免疫球蛋白與抗體-資料下載頁
2024-10-03 14:07本頁面
【正文】 此獲得的抗血清即為多克隆抗體〔 polyclonal antibody, PcAb〕，該抗血清是一種多克隆的混合抗體，具有高度的異質(zhì)性，即針對同一抗原決定簇的抗體仍是由不同 B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的不同質(zhì)的抗體所組成。 〔二〕根本制備過程 抗原制備 — → 動物免疫 — → 檢測血清抗體效價 — → 血清別離與保存。 第六節(jié) 抗體的人工制備 第四十九頁，共六十三頁。 第五十頁，共六十三頁。 ? 二、單克隆抗體〔第二代抗體〕 (重點 ). ? 〔一〕概念 由一個 B細(xì)胞分化增殖的子代細(xì)胞〔漿細(xì)胞〕克隆、產(chǎn)生的針對單一抗原決定簇的抗體，或者說是由一個識別一種抗原表位的 B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的同源抗體，稱為單克隆抗體〔 McAb〕。 第五十一頁，共六十三頁。 ? 〔二〕優(yōu)點 ? 、均一性； ? ，制備時不需純化抗原就可得到純抗體； ? ； ? ，且可連續(xù)生產(chǎn)特異性強； ? ，少或無血清交叉反響。 第五十二頁，共六十三頁。 〔三〕制備單克隆抗體的根本原理 〔 1〕 DNA合成的 2條途徑 ① 主要途徑：可被氨基喋呤 (A)所阻斷 ② 旁路途徑：利用次黃嘌呤 (H)和胸腺嘧啶核苷 (T) ? 次黃嘌呤 鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶 (HGPRT) ? 胸腺嘧啶核苷激酶 (TK)。 所需要的酶 第五十三頁，共六十三頁。 〔 2〕所用的細(xì)胞 第五十四頁，共六十三頁。 第五十五頁，共六十三頁。 〔 3〕所用培養(yǎng)基 第五十六頁，共六十三頁。 ? 〔三〕根本制備過程 ? 制備抗原 → 免疫動物 → 免疫脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備 → 細(xì)胞融合 → 雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng) → 雜交瘤細(xì)胞的的篩選 → 雜交瘤細(xì)胞的克隆化 → 單克隆抗體的檢定 → 雜交瘤細(xì)胞系的建立 → 單克隆抗體的大量制備〔動物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法〕 第五十七頁，共六十三頁。 第五十八頁，共六十三頁。 單克隆抗體的大量生產(chǎn) 第五十九頁，共六十三頁。 單克隆和多克隆抗體的比較和用途 用于免疫學(xué)檢測，輔助臨床診斷，用于各種病原體以及腫瘤的診斷 McAb用于親和層析，別離微量可溶性抗原 特異性 敏感性 均一性 McAb PcAb 低 差 無 高 強 有 標(biāo)記的 McAb用于根底研究，了解細(xì)胞分化等 制備生物導(dǎo)彈用于腫瘤、移植等的臨床治療。 特異性 敏感性 均一性 McAb 低差無 高 強有 、標(biāo)記的 McAb用于根底研究，了解細(xì)胞分化等 、制備生物導(dǎo)彈用于腫瘤、移植等的臨床治療。 第六十頁，共六十三頁。 ? 三、基因工程抗體〔第 3代抗體〕 ? 自 1975年單克隆抗體雜交瘤技術(shù)問世以來，單克隆抗體在醫(yī)學(xué)中被廣泛地應(yīng)用于疾病的診斷及治療。 ? 但目前絕大數(shù)單克隆抗體是鼠源的，臨床重復(fù)給藥時體內(nèi)產(chǎn)生抗鼠抗體，使臨床療效減弱或消失。 ? 因此，醫(yī)學(xué)臨床上最理想的單克隆抗體應(yīng)是人源的 ,但人 人雜交瘤技術(shù)目前尚未突破。 第六十一頁，共六十三頁。 ? 隨著 DNA重組技術(shù)以及其他分子生物學(xué)技術(shù)的開展，人們通過基因工程技術(shù)對 Ig分子進(jìn)行切割，拼接或修飾來制備的新型抗體分子，稱為基因工程抗體(重點 ). ? 基因工程抗體是按人類設(shè)計所重新組裝的新型抗體分子，可保存或增加天然抗體的特異性和主要生物學(xué)活性，去除或減少無關(guān)結(jié)構(gòu)〔如 Fc片段〕，從而克服單克隆抗體在臨床應(yīng)用方面的缺陷 ? 研究成功的基因工程抗體有：嵌合抗體、重構(gòu)抗體、單鏈抗體等。 第六十二頁，共六十三頁。 內(nèi)容總結(jié) 第二章 免疫球蛋白與抗體。免疫球蛋白除分布于體液中之外，還可存在于 B細(xì)胞膜上?！菜摹掣鶕?jù)根據(jù)抗原性分：。根據(jù) Ig重鏈抗原性的差異， Ig可分為 5類：。 F(ab′)2片段與抗原結(jié)合可發(fā)生凝集和沉淀反響， pFc′片段失去生物學(xué)活性。〔 ADCC〕 (重點 ).。占血清總 Ig的 75%～ 80%，半衰期約 20～ 23天?！? IgG還參與抗腫瘤免疫，同時也是引起 Ⅱ 型、 Ⅲ 型變態(tài)反響及自身免疫病的抗體 第六十三頁，共六十三頁。
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