乙肝表面抗原及乙肝兩對(duì)半檢測(cè)1-資料下載頁(yè)
2025-09-27 03:35本頁(yè)面
【正文】 新鮮的標(biāo)本。標(biāo)本假設(shè)不能及時(shí)送檢，可在 2℃ 8℃ 冷藏 3天。長(zhǎng)期保存需冷凍于 20℃ ，忌反復(fù)凍融。 標(biāo)本嚴(yán)重溶血及混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣的活性，催化底物顯色造成假陽(yáng)性。 標(biāo)本凝固不全 ，正常血液采集后 1/22h開(kāi)始凝固， 1824h血塊完全收縮。在工作中，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè)，常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心別離血清，使血清中仍殘留局部纖維蛋白原，在 ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊，易造成假陽(yáng)性結(jié)果；因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再別離血清，或標(biāo)本采集時(shí)用帶別離膠的采血管或于采血管中參加適當(dāng)?shù)拇倌齽? 第三十四頁(yè)，共四十頁(yè)。 本卷須知 2 試劑影響 因各廠家對(duì)檢測(cè)標(biāo)本要求、操作步驟不同，故認(rèn)真閱讀檢測(cè)試劑說(shuō)明書能防止不必要的實(shí)驗(yàn)誤差〔特別是膠體金免疫法〕。不同廠家生產(chǎn)的試劑靈敏度與特異性存在一定的差異，不同廠家試劑的特異性和敏感性分別為 %%、 7889%,存在較大差異。有的廠家酶標(biāo)板孔間 A值差大于 15%；標(biāo)記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定比較差。使用質(zhì)劣的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽(yáng)性或假陰性。因此選擇高質(zhì)量的試劑是保證結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵之一 不同方法學(xué)的檢測(cè)試劑，會(huì)使兩對(duì)半結(jié)果出現(xiàn)一些不同。例如：在實(shí)際工作中常用 ELISA檢測(cè) HBsAg結(jié)果為陰性，而電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)為陽(yáng)性。除方法學(xué)的靈敏度外；還存在使用單抗或多克隆抗體試劑的差異。單抗對(duì)變異抗原或亞型乙肝標(biāo)志物檢測(cè)存在差異。 第三十五頁(yè)，共四十頁(yè)。 本卷須知 3 干擾物質(zhì)的影響 大約 40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果；常見(jiàn)的干擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反響物質(zhì)和其它物質(zhì)等。如 RF因子可與標(biāo)記二抗的 FC段法結(jié)合造成假陽(yáng)性，補(bǔ)體從 C1q活化，使一抗和酶標(biāo)二抗的抗體分子發(fā)生變構(gòu)， Fc的 C1q分子結(jié)合點(diǎn)暴露出來(lái)，那么補(bǔ)體 C1q可將二者連接起來(lái)造成假陽(yáng)性，采用56℃30 分鐘滅活補(bǔ)體可降低假陽(yáng)性率，高濃度的 AFP〔如孕婦〕，在儲(chǔ)存過(guò)程中可能形成二聚體會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深影響檢測(cè)結(jié)果。 第三十六頁(yè)，共四十頁(yè)。 本卷須知 4 藥物的影響 高效價(jià)的乙肝免疫球蛋白會(huì)與 HBsAg形成復(fù)合物，影響 HBsAg的檢出，所以一些 HBsAg陽(yáng)性患者注射乙肝免疫球蛋白后， HBsAg檢測(cè)會(huì)呈陰性反響，導(dǎo)致乙肝兩對(duì)半少見(jiàn)模式的出現(xiàn)，如我們常遇到乙肝大三陽(yáng)的孕婦，為阻斷乙肝母嬰垂直傳播時(shí)，在孕第 10月常規(guī)注射 200mg乙肝免疫球蛋白，不僅影響孕婦 HBsAg的檢出；而且其所生產(chǎn)的新生兒也常出現(xiàn)HBsAg陰性， HBeAg 陽(yáng)性和 HBcAb陽(yáng)性等少見(jiàn)模式、可能是乙肝免疫球蛋白屬 IgG抗體能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)與胎兒血液中的 HBsAg結(jié)合形成復(fù)合物；那么新生兒 HBsAg檢測(cè)呈陰性；用 1小時(shí)可提高出率。 為預(yù)防乙肝，局部 HBsAg陰性人群在接種乙肝疫苗后的 12周內(nèi)，血清中可檢出 HBsAg成份，形成一過(guò)性 HBsAg陽(yáng)性，這可能是乙肝疫苗主要成分是 HBsAg.，有方法能夠把它檢出；如電化學(xué)發(fā)光法，建議接種乙肝疫苗后 1個(gè)月內(nèi)不應(yīng)作 HBsAg檢測(cè)。 第三十七頁(yè)，共四十頁(yè)。 本卷須知 5 HBsAg檢測(cè)出現(xiàn)假陽(yáng)性的幾種原因 待測(cè)標(biāo)本溶血或含有血細(xì)胞。 待測(cè)標(biāo)本長(zhǎng)菌或其它原因混濁。 洗板時(shí)洗滌液溢出，污染其它孔。 洗板機(jī)內(nèi)部管道有真菌生長(zhǎng)。 洗板機(jī)設(shè)置不當(dāng)。 手工洗板時(shí)，拍干用紙未更換。 實(shí)驗(yàn)中，實(shí)際孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，溫度過(guò)高。 第三十八頁(yè)，共四十頁(yè)。 第三十九頁(yè)，共四十頁(yè)。 內(nèi)容總結(jié) 乙肝外表抗原及乙肝兩對(duì)半檢測(cè)。比較常用的是 ELISA雙抗體夾心法及 ELISA間接法?；瘜W(xué)發(fā)光技術(shù)是近二十年來(lái)開(kāi)展非常迅速的非放射性免疫分析技術(shù)。原理： 化學(xué)發(fā)光免疫分析儀是通過(guò)檢測(cè)患者血清從而對(duì)人體進(jìn)行免疫分析的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)儀器。樣本 OD值 /COV值 ≥。樣本 OD值 /COV值＜ 。COV=陰性對(duì)照平均 OD值 〔 OD＜ 〕。標(biāo)本假設(shè)不能及時(shí)送檢，可在 2℃ 8℃ 冷藏 3天 第四十頁(yè)，共四十頁(yè)。
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