乙肝五項(xiàng)、梅毒的檢測(cè)及應(yīng)用(精減)-資料下載頁(yè)
2024-10-04 13:45本頁(yè)面
【正文】 感染末期的攜帶者等。 ? 〔 2〕 HBsAg基因的突變。 ? 〔 3〕 HCV重疊感染對(duì) HBV復(fù)制或 HBsAg的表達(dá)的抑制作用。 ? 〔 4〕測(cè)定方法所用抗體對(duì) HBV不同基因型檢測(cè)敏感性的不同。 ? (5) “帶現(xiàn)象〞。 第四十七頁(yè)，共六十二頁(yè)。 ? 假陽(yáng)性原因： ? 操作及儀器因素：加樣、洗板、自動(dòng)化加樣系統(tǒng)的標(biāo)本間“交叉污染〞。 ? 標(biāo)本因素： RF、補(bǔ)體、異嗜性抗體、動(dòng)物抗體、溶血、細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、標(biāo)本凝固不全。 第四十八頁(yè)，共六十二頁(yè)。 ? 本卷須知 ? ,應(yīng)置室溫平衡前方可使用。剩余板條應(yīng)裝入含枯燥劑的塑料袋內(nèi)封口。 ? 2. 封片不能重復(fù)使用。 ? ，使用本試劑盒應(yīng)視為有傳染性。 ? 2～ 8℃ 避光保存，有效期一年。 ? ，檢測(cè)結(jié)果不能排除假陽(yáng)性和假陰性的可能。同一份標(biāo)本在不同實(shí)驗(yàn)室或采用不同的試劑盒可能會(huì)得出不一致的結(jié)果。因此，結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí)，應(yīng)進(jìn)一步采用中和試驗(yàn)確認(rèn)或進(jìn)行HBVDNA測(cè)定。 第四十九頁(yè)，共六十二頁(yè)。 梅毒螺旋體抗體檢測(cè) 第五十頁(yè)，共六十二頁(yè)。 梅毒螺旋體抗體檢測(cè) ? 目的：篩查有無(wú)梅毒感染 ? 對(duì)妊娠的影響：可導(dǎo)致自發(fā)性流產(chǎn)、早產(chǎn)、圍產(chǎn)兒死亡、患新生兒先天性梅毒等。 第五十一頁(yè)，共六十二頁(yè)。 ? 梅毒 ? 梅毒是由梅毒螺旋體引起的慢性感染性疾病。梅毒螺旋體可以通過(guò)性接觸和胎盤(pán)等方式傳播。梅毒螺旋體不能夠在體外培養(yǎng)，也不能用常規(guī)方法染色。實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)方法包括典型潰瘍處查找梅毒螺旋體和檢測(cè)血清中抗體的存在。不同的感染階段應(yīng)選用不同的實(shí)驗(yàn)方法，潰瘍并不是出現(xiàn)于疾病任何階段，而抗體一般在潰瘍形成后 14周出現(xiàn)。 第五十二頁(yè)，共六十二頁(yè)。 RPR快速血清反響素環(huán)狀卡片試驗(yàn) ? 原理 ? 采用甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)方法。試劑中的心磷脂作為抗原與抗體發(fā)生反響，卵磷脂可加強(qiáng)心磷脂的抗原性，膽固醇可增強(qiáng)抗體的敏感性。這些成分溶于無(wú)水乙醇中，在參加水后，膽固醇析出形成載體，心磷脂和卵磷脂在水中形成膠體狀包裹在其周?chē)纬赡z體微粒。將此抗原微粒混懸于甲苯胺紅溶液中，參加待測(cè)血清，血清中的抗體與之反響后，可出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集塊。 第五十三頁(yè)，共六十二頁(yè)。 ? 操作 ? .〔 1825℃ 〕平衡 10min。 ? 〔無(wú)需滅活處理〕、陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照分別加至反響卡的樣本圈內(nèi)，每圈 1滴〔 50uL〕。 ? ，垂直滴加 1滴抗原于樣本圈內(nèi)。 ? 8分鐘，立即肉眼觀察結(jié)果。 第五十四頁(yè)，共六十二頁(yè)。 ? 結(jié)果判定 ? 陰性：呈粉紅色均勻分散顆粒。 ? 