【正文】 支原體：目前的血培養(yǎng)系統(tǒng)不能培養(yǎng)出支原體。微需氧孵育48h后可看到微笑菌落。14 血培養(yǎng)不常見病原體的特殊處理流程非苛養(yǎng)菌陽性的血培養(yǎng)多數(shù)在孵育24～36h陽性，而苛養(yǎng)菌引起的菌血癥一般需要5d以上顯示陽性。如果血培養(yǎng)陰性，導(dǎo)管片段培養(yǎng)陽性，提示定植，不是CRBSI。 對于非隧道式和隧道式中心靜脈導(dǎo)管及靜脈輸液港（VAP）的建議至少采集1套靜脈外周血培養(yǎng)，同時應(yīng)盡快采集等量的1套導(dǎo)管血培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對以上項(xiàng)目制訂SOP。 血培養(yǎng)申請：申請單位應(yīng)明確標(biāo)識患者基本信息、申請醫(yī)師信息、標(biāo)本類型、申請項(xiàng)目、臨床診斷、采血時間，并盡可能提供其它治療相關(guān)信息，如抗菌藥物。疑為高致病性病原體如結(jié)核分枝桿菌、布魯菌屬、弗朗西斯菌屬、鼠疫耶爾森菌、類鼻祖博克霍爾德菌陽性的血培養(yǎng)瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng)時，處理操作需按生物安全Ⅲ級防護(hù)進(jìn)行?？赡馨l(fā)生溢灑噴濺的操作，必須在生物安全柜中進(jìn)行。離開實(shí)驗(yàn)室或去實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的清潔區(qū)時要脫去隔離服。 方法—自動化檢測法 自動化系統(tǒng)的培養(yǎng)基中添加了各種生長因子和抑制雜菌生長的抗菌藥物。雙相培養(yǎng)瓶在孵育的最初24h內(nèi)，應(yīng)輕輕搖動。 孵育時間：35～37℃孵育5d，包括布魯菌屬、嗜血桿菌屬、放線菌屬、心桿菌屬、?？暇鷮?、金氏桿菌屬和營養(yǎng)變異性鏈球菌（乏氧菌屬和顆粒鏈球菌屬）也可檢測出來。當(dāng)有陽性信號時進(jìn)行處理（詳見9：血培養(yǎng)陽性結(jié)果處理和報告程序）。5 血培養(yǎng)瓶運(yùn)送血培養(yǎng)瓶應(yīng)盡快送至實(shí)驗(yàn)室孵育或上機(jī)，如果運(yùn)送延遲，應(yīng)在血液接種后盡快35~37℃孵育，切勿冷藏或冷凍。 采血時間及套數(shù) 采血時間 推薦在寒戰(zhàn)或高熱高峰前后采集，用抗菌藥物之前采集。菌血癥是臨床急癥，應(yīng)盡快采集血液進(jìn)行培養(yǎng)。 用注射器無菌穿刺取血后，勿換針頭（如果行第二次穿刺，換針頭），直接注入血培養(yǎng)瓶，不可將抗凝血注入商品化培養(yǎng)瓶。有些手動系統(tǒng)，培養(yǎng)瓶必須用針制造一個需氧的氣體環(huán)境。 檢測的頻率和轉(zhuǎn)種：手工法需每天或更頻繁的觀察微生物肉眼可見的生長，應(yīng)特別注意孵育48h內(nèi)的生長跡象。 方法—手工檢測法真菌血癥檢測的手工培養(yǎng)瓶包括：1）營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)瓶，2）雙相培養(yǎng)瓶，3）溶血離心培養(yǎng)瓶。全血不能直接接種于不含溶血素的固體培養(yǎng)基或肉湯。在沒有安全柜的情況下，血培養(yǎng)操作和檢驗(yàn)時需要穿防水、長袖、前面封閉的隔離服。相關(guān)的安全防護(hù)措施包括以下內(nèi)容：l 盡可能減少注射器及銳器的使用l 必須使用注射器時，應(yīng)避免回套針帽l 若用注射器采集血液，將血液直接注入血培養(yǎng)瓶，無需更換針頭。 血培養(yǎng)相關(guān)特殊注意事項(xiàng) 標(biāo)本的采集檢查血培養(yǎng)瓶在使用前是否完好無損、是否過期。如果72h后陽性，應(yīng)按血培養(yǎng)陽性報告程序處理，與臨床溝通并補(bǔ)發(fā)陽性報告。