【正文】 感染性心內膜炎相關菌血癥，均為持續(xù)性菌血癥。對感染性心內膜炎患者進行血培養(yǎng)規(guī)范操作建議包括以下幾點： 采集血培養(yǎng)時機及數(shù)量 急性心內膜炎：應立即采集血培養(yǎng)以避免延誤治療。建議在經驗用藥前30min內做2～3套血培養(yǎng)。 亞急性心內膜炎：建議每隔30min至1h采集1套血培養(yǎng)，進行3套血培養(yǎng)。如果24h內3套均為陰性，建議加做1套血培養(yǎng)。 皮膚消毒 對于可疑感染性心內膜炎患者，皮膚的徹底消毒尤為重要。對于亞急性心內膜炎并伴有瓣膜贅生物的患者，主要病原菌為皮膚寄生菌群，如凝固酶陰性葡萄球菌。建議：充分消毒皮膚后，從不同的外周靜脈穿刺點采血，不要從留置導管處做血培養(yǎng)。 假陰性引起感染性心內膜炎血培養(yǎng)陰性最常見的原因是患者在采血時使用了抗菌藥物，為了消除藥物的抑制作用，建議使用中和抗菌藥物的血培養(yǎng)瓶。另一個原因是營養(yǎng)變異鏈球菌，如毗鄰顆粒鏈菌、乏氧菌其生長需要維生素B6或半胱氨酸。如果血培養(yǎng)陽性肉湯涂片可見成鏈的革蘭陽性球菌，但在胰大豆基礎血平板上不生長，則提示可能為營養(yǎng)變異鏈球菌。 孵育時間目前使用高質量的血培養(yǎng)系統(tǒng)，HACEK菌群均可在5d內培養(yǎng)陽性。建議：如果所有的培養(yǎng)瓶在5d內培養(yǎng)均為陰性，而臨床診斷仍然懷疑感染性心內膜炎，則應該將所有的培養(yǎng)瓶轉種至不含抗菌藥物的巧克力平皿，5%CO2培養(yǎng)。真菌性感染性心內膜炎可以由酵母菌和絲狀真菌引起，推薦使用專用的真菌培養(yǎng)瓶。14 血培養(yǎng)不常見病原體的特殊處理流程非苛養(yǎng)菌陽性的血培養(yǎng)多數(shù)在孵育24～36h陽性，而苛養(yǎng)菌引起的菌血癥一般需要5d以上顯示陽性。有些微生物更適合用免疫學或分子技術檢測，例如軍團菌、巴爾通體和支原體。有些微生物常規(guī)不能培養(yǎng)出來，如考克斯體、立克次體和衣原體等。血培養(yǎng)陽性但涂片革蘭染色不能發(fā)現(xiàn)細菌，常常是由于形態(tài)不典型或太?。ㄈ鐮I養(yǎng)缺陷細菌形態(tài)不典型，弗朗西斯菌的菌體很?。?，支原體不能用革蘭染色識別，吖啶橙染色可以發(fā)現(xiàn)這些細菌。營養(yǎng)缺陷細菌和顆粒鏈菌：自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)孵育2d可以檢出。次代培養(yǎng)時，要求培養(yǎng)基中補充吡哆醛或半胱氨酸，或者同時接種葡萄球菌使得苛養(yǎng)菌可在葡萄球菌周圍呈衛(wèi)星狀生長，或采用營養(yǎng)豐富的巧克力培養(yǎng)基和厭氧血瓊脂。在大豆胰蛋白胨瓊脂平板上不生長。巴爾通體：可以通過血培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，但是陽性率低。巴爾通體菌血癥具有持續(xù)性和復發(fā)性，血清學診斷價值較高。PCR可以直接檢測標本中的巴爾通體，包括心內膜炎患者。如果做血培養(yǎng)，需要溶解—離心系統(tǒng)，同時選用新鮮制備的營養(yǎng)豐富的血平板或巧克力平板。35℃，潮濕、8～10%CO2，孵育14～21d?；蛴煤苎氐娜鉁囵B(yǎng)系統(tǒng)，然后轉種至固體培養(yǎng)基孵育7d。布魯菌：大多數(shù)布魯菌需氧瓶在3d內可以檢出，很少超過7d。彎曲菌：自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)孵育2～3d可以檢出。