 ? ① 離地表 515cm土樣 ? ② 含水過多 、 過少都不理想 ? 溫度：采樣以秋季為好 ? 通風(fēng) ? 酸堿度： ? 細(xì)菌 、 放線菌：中性或偏堿； ? 霉菌 、 酵母：偏酸 ? 植被情況 ? 植被的種類對微生物的分布有密切的關(guān)系。 ? 土壤微生物的作用 改變土壤的性質(zhì)；進(jìn)行物質(zhì)轉(zhuǎn)化；提高土壤肥力 菌種篩選和分離的步驟 ? 調(diào)查研究及查