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對每個項(xiàng)目的質(zhì)量控制，制訂詳細(xì)的SOP。如果1套或1套以上血培養(yǎng)陽性，并且導(dǎo)管片段培養(yǎng)陰性，無法判斷；但是如果血培養(yǎng)分離株為金黃色葡萄球菌或白色念珠菌，并且沒有其它明確的感染源，仍然提示為CRBSI。 對于決定拔出可疑導(dǎo)管的患者，血培養(yǎng)結(jié)果解釋如下：如果1套以上血培養(yǎng)和導(dǎo)管片段培養(yǎng)陽性，并且菌種鑒定與藥敏譜相同，則可能為CRBSI。 孵育時間目前使用高質(zhì)量的血培養(yǎng)系統(tǒng)，HACEK菌群均可在5d內(nèi)培養(yǎng)陽性。布魯菌：大多數(shù)布魯菌需氧瓶在3d內(nèi)可以檢出，很少超過7d。采用活性炭酵母浸膏培養(yǎng)基（BCYE），在溶解—離心系統(tǒng)培養(yǎng)孵育5d后，可以傳于BYCE培養(yǎng)基。然而，這些微生物有時也會成為致病菌甚至可導(dǎo)致心內(nèi)膜炎。不同菌株生長速度不同，快生長的菌株一般是非苛養(yǎng)菌，而其它菌株可能需要孵育10d以上。血培養(yǎng)陽性但涂片革蘭染色不能發(fā)現(xiàn)細(xì)菌，常常是由于形態(tài)不典型或太小（如營養(yǎng)缺陷細(xì)菌形態(tài)不典型，弗朗西斯菌的菌體很?。?，支原體不能用革蘭染色識別，吖啶橙染色可以發(fā)現(xiàn)這些細(xì)菌。對感染性心內(nèi)膜炎患者進(jìn)行血培養(yǎng)規(guī)范操作建議包括以下幾點(diǎn)： 采集血培養(yǎng)時機(jī)及數(shù)量 急性心內(nèi)膜炎：應(yīng)立即采集血培養(yǎng)以避免延誤治療。（如果導(dǎo)管血陽性報警時間比外周血陽性報警時間早＜120min，2套血培養(yǎng)獲得鑒定與藥敏譜相同的分離株，仍有可能為CRBSI）。兒童的皮膚消毒：2個月以下的患兒使用70%異丙醇。進(jìn)行血培養(yǎng)時推薦單獨(dú)采血，如果與其它檢測項(xiàng)目同時采血，應(yīng)首先接種血培養(yǎng)瓶，以避免污染。陽性結(jié)果要及時報告臨床醫(yī)師，并采取三級報告形式。轉(zhuǎn)子或離心桶及離心的樣本應(yīng)在生物安全柜中打開，因樣本中可能含有經(jīng)空氣傳播的病原體。運(yùn)送標(biāo)本的人員必須經(jīng)過培訓(xùn)，運(yùn)送容器必須能夠防止感染性物質(zhì)溢灑和血培養(yǎng)瓶破損。8 血培養(yǎng)安全防護(hù) 對所有標(biāo)本操作都應(yīng)采取生物安全防護(hù)措施，血培養(yǎng)中的病原菌可能通過呼吸道或直接接觸污染實(shí)驗(yàn)室工作人員的皮膚、眼或者粘膜引起感染。 分枝桿菌血培養(yǎng) 危險人群 分枝桿菌血癥易發(fā)生在免疫抑制患者中，如AIDS、白血病、多發(fā)性骨髓瘤和其它惡性腫瘤、接受高劑量類固醇激素或細(xì)胞毒性化療和長期的血管置管的患者。對于已使用抗菌藥物治療的患者，建議采用含樹脂等中和物質(zhì)的培養(yǎng)瓶，可提高細(xì)菌的檢出率、縮短檢出時間。苛氧菌培養(yǎng)需添加溶血素、維生素k1，L型半胱氨酸。 血培養(yǎng)瓶一般不予拒收，如發(fā)現(xiàn)以下情況：血培養(yǎng)瓶標(biāo)識錯誤或沒有標(biāo)識，破碎，損壞，滲漏，凝血等情況，應(yīng)及時與臨床聯(lián)系。對于新生兒，采集一瓶兒童需氧瓶，建議同時做尿液和腦脊液培養(yǎng)。3 導(dǎo)言 人體血液中有很多物質(zhì)，包括溶菌酶、白細(xì)胞、免疫球蛋白、補(bǔ)體等，可在幾分鐘內(nèi)將入侵血流的微生物清除。靜脈穿刺點(diǎn)選定后，去除血培養(yǎng)的朔料瓶帽，切勿打開金屬封口環(huán)和膠塞，使用70％異丙醇或75％乙醇消毒，自然干燥60s；