【導(dǎo)讀】料均已作明確標(biāo)注，論文中的結(jié)論和成果為本人獨(dú)立完成，真實(shí)可靠，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在。本人授權(quán)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）全部或部分內(nèi)。保存和匯編本畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）?？共《?、抗癌等生物活性。本文的研究目的是對(duì)脫氫樅胺的B環(huán)進(jìn)行改性，合。物的應(yīng)用領(lǐng)域拓展到生物制藥領(lǐng)域，促進(jìn)松香產(chǎn)品深加工的發(fā)展。-6,7,7a,8,9,10,11,11a-八氫-5H-二苯并[b,d氮雜卓-8-基甲基)-胺。氫樅胺溴化，得到新化合物6-溴-7-氧代乙酰脫氫樅胺。作者還嘗試用6-溴-7-氧。胺和消除產(chǎn)物5,6-烯-7-氧代乙酰脫氫樅胺?，F(xiàn)它們都能切割E.coli質(zhì)粒DNA，形成新的條帶。

　　

【正文】 2 1 2 2 2 3 2 4 2 5 2 6 2 7 2 8 2 9 3 0 3 1 3 2 3 3 3 4 3 5 3 6 3 7%Transmittance 1 0 0 0 2 0 0 0 3 0 0 0 4 0 0 0 W a v e n u m b e r s ( c m 1 ) 圖 固體 F 的紅外光譜 將白色固 體 F 的二氯甲烷溶液蒸干，得到的是紅棕 色的 膏 狀物；狀態(tài)與純 F（黃色膏狀） 接近，只是顏色較深。 TLC 也 證明它們是同種物質(zhì)的不同形態(tài)。 Beckmann 重排是一個(gè)很強(qiáng)的放熱反應(yīng)。由于多聚磷酸的粘度很大不利于混合與傳熱，反應(yīng)開始后如不充分?jǐn)嚢?，極易引起溫度飆升反應(yīng)失控，最終導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。因此重排反應(yīng)過程中務(wù)必保證全程的充分?jǐn)嚢韬蛯?duì)溫度的密切監(jiān)控。 將 事先搗碎 的固體 F 與多聚磷酸加入燒杯，用金屬桿式電子溫度計(jì)和一枝玻璃棒將二者充分?jǐn)嚢杌旌??；旌线^程中，溫度會(huì)升至 40℃，溶液變成亮黃色。接下來采取梯度升溫的方法緩慢加熱 ：用電熱套加熱至 60℃撤熱，攪拌至溫度開始下降；繼續(xù)加熱到 80℃撤熱，攪拌至溫度開始下降；再加熱到 100℃攪拌，保持溫度在 100～ 120℃ 30min。如果溫度超過 120℃，就將燒杯底部浸入冰水冷卻。通過梯度升溫可以有效地控制反應(yīng)溫度，充分利用反應(yīng)熱；而且能夠提前消耗一部分反應(yīng)物，避免迅速加熱引起大量反應(yīng)物的“雪崩”式反應(yīng)，導(dǎo)致溫度飆升，反應(yīng)失控，實(shí)驗(yàn)失?。蛔钤銜r(shí) 反應(yīng)液的溫度 會(huì)在 10s 內(nèi)從 120℃升至 180℃以上，反應(yīng)液變?yōu)樯钭厣? 反應(yīng)液的后處理和 F 基本相同，將反應(yīng)液趁熱倒入冰水，同時(shí)不斷攪拌，讓多聚磷酸水 解，釋出產(chǎn)物。如不充分?jǐn)嚢?，部分反?yīng)液會(huì)粘附在杯壁或玻璃棒上，將不利于產(chǎn)物的釋出。加入氨水將溶液調(diào)至堿性，以利于酰胺固體的析出。若時(shí)間允許，最好靜置久一些讓晶粒長大便于過濾。和 F 不同的是，過濾得到的固體即使用蒸餾水洗滌 4 次也很難抽干，將濾餅在干燥器中保存數(shù)日依然是淺黃色牙膏狀。 這可能是殘余的多聚磷酸吸水，不斷產(chǎn)生難揮發(fā)的磷酸造成的。將濾餅溶于二氯甲烷，其中的水自動(dòng)分出，浮于二氯甲烷之上。分出二氯甲烷溶液 并 蒸干，得到淺黃色的固體粉末。 TLC 分析表明該固體為含有少量 F 的 G。因此建議在取得濾餅后，直接用二氯甲烷 萃取，分去水層，蒸干得到 G 的粗品。 21 柱層析得到的純 G 是雪花般輕盈的白色晶體，而純 F 是黃色 膏狀固體。 