20xx年醫(yī)學(xué)專題—第二章--細胞破碎與提取要點-資料下載頁
2025-11-04 12:10本頁面
【正文】 他 從工業(yè)性應(yīng)用的萃取分離角度，SCCO2萃取技術(shù)在醫(yī)藥、食品、化妝品等工業(yè)領(lǐng)域中有較寬的應(yīng)用面。 ①醫(yī)藥工業(yè) 酶、維生素等的精制回收 動植物中藥效成分的萃?。ㄉ飰A、生育(shēngy249。)酚、EPA、DHA、鴉片、嗎啡、精油等） 醫(yī)藥品原料的濃縮、精煉、脫溶劑 酵母、菌體產(chǎn)物的萃取,第七十九頁，共九十二頁。,②食品工業(yè) 植物油脂的萃取 動物(d242。ngw249。)油脂的萃取 奶脂中脫除膽固醇等 食品脫脂 咖啡、紅茶脫咖啡因、酒花萃取 香辛料萃取 植物色素的萃取 共沸混合物分離，含醇飲料的軟化 脫色、脫臭，煙草脫尼古丁,第八十頁，共九十二頁。,③化妝品及香料工業(yè) 天然香料萃取，合成香料的分離和精制(jīngzh236。) 化妝品原料萃取，精制（界面活性劑、脂肪酸脂、甘油單酯等）,第八十一頁，共九十二頁。,1896年Beijerinck觀察到當(dāng)把明膠與瓊脂或把明膠和可溶性淀粉(di224。nfěn)的水溶液混合時，先得到一混濁不透明的溶液，隨后分成兩相，上相含有大部分明膠，下相含有大部分瓊脂(或可溶性淀粉(di224。nfěn))。再如下圖中，2.2％的葡聚糖水溶液與等體積的0.72％甲基纖維素鈉的水溶液相混合并靜置后，可得到兩個粘稠的液層。,葡聚糖與甲基纖維素鈉的雙水相體系(tǐx236。),五、 雙水相萃取(cu236。qǔ),第八十二頁，共九十二頁。,有機(yǒujī)溶劑萃取的不足： 許多蛋白質(zhì)都有極強的親水性，不溶于有機溶劑 ； 蛋白質(zhì)在有機溶劑相中易變性失活。,親水性聚合物加入水中，形成兩相，在這兩相中，水分都占大比例（85～95％），蛋白質(zhì)在兩相中不會失活，且以一定(yīd236。ng)比例分配于兩相中。,雙水相萃取(cu236。qǔ)的優(yōu)點,使固液分離和純化兩個步驟同時進行，一步完成；,適合熱敏物質(zhì)的提取，主要是胞內(nèi)酶；,第八十三頁，共九十二頁。,（一）、雙水相體系(tǐx236。)的組成,雙聚物：,聚合物低相對(xiāngdu236。)分子質(zhì)量的化合物：,PEG/DEX、聚乙二醇/ 聚乙烯醇(j249。 yǐ xī chn)、聚乙烯醇(j249。 yǐ xī chn)/甲基纖維素、聚丙二醇/葡聚糖、聚丙二醇/甲氧基乙二醇等,PEG/磷酸鉀、 PEG/磷酸胺、PEG/硫酸鈉、 PEG/葡萄糖等、,第八十四頁，共九十二頁。,（二）、雙水相體系形成(x237。ngch233。ng)的原因,雙水相體系的成因是聚合物之間的不相溶性，即聚合物分子的空間阻礙作用，相互間無法滲透，從而分為兩相。一般認為(r232。nw233。i)，只要兩種聚合物水溶液的水溶性有所差異，混合時就可發(fā)生相分離，并且水溶性差別越大，相分離的傾向越大。,2. 加入(jiār249。)鹽分，由于鹽析作用，聚合物與鹽類溶液也能形成兩相。,第八十五頁，共九十二頁。,水溶液中聚合物的疏水性(shuǐx236。ng)依下列次序遞增： 葡萄糖硫酸鹽＜甲基葡萄糖＜葡萄糖＜羥丙基葡聚糖＜甲基纖維素＜聚乙烯醇＜聚乙二醇＜聚丙三醇， 這種疏水性的差別對目的產(chǎn)物與相的相互作用是重要的。