血小板功能檢測(cè)-資料下載頁
2024-11-19 04:10本頁面
【正文】 常情況下，誘導(dǎo)劑可將花生四烯酸從血小板的磷脂層中動(dòng)員出來，并通過血小板轉(zhuǎn)變?yōu)檠ㄍ锽2。血栓烷B2是一種穩(wěn)定的復(fù)合物，可通過商用的放射性免疫測(cè)定法和酶免法來測(cè)定。 流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù)可快速檢測(cè)抗凝血、稀釋全血、PRP、人工介質(zhì)中懸浮的少量血小板。使用全血可以避免操作過程中血小板被激活。通常血小板與聯(lián)接不同光譜的熒光素的兩種單克隆抗體（MoAbs）反應(yīng)。為確定血小板的特異性，第一個(gè)MoAb特異性針對(duì)GPIb,IIb或IIIa，并在近飽和溶液中使用。為確定血小板上的抗原決定簇，血小板還與另一標(biāo)記MoAb反應(yīng)。這種MoAb特異性針對(duì)表位，也在飽和溶液中使用。與抗體孵育后，稀釋樣本以1000100，000細(xì)胞/min的速度在流式細(xì)胞儀上檢測(cè)。聚焦激光束在其相應(yīng)的吸收光譜內(nèi)激發(fā)了聯(lián)接的熒光。血小板通過標(biāo)識(shí)的熒光素以及前向角和側(cè)向角的特性進(jìn)行確認(rèn)。第二個(gè)單抗發(fā)出的熒光強(qiáng)弱與某一抗原決定簇的密度成正比，并可通過獲取上千個(gè)血小板來計(jì)數(shù)。這些數(shù)據(jù)均可用軟件來分析。因?yàn)榧ぐl(fā)光譜有部分被重疊，每一混合熒光需設(shè)置補(bǔ)償。如果抗原決定簇的表達(dá)隨著時(shí)間而變化（如膜GPs的滑動(dòng)），著色前血小板可先用1％的多聚甲醛固定，它不干擾抗體結(jié)合。如果不是立即進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)，血小板也可在加入著色劑后再固定（原理同上）。許多熒光素標(biāo)記的抗體及非抗體源的探針均可標(biāo)記血小板抗原決定簇。MoAbs除可以和未被活化血小板的GPs結(jié)合外，某些激活依賴MoAbs可檢測(cè)GPs構(gòu)象變化（如PAC1可檢測(cè)GPIIb/IIIa）或顆粒膜蛋白表達(dá)（如抗P－選擇素）。非抗體探針包括PKH親脂性膜染料，可用鏈親和素標(biāo)記熒光檢測(cè)的生物素和用于檢測(cè)血小板活化促凝表面的暴露情況的熒光標(biāo)記的annexin V。流式細(xì)胞儀可有效評(píng)估離體血小板活化程度及評(píng)價(jià)體外使用致聚劑后血小板的敏感性。它用來檢測(cè)某些病程中血小板的活化情況，如不穩(wěn)定心絞痛，急性心肌梗死，頑固冠心病，初期子癇，外周血管病，腦血管缺血和冠狀動(dòng)脈血管成形術(shù)。流式細(xì)胞儀還被用來監(jiān)測(cè)血庫提供的濃縮血小板的質(zhì)量，因?yàn)楸４嫫趦?nèi)血小板會(huì)有所變化。遺傳性血小板膜GP缺陷如Glanzmann血小板機(jī)能不全和BernardSoulier綜合癥也可通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)。雖然流式細(xì)胞儀檢測(cè)需要復(fù)雜的設(shè)備和試劑，但它有不少優(yōu)點(diǎn)：只需微量的樣本（5μl），可檢測(cè)血小板減少的樣本、全血和血小板亞群。 血小板促凝表面的表達(dá)活化血小板表面的PS可使用熒光標(biāo)記的annexin V通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)（見上），也可選擇發(fā)色凝血酶原酶實(shí)驗(yàn)測(cè)定促凝表面凝血酶的產(chǎn)生情況。3 總結(jié)血小板在血管嚴(yán)重?fù)p傷時(shí)止血栓的形成，血管損傷處及動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂處凝塊的形成中起重要作用。血小板功能檢測(cè)的主要目的在于確定止血受損時(shí)異常出血的原因。同時(shí)它也被用來監(jiān)測(cè)血小板高活性狀態(tài)，以及估計(jì)血栓形成傾向的可能性。進(jìn)行血小板功能檢測(cè)，抽血及處理時(shí)應(yīng)非常仔細(xì)，并使用合適的抗凝劑。最常見的血小板功能檢測(cè)方法是測(cè)定PRP中加入ADP、膠原蛋白，腎上腺素，花生四烯酸等致聚劑后血小板的聚集功能；對(duì)特定致聚劑的聚集反應(yīng)有缺陷表明特定途徑中血小板活性受損。阻抗聚集儀檢測(cè)全血中的聚集功能不需要處理血液。目前有多種快速，自動(dòng)和只需少量樣本的檢測(cè)方法：PFA100，能提供在高切變力作用下血小板及其相關(guān)的止血功能；RPFA用來評(píng)估使用GPIIb/IIIa拮抗劑的治療效果；CPA利用錐板粘度計(jì)在高切變力下測(cè)定血小板的粘附和聚集功能。除檢測(cè)血小板的聚集功能外，還可檢測(cè)血小板的釋放功能，包括顆粒內(nèi)容物的分泌，凝血烷的形成和促凝表面的表達(dá)等。流式細(xì)胞儀采用熒光標(biāo)記的抗體和非抗體源探針檢測(cè)血小板的活性或體內(nèi)血小板的激活狀態(tài)。雖然需要復(fù)雜的儀器，但它的優(yōu)點(diǎn)在于使用微量的樣本和檢測(cè)血小板亞群。 參考文獻(xiàn)（略）內(nèi)容總結(jié)（1）血小板功能檢測(cè)
：血小板在止血和動(dòng)脈血栓形成中的作用包括粘附到受損血管處或破裂的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊處，形成止血栓或凝塊（2）非常罕見
貯存池疾病包括血小板分泌缺陷
初級(jí)分泌缺陷（3） 瑞托霉素聚集血小板
這一試驗(yàn)同樣用聚集儀對(duì)枸櫞酸抗凝的PRP進(jìn)行測(cè)試（4） 流式細(xì)胞術(shù)
流式細(xì)胞術(shù)可快速檢測(cè)抗凝血、稀釋全血、PRP、人工介質(zhì)中懸浮的少量血小板
醫(yī)療健康相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1