內(nèi)酰胺的還原 內(nèi)酰胺 G 在乙醚溶液中用 氫化鋁鋰還原 4h，得到內(nèi)酰胺羰基被還原的產(chǎn)物Ha。若用大過量的氫化鋁鋰 還原 12h 得到 Hb，可能是 內(nèi)酰胺羰基 和乙酰基羰基都被還原的產(chǎn)物。 Ha 的結(jié)構(gòu)已經(jīng)通過譜學(xué)手段確證 ，被還原的是內(nèi)酰胺的羰基，而不是乙?；聂驶?。雖然紅外光譜與核磁共振 碳譜表明 Hb 中沒有羰基，且 Hb在硅膠板上發(fā)生拖尾也證明它是一種胺類化合物， 但 Hb的質(zhì)譜并沒有出現(xiàn)分子離子峰 。因此其結(jié)構(gòu)尚需 進(jìn)一步確認(rèn) 。 合成雜環(huán)化合物的嘗試 本文原本希望從 α溴代酮 Ea 出發(fā)，通過 FeistBenary 反應(yīng)和 Hantzsch 吡咯合成反應(yīng)在脫氫樅胺 B 環(huán)構(gòu)造呋喃和吡咯雜環(huán) 。 實(shí)驗(yàn)中通過 TLC 分析 比對(duì)發(fā)現(xiàn)，在不同配比的展開劑中，從呋喃 、吡咯反應(yīng)液中分離出來的主產(chǎn)物 Eb、 Ec 和 E 的比移值非常接近，可能是同種物質(zhì)。從吡咯反應(yīng)液中分離出的副產(chǎn)物 Ed和用二氧化硒對(duì) E進(jìn)行脫氫得到的不飽和酮 U非常接近，也可能是同種物質(zhì)。 圖 E 的 氧化 脫氫反應(yīng) 各種化合物在不同展開劑中的 TLC 比移值見 。 這些猜測得到了 譜 學(xué)表征結(jié)果的 證實(shí) ：在合成呋喃和吡咯的反應(yīng)條件下， α溴代酮 Ea 被還原成酮 E；僅在合成吡咯的條件下，得到 少量 消除產(chǎn)物 U，并沒有得到預(yù)期的雜環(huán)化合物 。 作者根據(jù)現(xiàn)有知識(shí)猜想， 由于脫氫樅胺分子本身存在位阻，不利于 大體積親核試劑的進(jìn)攻 。 還原產(chǎn)物 E 可能是 Ea 被乙酰乙酸乙酯的碳負(fù)離子還原得到的。反應(yīng)機(jī)理 的研究 需要通過 GCMS 分析反應(yīng)液的組成 來 搜集更多證據(jù)。 產(chǎn)物的分離提純 分別用 3 種配比的展開劑，將得到的化合物在硅膠板上進(jìn)行薄層層析 (TLC)， 測量每種化合物的比移值，匯總于下表。 展開 劑的比例均為體積比（全文如此）。其中比移值旁帶 *號(hào)的化合物在硅膠板上有明顯拖尾，該數(shù)據(jù)僅表示斑點(diǎn)前沿的 22 比移值。 表 各化合物的狀態(tài)與比移值 化合物 狀態(tài) 比移值 Rf 粗品 純品 石油醚 :乙酸乙酯 =4:5 石油醚 :乙酸乙酯 =1:2 純乙酸乙酯 C 黃色膏狀 白色膏狀 * * * D 淺黃色膏狀 淺黃色膏狀 E 墨綠色膏狀 黃色膏狀 Ea 紅棕色膏狀 黃色膏狀 Eb 淺黃色 膏狀 Ec 淺黃色膏狀 Ed 淺棕色膏狀 Ee 紅色晶體 F 白色固體或 紅褐色膏狀 黃色膏狀 G 白色固體 白色晶體 Ha 淺黃色膏狀 Hb 淺黃色膏狀 * * * U 褐色膏狀 淺棕色膏狀 U 是 E 經(jīng) 二氧化硒 脫氫 得到的 α,β不飽和酮， 也能由 Ea 消除溴化氫得到。在進(jìn)行 TLC 分析時(shí)發(fā)現(xiàn)， E 的乙醇溶液在室溫下存放數(shù)周，能緩慢消除溴化氫得到 U。 由 表 可見， E、 Eb和 Ec 的比移值非常接近，可能是同種物質(zhì)； Ed和 U的比移值非常接近，也可能是同種物質(zhì)。后通過譜學(xué)手段對(duì)各化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征，證明上述推測是正確的。 （詳見 ） 根據(jù) 表 ，可以在用 200～ 300 目 硅膠柱提純化合物時(shí)選擇適當(dāng)?shù)南疵搫? F 的提純：梯度洗脫，洗脫劑的組成從石油醚 :乙酸乙酯 =1:1 緩慢地調(diào)至石油醚 :乙酸乙酯 =1:2。 FG 體系的分離：全程乙酸乙酯洗脫。 F 全部洗出后可在乙酸乙酯中加入少量乙醇將 G 洗出。 EEa 體系的分離：梯度洗脫，洗脫劑的組成從石油醚 :乙酸乙酯 =1:1 緩慢地調(diào)至 純 乙酸乙酯 。 EU 體系的分離： 梯度洗脫，洗脫劑的組成從石油醚 :乙酸乙酯 =1:1 緩慢地調(diào)至純乙酸乙酯。 