同一聚合物的疏水性隨分子量增加而增加。,（三）、影響雙水相萃取(cu236。qǔ)的因素,聚合物及其相對(xiāngdu236。)分子量,第八十六頁，共九十二頁。,pH會影響蛋白質(zhì)中可離解基團的離解度，因而(yīn 233。r)改變蛋白質(zhì)所帶電荷和分配系數(shù)；另外，pH還影響系統(tǒng)緩沖物質(zhì)磷酸鹽的離解程度，從而影響分配系數(shù)。 體系pH與蛋白質(zhì)等電點相差越大，蛋白質(zhì)在兩相中分配越不均勻。,2. pH的影響(yǐngxiǎng),第八十七頁，共九十二頁。,在PEG/Dex中，無機鹽離子(l237。zǐ)在兩相中也有不同的分配，因此在兩相間形成電位差。由于各相要保持電中性，這對帶電生物大分子，如蛋白質(zhì)和核酸等的分配，產(chǎn)生很大的影響。 一些無機離子的分配系數(shù) 正離子 分配系數(shù)K＋ 負離子 分配系數(shù)K－ K＋ 0.824 I－ 1.42 Na＋ 0.889 Br－ 1.21 NH4＋ 0.92 Cl－ 1.12 Li＋ 0.996 F－ 0.912,3.離子環(huán)境對蛋白質(zhì)在兩相體系分配(fēnp232。i)的影響,第八十八頁，共九十二頁。,由于親水聚合物的多元醇或多糖結(jié)構(gòu)保護了蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)在雙水相中的穩(wěn)定性增加，所以一般都可在室溫下操作。而且(233。r qiě)室溫時粘度較冷卻時低，有助于相的分離并節(jié)約了能源開支。,4. 溫度(wēnd249。)的影響,第八十九頁，共九十二頁。,雙水相系統(tǒng)可用于細胞碎片以及(yǐj237。)酶的進一步精制。,1. 雙水相萃取(cu236。qǔ)法常用于胞內(nèi)酶提取。,（四）、雙水相萃取(cu236。qǔ)的應(yīng)用,第九十頁，共九十二頁。,在兩水相系統(tǒng)中進行轉(zhuǎn)化翻譯功能，如酶促反應(yīng)，可以把產(chǎn)物移入另一相中，消除產(chǎn)物抑制，因而提高了產(chǎn)率。這實際上是一種反應(yīng)和分離耦合的過程，有時也稱為萃取(cu236。qǔ)生物轉(zhuǎn)化；如果發(fā)生的是一種發(fā)酵過程，則也稱為萃取發(fā)酵，因而此時也可以把兩水相系統(tǒng)稱為兩水相反應(yīng)器。,2. 兩水相反應(yīng)器,第九十一頁，共九十二頁。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),第二章 蛋白質(zhì)的制備 細胞破碎與萃取。具體須從材料特性和目的物特性綜合考慮。微生物細胞較復(fù)雜，一般用較強的方法。鹽分↑分配系數(shù)↑。乳化與去乳化。從各種動植物中萃取各種脂肪酸、提取色素。天然香料(xiāngli224。o)萃取，合成香料(xiāngli224。o)的分離和精制。葡萄糖硫酸鹽＜甲基葡萄糖＜葡萄糖＜羥丙基葡聚糖＜甲基纖維素＜聚乙烯醇＜聚乙二醇＜聚丙三醇。同一聚合物的疏水性隨分子量增加而增加。2. 兩水相反應(yīng)器,第九十二頁，共九十二頁。
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