陽(yáng)性：出現(xiàn)粉紅色凝集塊，根據(jù)凝集塊大小記錄 1+～ 4+。 ? 陽(yáng)性反響假設(shè)需定量檢測(cè)，可將待測(cè)血清用生理鹽水稀釋后，按定性方法進(jìn)行。 第五十五頁(yè)，共六十二頁(yè)。 ? 本卷須知 ? ，結(jié)果穩(wěn)定性、重復(fù)性好。待測(cè)血清需新鮮無(wú)污染，否那么可能出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。 ? 。檢樣及廢棄物應(yīng)視為生物危險(xiǎn)品。 ? ，陽(yáng)性結(jié)果需進(jìn)一步做抗梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)確認(rèn)〔 TPPA〕。 第五十六頁(yè)，共六十二頁(yè)。 ELISA法 ? 原理 ? 采用雙抗夾心 ELISA法 。將高純度 TP特異抗原包被于微孔反響板〔條〕，待測(cè)血清中如存在抗 TP抗體，那么與包被的抗原結(jié)合。待參加酶標(biāo)記的高純度 TP抗原，在固相上形成 TP抗原 抗 TP 抗體 酶標(biāo)記 TP抗原夾心復(fù)合物，待參加酶底物液時(shí)即產(chǎn)生呈色反響，呈色強(qiáng)度與抗 TP抗體水平成正比。 第五十七頁(yè)，共六十二頁(yè)。 ? 操作 ? 〔 1825℃ 〕，取出所需條板。分別參加待測(cè)血清、陽(yáng)性對(duì)照或陰性對(duì)照至已包被 TP抗原的反響孔中。每孔 100ul， 37℃ 孵育 1小時(shí)。 ? 洗滌反響板 5次，每孔再參加酶標(biāo)記 TP抗原 100微升。混勻， 37℃ 孵育 30分鐘。 ? ，用洗滌液洗孔 5遍，在吸水紙上拍干。 ? A液、顯色劑 B液各 50ul，混勻，37℃ 孵育 30分鐘。加終止液 50ul。 第五十八頁(yè)，共六十二頁(yè)。 ? 本卷須知 ? ，結(jié)果測(cè)定應(yīng)以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，以保證準(zhǔn)確。 ? ，注意不要發(fā)生孔間交叉污染，每次洗滌應(yīng)浸泡 60S。 ? 用，使用本試劑盒應(yīng)視為有傳染性。 ? ，血液沒(méi)有完全凝固的血清樣本、有微生物污染的樣本可能會(huì)有錯(cuò)誤的結(jié)果。 第五十九頁(yè)，共六十二頁(yè)。 ? 梅毒螺旋體抗體檢測(cè)的臨床意義 ? 患梅毒的孕婦可通過(guò)胎盤(pán)感染胎兒，早期可導(dǎo)致胎兒流產(chǎn)、早產(chǎn)，晚期感染的成活胎兒可患先天梅毒。 ? 梅毒血清學(xué)試驗(yàn)陽(yáng)性，只提示所測(cè)標(biāo)本中有抗內(nèi)酯抗體或抗 TP抗體存在，不能作為患者感染梅毒螺旋體的絕對(duì)依據(jù)，陰性結(jié)果也不能排出梅毒螺旋體感染，檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合臨床綜合分析。 第六十頁(yè)，共六十二頁(yè)。 謝 謝 大 家！ 第六十一頁(yè)，共六十二頁(yè)。 內(nèi)容總結(jié) 乙肝五項(xiàng)、梅毒螺旋體抗體的檢測(cè)及應(yīng)用。不易制備定量、半定量試劑。此方法為初篩，因此陽(yáng)性結(jié)果須用其他方法〔如 EIA〕進(jìn)一步確認(rèn)。每孔加顯色劑 B各 1滴〔 50181。L〕 ,置 37℃ 反響30分鐘。 A，顯色劑 B各 1滴〔 50181。L〕 ,置 37℃ 反響 15分鐘。 學(xué)過(guò)篩試驗(yàn)，陽(yáng)性結(jié)果需進(jìn)一步做抗梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)確認(rèn)〔 TPPA〕。梅毒螺旋體抗體檢測(cè)的臨床意義 第六十二頁(yè)，共六十二頁(yè)。
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