【導(dǎo)讀】1 蚈衿蕆莂羇袈膇薇袃羇艿莀蝿羆莂薆蚅羅膁莈蟻羅芄蚄罿羄莆蕆裊羃蒈螞螁膈蒅蚇羈芀蟻薃肀莂蒃袂聿肂蠆螈聿芄蒂螄肈莇螇蝕肇葿薀罿肆腿莃裊肅芁薈螁膄莃莁蚇膄肅薇薃膃膅荿袁膂莈薅袇膁蒀蒈螃膀膀蚃蠆腿節(jié)蒆羈膈莄蟻襖羋蒆蒄螀芇膆蝕蚆袃羋蒂薂袂蒁蚈羀袁膀薁袆袁芃螆螂袀蒞蕿蚈衿蕆莂羇袈膇薇袃羇艿莀蝿羆莂薆蚅羅膁莈蟻羅芄蚄罿羄莆蕆裊羃蒈螞螁膈蒅蚇羈芀蟻薃肀莂蒃袂聿肂蠆螈聿芄蒂螄肈莇螇蝕肇葿薀罿肆腿莃裊肅芁薈螁膄莃莁蚇膄肅薇薃膃膅荿袁膂莈薅袇膁蒀蒈螃膀膀蚃蠆腿節(jié)蒆羈膈莄蟻襖羋蒆蒄螀芇膆蝕蚆袃羋蒂薂袂蒁蚈羀袁膀薁袆袁芃螆螂袀蒞蕿蚈衿蕆莂羇袈膇薇袃羇艿莀蝿羆莂薆蚅羅膁莈蟻羅芄蚄罿羄莆蕆裊羃蒈螞螁膈蒅蚇羈芀蟻薃肀莂蒃袂聿肂蠆螈聿芄蒂螄肈莇螇蝕肇葿薀罿肆腿莃裊肅芁薈螁膄莃莁蚇膄肅薇薃膃膅荿袁膂莈薅袇膁蒀蒈螃膀膀蚃蠆腿節(jié)蒆羈膈莄蟻襖羋蒆蒄螀芇膆蝕蚆袃羋蒂薂袂蒁蚈羀袁膀薁袆袁芃螆螂袀蒞膆芆蒆肅罿薄蒅螄膅蒀薅袇羈莆薄罿膃

　　

【正文】 一 表示陰性，鏡下未見凝集，紅細(xì)胞均勻分布。 玻片法 1) 取清潔玻片 1 張 (或白瓷板 1塊 )，用蠟筆劃成方格，標(biāo)明抗 A、抗 B，分別用滴管滴加抗 A、抗 B 分型血清 l 滴于標(biāo)明的方格內(nèi)，再各加受檢者 2％紅細(xì)胞懸液 1滴，混和。 2) 另取潔凈玻片一張 (或白瓷板 1塊 )，用蠟筆劃成方格，標(biāo)明 A 細(xì)胞、 B 細(xì)胞和 O 細(xì)胞，用滴管各加受檢者血清 1滴，再分別用滴管滴加 A、 B和 O 型試劑紅細(xì)胞懸液 1滴。 3) 將玻片 (或白瓷板 )不斷輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)，使血清與細(xì)胞充分混勻，連續(xù)約 15min，以肉眼觀察有無凝集 (或溶血 )反應(yīng)。如以玻片作試驗(yàn)時(shí)，也可用低倍鏡觀察結(jié)果。 ABO 血型正反定型結(jié)果 28 新汶礦業(yè)集團(tuán)協(xié)莊礦醫(yī)院驗(yàn)科 血庫(kù)操作規(guī)程和管理制度 文件編號(hào)： XZYJYK 版 序： A/O 生效日期： 2021 年 8 月 20 日 責(zé)任部門：血庫(kù) 科主任 :李貴新 保管者： 規(guī)程編寫者：代立匯等 審批者 :李貴新 批準(zhǔn)日期： 2021 年 8 月 20 日 本規(guī)程每?jī)赡陱?fù)審一次 : 復(fù)審人： 復(fù)審日期： 修改次數(shù) : 修改單號(hào) : 修改人 : 注：十為凝集；一為不凝集。 附注 1)．分型血清質(zhì)量性能符合要求，用畢后應(yīng)放置冰箱保存，以免細(xì)菌污染。 2)．試劑紅細(xì)胞以 3個(gè)健康者同型新鮮紅細(xì)胞混和，用生理鹽水洗滌 1 次，以除卻存在于血清中的抗體及可溶性抗原。 3)．試管、滴管和玻片必須清潔干燥，防止溶血。 4)．操作方法應(yīng)按規(guī)定，一般應(yīng)先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便容易核實(shí)是否漏加血清。 5)．