江蘇省漣水縣第一中學(xué)高中生物42分子生物學(xué)技術(shù)練習(xí)蘇教版選修1-資料下載頁
2024-11-15 08:21本頁面
【導(dǎo)讀】1．下列有關(guān)PCR技術(shù)的敘述，不正確的是()。解析PCR一般要經(jīng)歷30多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為變性、退火和延伸三步。術(shù)可用于基因診斷，判斷親緣關(guān)系等。PCR技術(shù)是在體外進(jìn)行的。當(dāng)溫度緩慢降低后，兩條彼此分離的DNA鏈又會(huì)重新結(jié)合成雙鏈。DNA的熱變性原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚和結(jié)合。下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則合成新的DNA鏈，稱為延伸。4．變性作用是指核酸雙螺旋結(jié)構(gòu)被破壞，雙鏈解開，但共價(jià)鍵并未斷裂。過程中，引起變性的因素是()。進(jìn)行，因此，在PCR反應(yīng)中，選用升高溫度使DNA變性。當(dāng)引物與DNA母鏈結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物的3′端開始延。擴(kuò)增和DNA序列測定。下列表1和表2分別表示用PCR擴(kuò)增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。這種酶在高溫下仍保持活性，因此在PCR擴(kuò)增時(shí)可以。56℃～72℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占________。如果模板DNA分子共有a個(gè)堿基對，其中含有胞嘧啶m個(gè)，則該DNA分子復(fù)制10次，
【正文】 ℃ ～56 ℃ ～ 72 ℃” 溫度循環(huán) 3次， 則在形成的子代 DNA中含有 15N標(biāo)記的 DNA占 ________。 (4)如果模板 DNA分子共有 a個(gè)堿基對，其中含有胞嘧啶 m個(gè)，則該 DNA分子復(fù)制 10次，需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸 ________個(gè)。 (5)PCR中由堿基錯(cuò)配引起的變異屬于 ________。假設(shè)對一個(gè) DNA分子進(jìn)行擴(kuò)增，第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配，則擴(kuò)增若干次后檢測所有 DNA的擴(kuò)增片段，與原DNA相應(yīng)片段相同的占 ________。 解析 (1)高溫所起的作用類似于解旋酶，使雙鏈 DNA變?yōu)閱捂湣?(2)C過 程為 PCR技術(shù)的延伸階段， 當(dāng)溫度上升至 72 ℃ 左右時(shí)，溶液中的四種脫氧核苷酸在 Taq聚合酶的作 用下合成新的 DNA鏈。 Taq聚合酶是耐高溫的，高溫下不變性，所以一次性加入即可。(3)PCR技術(shù)遵循半保留復(fù)制的特點(diǎn)。經(jīng)過三次循環(huán)，共產(chǎn)生 23個(gè) DNA分子，其中有 2個(gè) DNA分子含有 15N標(biāo)記。 (4)在一個(gè)雙鏈 DNA分子中， C＋ T占堿基總數(shù)的一半，故 T的數(shù)目為 a－ m，復(fù)制 10次，相當(dāng)于新增加了 (210－ 1)個(gè) DNA分子，故需補(bǔ)充 T的數(shù)目 (210－ 1)(a－ m)。 (5)基因中的堿基對改變屬于基因突變。對一個(gè) DNA分子進(jìn)行擴(kuò)增，第一次循環(huán)時(shí)某 一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配，以后按正常配對方式進(jìn)行擴(kuò)增，錯(cuò)配鏈作模板擴(kuò)增得到的都是突變的 DNA分子，原正常鏈擴(kuò)增得到的 DNA分子都是正 常的 DNA分子，故若干次后檢測所有 DNA的擴(kuò)增片段，與原 DNA相應(yīng)片段相同的占 50%。 答案 (1)C (2)Taq聚合酶 一次 不需要 DNA模板，分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物，四種脫氧核苷酸，通過控制溫度使 DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行 (3)25% (4)(210－ 1)(a－ m) (5)基因突變 50%
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