20xx年醫(yī)學(xué)專題—bca蛋白濃度測定-酶標(biāo)儀法-資料下載頁
2024-11-17 22:17本頁面
【正文】 定時(shí)顏色會隨著時(shí)間的延長不斷加深，且顯色反響的速度和溫度有關(guān)，所以除非精確控制顯色反響的時(shí)間和溫度，否那么每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。②如果濃度較低，可適當(dāng)?shù)匮娱L孵育時(shí)間或在較高溫度孵育。〕7. 用酶標(biāo)儀測定562nm下標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的吸光度。8. 用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)量為橫座標(biāo)，用吸光度值A(chǔ)562為縱座標(biāo)，做標(biāo)準(zhǔn)曲線，用線形回歸計(jì)算公式Y(jié)=A 180。 X + B。根據(jù)樣本的吸光度，計(jì)算待測樣本的蛋白濃度〔注意待測樣本的稀釋倍數(shù)〕。9. 按WB實(shí)驗(yàn)的要求，分裝為每支100μl。10. 內(nèi)容總結(jié)
11. 〔1〕用排槍在各孔中參加200μl BCA工作液，輕輕搖勻，37℃放置30分鐘或室溫放置2小時(shí)
〔2〕因?yàn)锽CA法測定時(shí)顏色會隨著時(shí)間的延長不斷加深，且顯色反響的速度和溫度有關(guān)，所以除非精確控制顯色反響的時(shí)間和溫度，否那么每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線
〔3〕按WB實(shí)驗(yàn)的要求，分裝為每支100μl
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