【導讀】教師的指導下進行的研究工作及取得的成果。盡我所知，除文中。構的學位或學歷而使用過的材料。對本研究提供過幫助和做出過。貢獻的個人或集體，均已在文中作了明確的說明并表示了謝意。和電子版本；學校有權保存畢業(yè)設計（論文）的印刷本和電子版，公布論文的部分或全部內(nèi)容。行研究所取得的研究成果。本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔。電子版，允許論文被查閱和借閱。涉密論文按學校規(guī)定處理。理，以降低或防治果實采后病害的保鮮方法。本實驗通過利用酵母細胞壁組。霉病害生物防治效果得到顯著提高。此外，試驗結果表明，幾丁質誘導。梨果實傷口處的生長速度顯著提高，菌體數(shù)量顯著增加。而未經(jīng)誘導R.paludigenum的發(fā)酵上清。液對蘋果果實傷口處擴展青霉的侵染沒有抑制作用，反而有促進效果。其機理可能與激發(fā)蘋果果實傷口處組織的POD酶活性有關。刺激酵母分泌抑菌物質和增強酵母對果實抗性的誘導有關。

　　

【正文】 ls/ml。用 PE 塑料膜密封作保濕處理，并在室溫（ 20~25℃ ）下貯藏，每天定時記錄病害發(fā)生情況和病斑直徑，結果以發(fā)病率（ %）和病斑直徑（ mm）表示。每處理 3 個平行，每平行包括 12 個果實。 幾丁質與 NaCl 結合誘導對拮抗酵母生防活性的影響 酵母活化和液體培養(yǎng)、菌體收集同 ，幾丁質濃度取 %（ w/v） ，NaCl濃度取 %（ w/v） ，二代液體培養(yǎng)時間為 36 h，所得酵母細胞懸浮液用血球計數(shù)板計數(shù)后配制成所需濃度備用。在試驗果實的表面用無菌打孔器制造大小和深度統(tǒng)一的傷口（大約 直徑為 5 mm，深度為 3 mm），每個傷口處分別加入 50 μl下述液體（ 1）無菌水（作為對照）；（ 2）在 NYDB 中培養(yǎng)的 R. paludigenum 懸浮液（ 1108 cells/ml）；（ 3）在幾丁質濃度為 %（ w/v）的 NYCB 中培養(yǎng)的 R. paludigenum 懸浮液（ 1108 cells/ml）；（ 4）在添加 %（ w/v） NaCl的 NYDB 中培養(yǎng)的 R. paludigenum 懸浮液 （ 1108 cells/ml） ；（ 5）在添加 %（ w/v） NaCl 的 NYCB（幾丁質濃度為 %， w/v）中培養(yǎng)的R. paludigenum 懸浮液（ 1108 cells/ml） 。 2 小時后，在每個傷口處加入 30 μl的 P. expansum 孢子懸浮液，濃度為 1104 cells/ml。用 PE 塑料膜密封作保濕處理，并在室溫（ 20~25 ℃ ）下貯藏，每天定時記錄病害發(fā)生情況和病斑直徑，結果以發(fā)病率（ %）和病斑直徑（ mm）表示。每處理 3 個平行，每平行包括 12 個果實。 數(shù)據(jù)處理 分析與作圖 采用 SPSS 軟件 (Statistical Product and Service Solutions)進行數(shù)據(jù) 統(tǒng)計，數(shù)據(jù)采用 ANOVA 進行鄧肯氏差異分析方法（取 p）。采用 軟件作圖。 結果 不同濃度幾丁質對 R. paludigenum 生防效力的影響 在不同濃度的 NYCB 中誘導培養(yǎng)后， R. paludigenum 對梨青霉病的生防效力顯著提高（圖 21 和圖 22）。第 6 天時， NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum處理后梨青霉病發(fā)病率為 %，而添加了 %、 %、 %和 %幾丁質后，其發(fā)病率分別僅為 %、 %、 %和 %。特別是 添加 %幾丁質后， R. paludigenum 的生防效力顯著增強，處理后梨青霉病的發(fā)病率在第 6 d 和第 7 d 時僅為 NYDB 中培養(yǎng)酵母的 %和 %。同時，結合病斑直徑的情況，生防效果最好的處理為 %的 NYCB培養(yǎng)的 R. paludigenum。 哈爾濱工業(yè)大學學士學位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對果實采后真菌病害抑制效果研究 14 6d 7d020406080100cbcbcdbcdbcdbccbaDisease incidence (%)D ay s af t er i nocul at i on(d) C ont rol N Y D B N Y C B ( 0. 1%) N Y C B ( 0. 2%) N Y C B ( 1. 0%) N Y C B ( 2. 0%)a 圖 21 不同濃度幾丁質培養(yǎng)后的 R. paludigenum 對梨青霉病的抑制效果 Fig. 21 Incidence of blue mold decay caused by Penicillium expansum on pears inoculated with R. paludigenum cultured with different concentrations of chitin. Bars represent standard errors of three replications. Different letter indicates significant differences (P ) according to the Duncan39。s multiple range tests. 6d 7d012345cbcabaababababLesion diameter (mm)D ay s af t er i nocul at i on(d) N Y D B N Y C B ( 0. 1%) N Y C B ( 0. 2%) N Y C B ( 1. 0%) N Y C B ( 2. 0%) a 圖 22 不同濃度幾丁質培養(yǎng)后 R. paludigenum 對梨青霉病病斑直徑的影響 Fig. 22 Severity of blue mold decay caused by Penicillium expansum on pears inoculated with R. paludigenum cultured with different concentrations of chitin. Bars represent standard errors of three replications. Different letter indicates significant differences (P ) according to the Duncan39。s multiple range tests. 類似的，在蘋果果實上，不同濃度 幾丁質 誘導培養(yǎng)的 R. paludigenum 對青霉病的抑制作用也顯著增強，處理后第 5 d 時（圖 23），濃度為 %和%的 NYCB 誘導培養(yǎng)的酵母其發(fā)病率僅為 %，而 NYDB 培養(yǎng)的酵母其哈爾濱工業(yè)大學學士學位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對果實采后真菌病害抑制效果研究 15 發(fā)病率為 %，但是其病斑直徑之間無顯著性差異。 