由于 Ha 和 Hb為氨基化合物，在硅膠柱上拖尾嚴(yán)重，因此只能在合成它們的時(shí)候用純 G 作原料，并使用過量的氫化鋁鋰保證 G 完全反應(yīng)。 以上分離流程可一次提純數(shù)克樣品。 產(chǎn)物結(jié)構(gòu)分析 23 化合物 F C22H32N2O2 Mr= N(9Hydroxyimino7isopropyl 1,4adimethyl1,2,3,4,4a,9,10,10a octahydrophenanthren 1ylmethyl)acetamide MS L cx302m /z100 125 150 175 200 225 250 275 300 325 350 375 400 425 450 475 500 525 550 575%0100SW B1 2 0 3 2 6 0 7 7 2 (1 .3 3 6 ) AM (Ce n ,6 , 8 0 .0 0 , Ht,5 0 0 0 .0 ,0 .0 0 ,0 .7 0 )。 Sm (M n , 2 x 4 .0 0 )。 Cm (5 4 :7 9 1 :4 5 ) T O F M S ES + 1 .3 4 e 43 5 7 .33 7 9 .23 8 0 .2 相對(duì)分子質(zhì)量 （ ）和計(jì)算值（ ）基本吻合 。 IR 415.39470.91505.60538.89563.27612.76641.51669.52720.63755.32803.25826.71900.48959.751035.611065.471091.711195.131287.771379.001441.081491.231555.441655.732365.002867.742928.312958.863310.20 2 2 2 3 2 4 2 5 2 6 2 7 2 8 2 9 3 0 3 1 3 2%Transmittance 1 0 0 0 2 0 0 0 3 0 0 0 4 0 0 0 W a v e n u m b e r s ( c m 1 ) 3310cm1 是 肟 OH 鍵的伸縮振動(dòng) [49]，與 酰胺 NH 鍵的伸縮振動(dòng) 重疊。1656cm1 是 酰胺 C=O 鍵的伸縮振動(dòng) [50]，與肟 C=N 的伸縮振動(dòng)重疊。 [49] 24 1HNMR 13CNMR δC=156 為肟基碳原子。 δC= 為乙?；?的 羰 基碳原子。 [49] 25 化合物 G C22H32N2O2 Mr= N(3Isopropyl8,11adimethyl 6oxo6,7,7a,8,9,10,11,11aoctahydro 5Hdibenzo[b,d]azepin 8ylmethyl)acetamide MS m /z100 125 150 175 200 225 250 275 300 325 350 375 400 425 450 475 500 525 550%0100SW B1 2 0 4 1 2 0 1 6 2 5 (1 1 .6 3 2 ) T O F M S ES + 2 .5 6 e 33 5 7 .23 5 8 .23 6 1 .2CY S 70 0 相對(duì)分子質(zhì)量 （ ）和計(jì)算值（ ）基本吻合 IR 410.97478.39525.83548.60580.23608.73639.80673.54764.05818.38887.221033.461057.631087.201134.261175.441280.651388.841406.611431.541459.771479.611522.721562.581620.091681.982866.752938.012999.033030.163121.763217.703424.973674.423750.733803.163821.553839.483857.133904.60 2 0 2 1 2 2 2 3 2 4 2 5 2 6 2 7 2 8 2 9 3 0 3 1 3 2%Transmittance 1 0 0 0 2 0 0 0 3 0 0 0 4 0 0 0 W a v e n u m b e r s ( c m 1 ) 3425cm1 是酰胺 NH 鍵的伸縮振動(dòng)， 1631cm1 是酰胺 C=O 鍵的伸縮振動(dòng) [50] 26 1HNMR