居尼彎曲菌在35～36℃時比42℃生長緩慢，所以次代培養(yǎng)第二天可能陰性。微需氧孵育48h后可看到微笑菌落。弗朗西斯菌：土拉熱弗蘭西斯菌可以在標準血培養(yǎng)瓶中生長。該菌細菌多數(shù)需要半胱氨酸添加劑。不同菌株生長速度不同，快生長的菌株一般是非苛養(yǎng)菌，而其它菌株可能需要孵育10d以上。由于其菌體微小，形態(tài)多樣，革蘭染色時很容易與其它物質混淆。土拉熱弗蘭西斯菌的初代培養(yǎng)可以在標準羊血瓊脂生長，次代培養(yǎng)不生長。有些菌株可能一開始就僅在巧克力瓊脂平板上生長。HACEK菌群：除了引起心內膜炎外，還可以引起各種其它感染，可能同時伴發(fā)菌血癥。多數(shù)血培養(yǎng)可以在第一周內陽性報警。如果高度懷疑心內膜炎是由于HACEK細菌引起的，而5d后血培養(yǎng)仍為陰性，需要延長培養(yǎng)時間或盲傳。螺桿菌：免疫缺陷患者易感，同性戀螺桿菌時最常見致病菌。需要孵育5～7d，并且在培養(yǎng)結束后，盲傳至血平板，微需氧孵育。軍團菌：菌血癥不常見，可以發(fā)生在腎移植術后，可能引起人工瓣膜心內膜炎。采用活性炭酵母浸膏培養(yǎng)基（BCYE），在溶解—離心系統(tǒng)培養(yǎng)孵育5d后，可以傳于BYCE培養(yǎng)基。鉤端螺旋體：不太可能從血培養(yǎng)中分離。選擇其它診斷方法。支原體：目前的血培養(yǎng)系統(tǒng)不能培養(yǎng)出支原體。人型支原體偶爾可以從常規(guī)血培養(yǎng)中分離出來，添加補充成分，采用pH=，可用于肺炎支原體和人型支原體培養(yǎng)。15 血培養(yǎng)污染即便進行嚴格的皮膚消毒以及在接種、傳代中嚴格遵守無菌操作，仍有3%～5%的血培養(yǎng)結果來自皮膚（如表皮葡萄球菌、痤瘡丙酸桿菌、梭菌、類白喉棒狀桿菌）或周圍環(huán)境（如不動桿菌屬、芽胞桿菌屬）的污染菌株。然而，這些微生物有時也會成為致病菌甚至可導致心內膜炎。在下列情況可能是致病菌：1） 不同部位血液標本的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)出同一微生物；2） 生長迅速、48h內；3） 多次分離出具有同樣生物學特性和相同藥敏結果的菌株； 所有的結果都應向臨床醫(yī)生報告，包括可能的污染菌，但不做藥敏試驗，在報告單上應有恰當?shù)奶崾?，如痤瘡丙酸桿菌（皮膚共生菌）。血培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)兩種或兩種以上細菌生長，可能是復數(shù)菌菌血癥，常見于衰弱的患者，也可能是污染所致。發(fā)生厭氧菌菌血癥時可能多種病原菌感染，如腸道的嚴重創(chuàng)傷或手術，可發(fā)生嚴重的爆發(fā)性菌血癥，此時可有一種或多種厭氧菌與一種或多種需氧菌在血液中同時存在。16 菌株保存血培養(yǎng)陽性菌株應保存，以備復核或進一步檢測。內容總結
（1）臨床微生物實驗室血培養(yǎng)操作標準
1 范圍
本標準規(guī)定了血培養(yǎng)標本臨床微生物檢驗的技術要求
（2）如果72h后陽性，應按血培養(yǎng)陽性報告程序處理，與臨床溝通并補發(fā)陽性報告
（3）（如果導管血陽性報警時間比外周血陽性報警時間早＜120min，2套血培養(yǎng)獲得鑒定與藥敏譜相同的分離株，仍有可能為CRBSI）
（4）如果1套以上血培養(yǎng)陽性且導管片段培養(yǎng)陰性，若血培養(yǎng)陽性株為金黃色葡萄球菌或念珠菌，則有可能為CRBSI
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