C ont rol A B C D E020406080100bcccbbDIsease incidence (%)T reat m enta C ont A B C D E048121620bbbbbLesion diameter (mm)T reat m enta 圖 23 不同濃度幾丁質培養(yǎng)后 第 5 天 R. paludigenum 對蘋果青霉病的生防效果 A: NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum。 B: %（ w/v）幾丁質 NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum。 C: %（ w/v）幾丁質 NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum。 D: %（ w/v）幾丁質 NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum。 E: %（ w/v）幾丁質 NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum. Fig. 23 Incidence of blue mold decay caused by Penicillium expansum on apples inoculated with R. paludigenum cultured with different concentrations of chitin. A: R. paludigenum cultured in NYDB。 B: R. paludigenum cultured in NYDB with % chitin。 C: R. paludigenum cultured in NYCB with % chitin。 D: R. paludigenum cultured in NYCB with % chitin。 E: R. paludigenum cultured in NYCB with % chitin. Bars represent standard errors of three replications. 幾丁質誘導后不同濃度 R. paludigenum 酵母 的生防效果 試驗結果表明，酵母的生防效果隨著其濃度的增加而顯著增強。 在NYCB 培養(yǎng)基中培養(yǎng)后的酵母其在果實傷口處的生防顯著提高（圖 24 和圖25），特別是酵母懸浮液為 1107cells/mL 時，幾丁質可以顯著提高 R. paludigenum 的拮抗效力。 哈爾濱工業(yè)大學學士學位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對果實采后真菌病害抑制效果研究 16 020406080100120ddbcaa107N 106C106N107C108N 108CDisease incidence(%)C ont rolaT reat m ent 圖 24 幾丁質誘導后不同濃度 R. paludigenum 酵母對蘋果青霉病 第 7 天的 抑制效果 108N: NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum（ 1108cell/ml） 。 108C: %幾丁質 NYDB 培養(yǎng)的R. paludigenum（ 1108cell/ml） 。 107N: NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum（ 1107cell/ml） 。 107C: %幾丁質 NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum（ 1107cell/ml） 。 106N: NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum（ 1106cell/ml） 。 106C: %幾丁質 NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum（ 1106cell/ml）。 誤差線代表標準誤差。字母代表不同顯著性（ P ）。 Fig. 24 Efficacy of R. paludigenum at various concentrations (106, 107 and 10 8 cells/ml) after cultivation in NYDB or NYDB amended with chitin（ %） in inhibiting the disease incidence of Penicillium expansum in apple fruit wounds at 7th day. Bars represent standard errors. Different letter indicates significant differences (P ) according to the Duncan39。s multiple range test. 05101520253035107Ceecdbb107N 106C106N108N 108CLesion diameter (mm)T reat m entC ont rola 圖 25 幾丁質誘導后不同濃度 R. paludigenum 酵母對蘋果青霉病 第 7 天的 抑制效果 108N: NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum（ 1108cell/ml） 。 108C: %幾丁質 NYDB 培養(yǎng)的哈爾濱工業(yè)大學學士學位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對果實采后真菌病害抑制效果研究 17 R. paludigenum（ 1108cell/ml） 。 107N: NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum（ 1107cell/ml） 。 107C: %幾丁質 NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum（ 1107cell/ml） 。 106N: NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum（ 1106cell/ml） 。 106C: %幾丁質 NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum（ 1106cell/ml）。誤差線代表標準誤差。字母代表不同顯 著性（ P ）。 Fig. 25 Efficacy of R. paludigenum at various concentrations (106, 107 and 10 8 cells/ml) after cultivation in NYDB or NYDB amended with chitin（ %） in inhibiting the of Penicillium expansum in apple fruit wounds at 7th day. Bars represent standard errors. Different letter indicates significant differences (P ) according to the Duncan39。s multiple range test. 不同培養(yǎng)時間對幾丁質誘導 R. paludigenum 生防效力的影響 %（ w/v） 的 NYCB 培養(yǎng)基分別培養(yǎng) 2 3 4 72 和 96 h 后， R. paludig