按理 IgM 抗 A和抗 B 與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以 4℃ 為最強(qiáng)，但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍在室溫 (20— 24℃) 內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)， 37℃ 可使反應(yīng)減弱。 6)．離心時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，速度不宜過快或過慢，以防假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。 7)．觀察時(shí)應(yīng)注意紅細(xì)胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。 8)．判斷結(jié)果后應(yīng)仔細(xì)核對(duì)、記錄，避免筆誤。 正反定型結(jié)果不一致的原因 有技術(shù)性問題或紅細(xì)胞和血清本身的問題，常見者有以下幾種： 1) 分型血清效價(jià)太低、親和力不強(qiáng)。如抗 A 血清效價(jià)不高，可將 A 亞 型誤定為 O型，AB 型誤定為 B型。 分型血清 +受檢者紅細(xì)胞 受檢者血型 受檢者血清 +試劑紅細(xì)胞 抗 A 抗 B 抗 A 十 B A 細(xì)胞 B 細(xì)胞 O 細(xì)胞 十 ─ 十 A ─ 十 ─ ─ 十 十 B 十 一 ─ ─ ─ ─ O 十 十 ─ 十 十 十 AB ─ ─ ─ 29 新汶礦業(yè)集團(tuán)協(xié)莊礦醫(yī)院驗(yàn)科 血庫(kù)操作規(guī)程和管理制度 文件編號(hào)： XZYJYK 版 序： A/O 生效日期： 2021 年 8 月 20 日 責(zé)任部門：血庫(kù) 科主任 :李貴新 保管者： 規(guī)程編寫者：代立匯等 審批者 :李貴新 批準(zhǔn)日期： 2021 年 8 月 20 日 本規(guī)程每?jī)赡陱?fù)審一次 : 復(fù)審人： 復(fù)審日期： 修改次數(shù) : 修改單號(hào) : 修改人 : 2) 紅細(xì)胞懸液過濃或過淡，抗原抗體比例不適當(dāng)，使反應(yīng)不明顯，誤判為陰性反應(yīng)。 3) 受檢者紅細(xì)胞上抗原位點(diǎn)過少 (如亞型 )或抗原性減弱 (見于白血病或惡性腫瘤： 以及類 B或 cisAB 等。 4) 受檢者血清中蛋白紊亂 (高球蛋白血癥 )，或?qū)嶒?yàn)時(shí)溫度過高，常引起紅細(xì)胞呈緡錢狀排列。 5) 受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗 A 及或抗 B抗體，如丙種球蛋白缺乏癥。 6) 各種原因引起的紅細(xì)胞溶解，誤判為不凝集。部分溶血時(shí)，可溶性血型物質(zhì)中和了相應(yīng)的抗體 . 7) 由細(xì)菌污染或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。 8) 血清中有意外抗體，如自身抗 I，常引起干擾。 9) 老年人血清中抗體水平大幅度下降正反定型結(jié)果不一致的解決辦法如發(fā)現(xiàn) ABO 正反定型結(jié)果不一致，先要重復(fù)作試 驗(yàn) 1次。嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，使用質(zhì)量合格的試劑以及細(xì)心觀察和解釋試驗(yàn)結(jié)果，就可解決明顯的問題，對(duì)一些疑難問題月必須進(jìn)一步研究。 檢查步驟 1) 另從受檢者采取 l 份新鮮血液標(biāo)本這樣可以糾正因污染或搞錯(cuò)樣本造成的不符合。 2) 將紅細(xì)胞洗滌數(shù)次，配成 5％鹽水細(xì)胞懸液，用抗 A、抗 B、抗 Al，抗 A＋ B 及抗 H做試驗(yàn)可以得到其它有用的信息。 3) 對(duì)受檢紅細(xì)胞作直接抗球蛋白試驗(yàn)，如結(jié)果呈陽(yáng)性，表示紅細(xì)胞已被抗體致敏。 4) 用 A A B、 O 紅細(xì)胞及自身紅細(xì)胞檢查受檢血清。如果懷疑是抗 I，用 O 型 (或 ABO相合的 )臍血紅細(xì)胞檢查。 5)如果試驗(yàn)結(jié)果未見凝集，應(yīng)將細(xì)胞及血清試驗(yàn)至少在室溫和 4℃ 放置 30min，用顯微 鏡檢查核實(shí)。 30 新汶礦業(yè)集團(tuán)協(xié)莊礦醫(yī)院驗(yàn)科 血庫(kù)操作規(guī)程和管理制度 文件編號(hào)： XZYJYK 版 序： A/O 生效日期： 2021 年 8 月 20 日 責(zé)任部門：血庫(kù) 科主任 :李貴新 保管者： 規(guī)程編寫者：代立匯等 審批者 :李貴新 批準(zhǔn)日期： 2021 年 8 月 20 日 本規(guī)程每?jī)赡陱?fù)審一次 : 復(fù)審人： 復(fù)審日期： 修改次數(shù) : 修改單號(hào) : 修改人 : 6) 如疑為 A抗原或 B抗原減弱， 則可將受檢紅細(xì)胞與抗 A 或抗 B血清作吸收及放散試驗(yàn)以及受檢者唾液作 A、 B、 H血型物質(zhì)測(cè)定。后者只對(duì) 80％ HAB 分泌型的人有用 7) 如試驗(yàn)結(jié)果紅細(xì)胞呈絹錢狀排列，加等滲鹽水 l 滴，混和，往往可使絹錢現(xiàn)象消失。應(yīng)注意不應(yīng)先加鹽水 l 滴于受檢者血清中而后和紅細(xì)胞作試驗(yàn)，以免使血清中抗體被稀釋。 8) 如受檢者為 A 型血而疑為有類 B抗原時(shí)，可用下列方法進(jìn)行鑒別： 1 觀察細(xì)胞與抗 A及抗 B 的凝集強(qiáng)度，與抗 A的反應(yīng)要比與抗 B的反應(yīng)強(qiáng)。這種區(qū)別用玻片法作試驗(yàn)更為明顯。 2 用受檢者紅細(xì)胞與自身血清作試驗(yàn)，血清中的抗 B不凝集自身紅細(xì)胞上的類 B 抗原。 3 檢查唾液中是否有 A、 B 物質(zhì)，如果是分泌型，可檢出 A 物質(zhì)而無 B 物質(zhì)。 4 核對(duì)患者的診斷，類 B抗原的形成與結(jié)腸癌、直腸癌、革蘭陰性桿菌感染有關(guān)。 9) 如發(fā)現(xiàn)多凝集現(xiàn)象，應(yīng)考慮由遺傳產(chǎn)生的 Cad 抗原活性；被細(xì)菌酶激活的 T或 TK受體；或產(chǎn)生機(jī)制不太明了的 Tn 受體所引起。多凝集紅細(xì)胞具有以下特點(diǎn)： 1 能被人和許多家兔的血清凝集。 2 能與大多數(shù)成年人的血清凝集，不管有無相應(yīng)的同種抗體。 3 不被臍帶血清凝集。 4 通常不與自身的血清凝集。 