【正文】 感染性心內(nèi)膜炎相關(guān)菌血癥，均為持續(xù)性菌血癥。對(duì)感染性心內(nèi)膜炎患者進(jìn)行血培養(yǎng)規(guī)范操作建議包括以下幾點(diǎn)： 采集血培養(yǎng)時(shí)機(jī)及數(shù)量 急性心內(nèi)膜炎：應(yīng)立即采集血培養(yǎng)以避免延誤治療。建議在經(jīng)驗(yàn)用藥前30min內(nèi)做2～3套血培養(yǎng)。 亞急性心內(nèi)膜炎：建議每隔30min至1h采集1套血培養(yǎng)，進(jìn)行3套血培養(yǎng)。如果24h內(nèi)3套均為陰性，建議加做1套血培養(yǎng)。 皮膚消毒 對(duì)于可疑感染性心內(nèi)膜炎患者，皮膚的徹底消毒尤為重要。對(duì)于亞急性心內(nèi)膜炎并伴有瓣膜贅生物的患者，主要病原菌為皮膚寄生菌群，如凝固酶陰性葡萄球菌。建議：充分消毒皮膚后，從不同的外周靜脈穿刺點(diǎn)采血，不要從留置導(dǎo)管處做血培養(yǎng)。 假陰性引起感染性心內(nèi)膜炎血培養(yǎng)陰性最常見的原因是患者在采血時(shí)使用了抗菌藥物，為了消除藥物的抑制作用，建議使用中和抗菌藥物的血培養(yǎng)瓶。另一個(gè)原因是營養(yǎng)變異鏈球菌，如毗鄰顆粒鏈菌、乏氧菌其生長需要維生素B6或半胱氨酸。如果血培養(yǎng)陽性肉湯涂片可見成鏈的革蘭陽性球菌，但在胰大豆基礎(chǔ)血平板上不生長，則提示可能為營養(yǎng)變異鏈球菌。 孵育時(shí)間目前使用高質(zhì)量的血培養(yǎng)系統(tǒng)，HACEK菌群均可在5d內(nèi)培養(yǎng)陽性。建議：如果所有的培養(yǎng)瓶在5d內(nèi)培養(yǎng)均為陰性，而臨床診斷仍然懷疑感染性心內(nèi)膜炎，則應(yīng)該將所有的培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)種至不含抗菌藥物的巧克力平皿，5%CO2培養(yǎng)。真菌性感染性心內(nèi)膜炎可以由酵母菌和絲狀真菌引起，推薦使用專用的真菌培養(yǎng)瓶。14 血培養(yǎng)不常見病原體的特殊處理流程非苛養(yǎng)菌陽性的血培養(yǎng)多數(shù)在孵育24～36h陽性，而苛養(yǎng)菌引起的菌血癥一般需要5d以上顯示陽性。有些微生物更適合用免疫學(xué)或分子技術(shù)檢測，例如軍團(tuán)菌、巴爾通體和支原體。有些微生物常規(guī)不能培養(yǎng)出來，如考克斯體、立克次體和衣原體等。血培養(yǎng)陽性但涂片革蘭染色不能發(fā)現(xiàn)細(xì)菌，常常是由于形態(tài)不典型或太?。ㄈ鐮I養(yǎng)缺陷細(xì)菌形態(tài)不典型，弗朗西斯菌的菌體很?。гw不能用革蘭染色識(shí)別，吖啶橙染色可以發(fā)現(xiàn)這些細(xì)菌。營養(yǎng)缺陷細(xì)菌和顆粒鏈菌：自動(dòng)化血培養(yǎng)系統(tǒng)孵育2d可以檢出。次代培養(yǎng)時(shí)，要求培養(yǎng)基中補(bǔ)充吡哆醛或半胱氨酸，或者同時(shí)接種葡萄球菌使得苛養(yǎng)菌可在葡萄球菌周圍呈衛(wèi)星狀生長，或采用營養(yǎng)豐富的巧克力培養(yǎng)基和厭氧血瓊脂。在大豆胰蛋白胨瓊脂平板上不生長。巴爾通體：可以通過血培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，但是陽性率低。巴爾通體菌血癥具有持續(xù)性和復(fù)發(fā)性，血清學(xué)診斷價(jià)值較高。PCR可以直接檢測標(biāo)本中的巴爾通體，包括心內(nèi)膜炎患者。如果做血培養(yǎng)，需要溶解—離心系統(tǒng)，同時(shí)選用新鮮制備的營養(yǎng)豐富的血平板或巧克力平板。35℃，潮濕、8～10%CO2，孵育14～21d。或用含溶血素的肉湯培養(yǎng)系統(tǒng)，然后轉(zhuǎn)種至固體培養(yǎng)基孵育7d。布魯菌：大多數(shù)布魯菌需氧瓶在3d內(nèi)可以檢出，很少超過7d。彎曲菌：自動(dòng)化血培養(yǎng)系統(tǒng)孵育2～3d可以檢出。居尼彎曲菌在35～36℃時(shí)比42℃生長緩慢，所以次代培養(yǎng)第二天可能陰性。微需氧孵育48h后可看到微笑菌落。弗朗西斯菌：土拉熱弗蘭西斯菌可以在標(biāo)準(zhǔn)血培養(yǎng)瓶中生長。