乙肝五項、梅毒的檢測及應用(精減)-資料下載頁
2025-09-25 13:45本頁面
【正文】 感染末期的攜帶者等。 ? 〔 2〕 HBsAg基因的突變。 ? 〔 3〕 HCV重疊感染對 HBV復制或 HBsAg的表達的抑制作用。 ? 〔 4〕測定方法所用抗體對 HBV不同基因型檢測敏感性的不同。 ? (5) “帶現(xiàn)象〞。 第四十七頁，共六十二頁。 ? 假陽性原因： ? 操作及儀器因素：加樣、洗板、自動化加樣系統(tǒng)的標本間“交叉污染〞。 ? 標本因素： RF、補體、異嗜性抗體、動物抗體、溶血、細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全。 第四十八頁，共六十二頁。 ? 本卷須知 ? ,應置室溫平衡前方可使用。剩余板條應裝入含枯燥劑的塑料袋內封口。 ? 2. 封片不能重復使用。 ? ，使用本試劑盒應視為有傳染性。 ? 2～ 8℃ 避光保存，有效期一年。 ? ，檢測結果不能排除假陽性和假陰性的可能。同一份標本在不同實驗室或采用不同的試劑盒可能會得出不一致的結果。因此，結果有爭議時，應進一步采用中和試驗確認或進行HBVDNA測定。 第四十九頁，共六十二頁。 梅毒螺旋體抗體檢測 第五十頁，共六十二頁。 梅毒螺旋體抗體檢測 ? 目的：篩查有無梅毒感染 ? 對妊娠的影響：可導致自發(fā)性流產、早產、圍產兒死亡、患新生兒先天性梅毒等。 第五十一頁，共六十二頁。 ? 梅毒 ? 梅毒是由梅毒螺旋體引起的慢性感染性疾病。梅毒螺旋體可以通過性接觸和胎盤等方式傳播。梅毒螺旋體不能夠在體外培養(yǎng)，也不能用常規(guī)方法染色。實驗室常用的檢測方法包括典型潰瘍處查找梅毒螺旋體和檢測血清中抗體的存在。不同的感染階段應選用不同的實驗方法，潰瘍并不是出現(xiàn)于疾病任何階段，而抗體一般在潰瘍形成后 14周出現(xiàn)。 第五十二頁，共六十二頁。 RPR快速血清反響素環(huán)狀卡片試驗 ? 原理 ? 采用甲苯胺紅不加熱血清試驗方法。試劑中的心磷脂作為抗原與抗體發(fā)生反響，卵磷脂可加強心磷脂的抗原性，膽固醇可增強抗體的敏感性。這些成分溶于無水乙醇中，在參加水后，膽固醇析出形成載體，心磷脂和卵磷脂在水中形成膠體狀包裹在其周圍，形成膠體微粒。將此抗原微?；鞈矣诩妆桨芳t溶液中，參加待測血清，血清中的抗體與之反響后，可出現(xiàn)肉眼可見的凝集塊。 第五十三頁，共六十二頁。 ? 操作 ? .〔 1825℃ 〕平衡 10min。 ? 〔無需滅活處理〕、陰性對照和陽性對照分別加至反響卡的樣本圈內，每圈 1滴〔 50uL〕。 ? ，垂直滴加 1滴抗原于樣本圈內。 ? 8分鐘，立即肉眼觀察結果。 第五十四頁，共六十二頁。 ? 結果判定 ? 陰性：呈粉紅色均勻分散顆粒。 ? 陽性：出現(xiàn)粉紅色凝集塊，根據凝集塊大小記錄 1+～ 4+。 ? 陽性反響假設需定量檢測，可將待測血清用生理鹽水稀釋后，按定性方法進行。 第五十五頁，共六十二頁。 ? 本卷須知 ? ，結果穩(wěn)定性、重復性好。待測血清需新鮮無污染，否那么可能出現(xiàn)假陽性或假陰性結果。 ? 。檢樣及廢棄物應視為生物危險品。 ? ，陽性結果需進一步做抗梅毒螺旋體抗體試驗確認〔 TPPA〕。 第五十六頁，共六十二頁。 ELISA法 ? 原理 ? 采用雙抗夾心 ELISA法 。將高純度 TP特異抗原包被于微孔反響板〔條〕，待測血清中如存在抗 TP抗體，那么與包被的抗原結合。待參加酶標記的高純度 TP抗原，在固相上形成 TP抗原 抗 TP 抗體 酶標記 TP抗原夾心復合物，待參加酶底物液時即產生呈色反響，呈色強度與抗 TP抗體水平成正比。 第五十七頁，共六十二頁。 ? 操作 ? 〔 1825℃ 〕，取出所需條板。分別參加待測血清、陽性對照或陰性對照至已包被 TP抗原的反響孔中。每孔 100ul， 37℃ 孵育 1小時。 ? 洗滌反響板 5次，每孔再參加酶標記 TP抗原 100微升?；靹?， 37℃ 孵育 30分鐘。 ? ，用洗滌液洗孔 5遍，在吸水紙上拍干。 ? A液、顯色劑 B液各 50ul，混勻，37℃ 孵育 30分鐘。加終止液 50ul。 第五十八頁，共六十二頁。 ? 本卷須知 ? ，結果測定應以酶標儀讀數為準，以保證準確。 ? ，注意不要發(fā)生孔間交叉污染，每次洗滌應浸泡 60S。 ? 用，使用本試劑盒應視為有傳染性。 ? ，血液沒有完全凝固的血清樣本、有微生物污染的樣本可能會有錯誤的結果。 第五十九頁，共六十二頁。 ? 梅毒螺旋體抗體檢測的臨床意義 ? 患梅毒的孕婦可通過胎盤感染胎兒，早期可導致胎兒流產、早產，晚期感染的成活胎兒可患先天梅毒。 ? 梅毒血清學試驗陽性，只提示所測標本中有抗內酯抗體或抗 TP抗體存在，不能作為患者感染梅毒螺旋體的絕對依據，陰性結果也不能排出梅毒螺旋體感染，檢測結果應結合臨床綜合分析。 第六十頁，共六十二頁。 謝 謝 大 家！ 第六十一頁，共六十二頁。 內容總結 乙肝五項、梅毒螺旋體抗體的檢測及應用。不易制備定量、半定量試劑。此方法為初篩，因此陽性結果須用其他方法〔如 EIA〕進一步確認。每孔加顯色劑 B各 1滴〔 50181。L〕 ,置 37℃ 反響30分鐘。 A，顯色劑 B各 1滴〔 50181。L〕 ,置 37℃ 反響 15分鐘。 學過篩試驗，陽性結果需進一步做抗梅毒螺旋體抗體試驗確認〔 TPPA〕。梅毒螺旋體抗體檢測的臨床意義 第六十二頁，共六十二頁。
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