Rh 血型鑒定 臨床上，凡帶有 D 抗厡者，稱為 Rh陽(yáng)性，不帶有 D 抗厡者，稱為 Rh 陰性。 31 新汶礦業(yè)集團(tuán)協(xié)莊礦醫(yī)院驗(yàn)科 血庫(kù)操作規(guī)程和管理制度 文件編號(hào)： XZYJYK 版 序： A/O 生效日期： 2021 年 8 月 20 日 責(zé)任部門：血庫(kù) 科主任 :李貴新 保管者： 規(guī)程編寫者：代立匯等 審批者 :李貴新 批準(zhǔn)日期： 2021 年 8 月 20 日 本規(guī)程每?jī)赡陱?fù)審一次 : 復(fù)審人： 復(fù)審日期： 修改次數(shù) : 修改單號(hào) : 修改人 : 試劑 抗 D 血清 (購(gòu)買公司產(chǎn)品 )。 操作 玻片法 :取 5%受檢者紅細(xì) 胞鹽水懸液一滴于玻片上，加抗 D 血清一滴，晃動(dòng)玻片， 15分鐘后觀察有無凝集 (或溶血 )反應(yīng)，同時(shí)做陰陽(yáng)性對(duì)照。凝集 (或溶血 )反應(yīng)為 Rh 陽(yáng)性 , 無凝集 (或溶血 )反應(yīng)，再用不同批號(hào)抗 D 血清做重復(fù)試驗(yàn)，如無凝集 (或溶血 )反應(yīng)，不能輕率地報(bào)告 Rh 陰性，應(yīng)做 Du鑒定。 附注 鑒定送市中心血站。 32 新汶礦業(yè)集團(tuán)協(xié)莊礦醫(yī)院驗(yàn)科 血庫(kù)操作規(guī)程和管理制度 文件編號(hào)： XZYJYK 版 序： A/O 生效日期： 2021 年 8 月 20 日 責(zé)任部門：血庫(kù) 科主任 :李貴新 保管者： 規(guī)程編寫者：代立匯等 審批者 :李貴新 批準(zhǔn)日期： 2021 年 8 月 20 日 本規(guī)程每?jī)赡陱?fù)審一次 : 復(fù)審人： 復(fù)審日期： 修改次數(shù) : 修改單號(hào) : 修改人 : 交叉配血試驗(yàn) 交叉配血試驗(yàn)又稱不配合性試驗(yàn)，是確?；颊甙踩斞夭豢缮俚脑囼?yàn)，完整操作規(guī)程應(yīng)包括： （包括 Rh血型）； ABO 正反定型和 Rh定型； 擇合格的血液作交叉配血試驗(yàn)。 鹽水介質(zhì)配血法 標(biāo)本處理 1) 抽取受血者靜脈血 34ml, ，待凝固后分離血清，并將紅細(xì)胞配成 2%鹽水懸液。 2) 將供血者血樣以同樣方法分離血 清，并將紅細(xì)胞配成 2%鹽水懸液。 操作 1)取潔凈小試管兩支， 1 支標(biāo)明受血者血清＋供血者血球；另支標(biāo)明供血者血清＋受血者血球。 2)按標(biāo)記主側(cè)管加受血者血清 1滴，加供血者紅細(xì)胞懸液 1滴。次側(cè)管加供血者血清 1滴，加受血者紅細(xì)胞懸液 1滴?；靹?，以 1000r/min 離心 1min，輕輕側(cè)動(dòng)試管，觀察結(jié)果。室溫較低時(shí)，應(yīng)將試管保溫，以防冷凝集素引起的凝集反映。 結(jié)果判斷及報(bào)告 1) ABO 同型配血 ,主側(cè)和次側(cè)均無溶血及凝集表示無輸血禁忌，可以輸血。 2) 兩人值班時(shí)，交叉配血試驗(yàn)由兩互相核對(duì)；一人值班時(shí) ，操作完畢后自已復(fù)核，并填寫配血試驗(yàn)結(jié)果。 附注 受血者配血試驗(yàn)的血