該菌細(xì)菌多數(shù)需要半胱氨酸添加劑。不同菌株生長速度不同，快生長的菌株一般是非苛養(yǎng)菌，而其它菌株可能需要孵育10d以上。由于其菌體微小，形態(tài)多樣，革蘭染色時(shí)很容易與其它物質(zhì)混淆。土拉熱弗蘭西斯菌的初代培養(yǎng)可以在標(biāo)準(zhǔn)羊血瓊脂生長，次代培養(yǎng)不生長。有些菌株可能一開始就僅在巧克力瓊脂平板上生長。HACEK菌群：除了引起心內(nèi)膜炎外，還可以引起各種其它感染，可能同時(shí)伴發(fā)菌血癥。多數(shù)血培養(yǎng)可以在第一周內(nèi)陽性報(bào)警。如果高度懷疑心內(nèi)膜炎是由于HACEK細(xì)菌引起的，而5d后血培養(yǎng)仍為陰性，需要延長培養(yǎng)時(shí)間或盲傳。螺桿菌：免疫缺陷患者易感，同性戀螺桿菌時(shí)最常見致病菌。需要孵育5～7d，并且在培養(yǎng)結(jié)束后，盲傳至血平板，微需氧孵育。軍團(tuán)菌：菌血癥不常見，可以發(fā)生在腎移植術(shù)后，可能引起人工瓣膜心內(nèi)膜炎。采用活性炭酵母浸膏培養(yǎng)基（BCYE），在溶解—離心系統(tǒng)培養(yǎng)孵育5d后，可以傳于BYCE培養(yǎng)基。鉤端螺旋體：不太可能從血培養(yǎng)中分離。選擇其它診斷方法。支原體：目前的血培養(yǎng)系統(tǒng)不能培養(yǎng)出支原體。人型支原體偶爾可以從常規(guī)血培養(yǎng)中分離出來，添加補(bǔ)充成分，采用pH=，可用于肺炎支原體和人型支原體培養(yǎng)。15 血培養(yǎng)污染即便進(jìn)行嚴(yán)格的皮膚消毒以及在接種、傳代中嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，仍有3%～5%的血培養(yǎng)結(jié)果來自皮膚（如表皮葡萄球菌、痤瘡丙酸桿菌、梭菌、類白喉棒狀桿菌）或周圍環(huán)境（如不動(dòng)桿菌屬、芽胞桿菌屬）的污染菌株。然而，這些微生物有時(shí)也會(huì)成為致病菌甚至可導(dǎo)致心內(nèi)膜炎。在下列情況可能是致病菌：1） 不同部位血液標(biāo)本的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)出同一微生物；2） 生長迅速、48h內(nèi)；3） 多次分離出具有同樣生物學(xué)特性和相同藥敏結(jié)果的菌株； 所有的結(jié)果都應(yīng)向臨床醫(yī)生報(bào)告，包括可能的污染菌，但不做藥敏試驗(yàn)，在報(bào)告單上應(yīng)有恰當(dāng)?shù)奶崾?，如痤瘡丙酸桿菌（皮膚共生菌）。血培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)兩種或兩種以上細(xì)菌生長，可能是復(fù)數(shù)菌菌血癥，常見于衰弱的患者，也可能是污染所致。發(fā)生厭氧菌菌血癥時(shí)可能多種病原菌感染，如腸道的嚴(yán)重創(chuàng)傷或手術(shù)，可發(fā)生嚴(yán)重的爆發(fā)性菌血癥，此時(shí)可有一種或多種厭氧菌與一種或多種需氧菌在血液中同時(shí)存在。16 菌株保存血培養(yǎng)陽性菌株應(yīng)保存，以備復(fù)核或進(jìn)一步檢測。內(nèi)容總結(jié)
（1）臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作標(biāo)準(zhǔn)
1 范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了血培養(yǎng)標(biāo)本臨床微生物檢驗(yàn)的技術(shù)要求
（2）如果72h后陽性，應(yīng)按血培養(yǎng)陽性報(bào)告程序處理，與臨床溝通并補(bǔ)發(fā)陽性報(bào)告
（3）（如果導(dǎo)管血陽性報(bào)警時(shí)間比外周血陽性報(bào)警時(shí)間早＜120min，2套血培養(yǎng)獲得鑒定與藥敏譜相同的分離株，仍有可能為CRBSI）
（4）如果1套以上血培養(yǎng)陽性且導(dǎo)管片段培養(yǎng)陰性，若血培養(yǎng)陽性株為金黃色葡萄球菌或念珠菌，則有可能為CRBSI
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